【www.zhangdahai.com--自查自纠报告】
[摘要] 目的 探讨血管紧张素1-7和乙酰胆碱对血管紧张素Ⅱ及苯肾上腺素引起的缩血管效应的舒张作用的差异。方法 用恒温[（37±0.5)℃]灌流装置测定乙酰胆碱或血管紧张素1-7引起的大鼠胸主动脉血管环舒张反应。结果 乙酰胆碱抑制苯肾上腺素引起的大鼠主动脉收缩反应的作用比血管紧张素1-7强（P-9]mol・L-1和[（227±14）×10-9]mol・L-1；而对血管紧张素Ⅱ引起的大鼠主动脉收缩反应，血管紧张素1-7的抑制作用比乙酰胆碱强（P-9]mol・L-1和[（273± 12）×10-9]mol・L-1。结论 血管紧张素1-7对血管紧张素Ⅱ诱导的血管收缩的舒张作用比乙酰胆碱强，而对苯肾上腺素诱导的血管收缩的舒张作用则比乙酰胆碱弱。�
[关键词] 血管紧张素1-7；血管紧张素Ⅱ;乙酰胆碱;苯肾上腺素；动脉环；大鼠�
[中图分类号] Q425
[文献标识码] A
[文章编号] 1671-7562(2007)02-0090-04��
Difference of regulation of angiotensin1-7 and �achtylcholine on relaxation of rats aorta��
LI Bo-ping1,QIN Xu-ping2，LIU Fei2，XIAO Yun-bin2，ZHU Bing-yang2，LIAO Duan-fang�2
(1.Department of Physiology,Nanhua University,Hengyang 421001,China;2.Institute of Pharmacy and Pharmacology,�Nanhua University,Hengyang421001,China)��
Abstract:Objective To explore the relaxation effect of angiotensin1-7(Ang1-7)or acetylcholine(Ach)on rats aorta contraction,which were induced by angiotensin Ⅱor phenyladrenalin.Methods Aorta of rats were placed in constant temperature[（37±0.5)℃]filling device,and the relaxation reaction induced by Ang1-7 or Ach was recorded by physiological recorder.Results The inhibition effect of Ach on the aorta contaction induced by phenyladrenalin was stronger than Ang1-7（P-9] mol・L-1 and[（227±14）×10-9] mol・L-1.The inhibition effect of Ang1-7 on the aorta contraction induced by anyiotensin Ⅱ was stronger than Ach（P-9] mol・L-1and [(273±12)×10-9] mol・L-1 respectively.ConclusionThe relaxation effect of Ang1-7 on rats aorta contraction induced by angiotensin Ⅱ was stronger,but weaker when the contraction was induced by phenyladrenalin,than acetylcholine.�
Key words:angiotensin1-7;angiotensinⅡ;acetylcholine;phenyladrenalin;aortic ring；rats�
(Modern Medical Journal,2007,35:90-93)��
