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氟作为一种人体必须的微量元素，适量的摄入对人体有益，缺氟易患龋齿病，过量的氟对人体产生危害，甚至引起氟中毒，造成严重的氟骨症和氟斑牙。茶叶是易聚氟性作物，特别是老茶，含氟量很高[１，２]。
近年也有报道饮用了高氟茶叶引起氟中毒的事件。茶叶中氟含量的测定一直被许多学者重视。氟离子选择电极法和分光光度法是最常见的方法[3，4]，但灵敏度不高，易受干扰。离子色谱法基体效应大，预处理复杂[5]。用高效液相色谱法测定茶叶中的氟，可以克服离子色谱法的局限性，具有更高的灵敏度和选择性。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
1.1.1 Agilent 1100液相色谱带紫外检测器。
1.1.2 氟标准储备液 称取经110℃干燥2h的氟化钠0.2210ｇ，溶解于纯水中，定容至100ｍＬ。
1.1.3 乙酸缓冲溶液 称取85ｇ乙酸钠，溶于800ｍL纯水中，加入60ｍL乙酸，纯水稀释至1000ｍL，调节pH至4.5。
1.1.4 氟试剂溶液 称取0.385ｇ氟试剂于少量纯水中，滴加氢氧化钠溶液（40ｇ/Ｌ）使之溶解，然后加入0.125ｇ乙酸钠，加纯水至500mL。暗处冷藏。
1.1.5 混合溶液 25mL氟试剂溶液，10mL缓冲液，25mL硝酸镧溶液（2mol／mL），40mL丙酮，混匀。
1.2 实验方法
1.2.1 络合反应 取适量含氟溶液于10mL容量瓶中，加入4.0mL混合溶液，混匀，30min后，加入1.0mL三乙胺，加水定容，混匀，15min后测定。
1.2.2 色谱分析条件 色谱柱：Thermo ODS C18柱100×4.6mm柱；流动相：甲醇－乙酸缓冲溶液(10∶90)；流速：1.00mL/min；紫外检测器波长：556nm；进样量：10μL。
1.2.3 样品制备 将茶叶60℃烘干2h，打碎过40目筛，准确称取0.5～1.0ｇ样品于50mL烧杯中，加80℃的去离子水40mL，浸泡40min，加水至刻度。
1.2.4 样品测定 取制备好的试样10μL，与标准溶液测定相同的色谱条件进行分析测定，保留时间定性，峰面积定量。
2 结果与讨论
2.1 色谱条件的选择
2.1.1 络合体系的稳定性 氟与硝酸镧、氟试剂所形成的络合物在溶液中不够稳定，因为络合物分子上，还有一个水分子同La3+配位，如果该水分子被疏水性配位体取代，则络合物的溶解性、稳定性和最大吸收波长等物理化学特性将发生改变。为了解决该络合体系的稳定性，本实验加入三硝基苯胺、乙腈、三乙胺等有机试剂进行试验。在显色体系中加入三硝基苯胺，络合物水溶性减弱，溶液不均匀，加入乙腈，易产生沉淀也不能解决稳定性问题。加入三乙胺后，络合物在溶液中很稳定，并且在色谱中分离较好。三乙胺能有效限制柱中硅醇基团对样品分子的作用，克服次保留效应。三乙胺的加入大大减少了保留时间，明显改善了色谱峰的形状。但是在络合体系中如果先加入三乙胺，再加入氟溶液，不发生络合反应。因此试剂加入顺序应为，氟溶液加混合试剂，混匀30min后，加入三乙胺，然后加水至刻度。
2.1.2 色谱柱的选择 试验了 C18柱、硅胶柱和CN柱，硅胶柱和CN柱分离效果不好，我们最终选用 C18柱。
2.1.3 流动相及流速的选择试验了甲醇－水、乙腈－水、甲醇－乙腈、甲醇－乙酸缓冲溶液等体系，结合分离情况及保留时间，改变混合比例。最后选甲醇－乙酸缓冲溶液 (10∶90)作流动相，流速为1mL/min。
2.1.4 检测波长的选择 在200nm～700nm波长内，分别对样品空白、试剂空白、络合体系溶液扫描，该络合物在266nm和556nm有吸收峰。若在266nm检测，试剂空白峰面积大，干扰标准及样品的测定。因此，选择556nm作为检测波长。
2.2 样品处理条件的选择
2.2.1 茶叶中氟的浸出率与水温的关系 有文献报道，氟的浸出率与水温有关，从室温到80℃，随着水温的升高，氟浸出率增加，温度继续上升，氟浸出率平衡[６]。我们对水温的选择不再作进一步的研究，选择80℃为样品的浸泡温度。
2.2.2 茶叶中氟的浸出率与时间的关系 取1.00g样品，加80℃的去离子水50mL，间隔一定时间测定样品的氟含量，结果表明，氟的浸出率在前6min增加明显，40min左右趋于平衡。见图1。
图1 氟的浸出率与时间的关系
2.3 定量分析
2.3.1 标准曲线 在已选定的色谱条件下，将配制好的标准溶液系列进行分析，以氟的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明氟浓度在0. 10～1.20mg/Ｌ范围内，与峰面积呈良好的线性关系，相关系数为0.9996。
2.3.2 精密度 在标准曲线范围内，取高中低3种浓度的试样溶液，每种浓度的试样溶液取10个平行样，测定试样溶液中氟的峰面积，考察精密度，结果见表1。氟的相对标准偏差为2.1%～3.9％，该法具有较好的精密度。
表1精密度试验(n=10)
表2加标回收率
2.3.4 检出限 检测限以3倍噪声水平所相当的待测物质的量计算，氟的检测限为0.01mg/L。
4 参考文献
[1]马立峰，阮建云，石元值，等．中国茶叶中的氟近十年来的研究进展[J]．生态环境，2003，12（３）：342－345．
[2]马立峰，阮建云，石元值，等．茶叶中氟的测定方法研究[J]．茶叶通报，2003， 25（３）：103－104．
[3]Yu Guangqian，Wei Honglian，Li Xinquan，etal．Determination of trace fluoride in hairby dissolving method[Ｊ]．Chin．J．of
Endem iology，1996，15（5）：304－305．
[4]He Rong heng，Xiu Huanhong．Spectrophotom etric determination of trace fluoride based on the inhibitory effect on the formation of trinary complex[J]．Chin．J Environ Sci， 1996，17（4）：64－66．
[5]赵立达，鲁成银．茶叶中氟的检测方法[J]．中国茶叶，2003，1：17－18．
[6]刘超，吴方正，傅柳松，等．茶叶中的氟含量测定方法研究[J]．农业环境保护，1998，17（３）：132－135．
(收稿日期：2006-03-07)
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