肾素血管紧张素系统（renin-angiotensin system,RAS）由肾素、血管紧张素、血管紧张素转化酶和血管紧张素受体组成，其中血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)是其发挥生物学效应的主要成分，它通过引起血管收缩、细胞肥大与增殖促进醛固酮的分泌和细胞外基质的形成，在高血压、心肌肥厚等心血管疾病的发生中起重要作用[1]。目前发现RAS与其它神经系统在机体内存在相互作用而影响心血管功能[2]，如AngⅡ分泌增多可抑制感觉神经末梢降钙素相关基因(CGRP)的释放[3]，并可增加交感神经释放去甲肾上腺素和其它缩血管物质的作用。血管紧张素1-7(angiotensin1-7,Ang1-7)为RAS的另一个主要物质，在RAS内部与AngⅡ相对抗，在平衡机体血压方面起重要作用[4]，其作用机制仍不清楚。为了探究不同系统中的活性物质对血管功能的相互影响，本实验以大鼠离体血管条为研究对象分别观察Ang1-7和副交感神经递质乙酰胆碱(Ach)对AngⅡ和拟肾上腺素药苯肾上腺素的缩血管作用的影响，为进一步研究其作用机制做实验性探索。�
1 材料与方法�
1.1 材料�
雄性Wistar大白鼠，体重160~180g，由南华大学动物实验部提供。二道生理记录仪(型号LMS-2B)为成都仪器厂出品，Ang1-7和血管紧张Ⅱ为 Sigma公司产品，苯肾上腺素、Ach和配置Ringer-Locke的其它试剂均为国产分析纯。
1.2 离体血管环的制备 �
大鼠脱臼致死，迅速打开胸腔，取出主动脉，置于通以O�2的Ringer-Locke(NaCl 9.0g・L-1、 KCl 0.42g・L-1、CaCl�2 0.24g・L-1、NaHCO�3 0.5g・L-1、Glucose 1.0g・L-1）溶液中，仔细分离血管周围组织，清洗管内血液，剪成3.0~4.0mm长的血管环，固定于持续通O�2、恒温[（37±0.5）℃]的Ringer-Locke液浴槽内，并通过张力换能器连于二道生理记录仪上。给予血管环1.5g静息张力，平衡60min后先以苯肾上腺素或AngⅡ10�-7 mol・L-1收缩血管环，然后分别给予不同剂量（10�-8、10�-7、10�-6mol・L-1）的Ach或Ang1-7舒张血管，观察两者舒张离体血管作用的差异。�1.3 实验分组�
根据实验目的将实验分为4组，每组6只大鼠。（1)苯肾上腺素（10�-7mol・L-1）+Ach（10�-8、10�-7、10�-6mol・L-1）组；（2)苯肾上腺素（10�-7mol・L-1）+ Ang1-7（10�-8、10�-7、10�-6mol・L-1）组；（3）Ang Ⅱ（10�-7mol・L-1）+Ach（1×10�-7、2×10�-7、3×10�-7mol・L-1）组；
（4）Ang Ⅱ（10�-7mol・L-1）+ Ang1-7（1×10�-7、2×10�-7、3×10�-7mol・L-1）组。�
1.4 观察指标�
分别观察和测量加入各种试剂后引起舒张和收缩反应的最低克数，同时以血管舒张张力分别占苯肾上腺素（10�-7mol・L-1）或AngⅡ（10�-7mol・L-1）引起收缩张力的百分率表示药物的舒张百分率，并计算各剂量反应的半数抑制浓度，以IC�50表示。�
1.5 统计学处理�
数据以x-±s表示，组间比较采用单因素方差分析，P-1时，Ach对大鼠动脉血管环的舒张百分率比Ang1-7略强，但差异无统计学意义(P>0.05)；当浓度上升到10�-6mol・L-1时，Ach舒张百分比上升幅度加大，与Ang1-7相比差异有统计学意义(P-9mol・L-1，Ang1-7 IC�50为（227±14）×10-9mol・L-1]，且二者差异有统计学意义(P-1、2×10�-7和3×10�-7mol・L-1时，Ang1-7和Ach对大鼠动脉血管环的舒张百分率呈浓度依赖性增高，Ang1-7在各浓度时的舒张百分率均明显高于Ach(P-9mol・L-1,Ang1-7IC�50为（157±8）×10-9mol・L-1]，差异有统计学意义(P1R)维持血管张力和水盐代谢平衡。在某些病理刺激下，RAS活性增强，AngⅡ生成过多或代谢失衡造成心血管系统结构和功能的紊乱，导致心血管系统疾病。目前认为AngⅡ还有生长因子作用，长期刺激细胞能引起血管平滑肌细胞的增生和心肌细胞的肥大，导致心血管重构，其细胞内信号通路已基本弄清楚[1]。�
最近的研究认为在RAS内部还存在另一平衡机制。在体内不仅存在ACE，而且还存在ACE�2，ACE�2可以使AngⅠ代谢成Ang1-9继而生成Ang1-7，AngⅡ也可通过ACE�2水解去一个氨基酸而生成Ang1-7。Ang1-7与AngⅡ虽然都是AngⅠ的产物，但其作用与AngⅡ迥然相反，能使血管舒张，对抗AngⅡ的作用。Yoram等[4]对大鼠神经组织和血浆中的血管紧张素含量进行了系统的分析，结果表明，与AngⅠ和AngⅡ一样，Ang1-7是大鼠神经组织和血浆中主要的血管紧张素。�
有研究报道Ang1-7对抗AngⅡ主要通过两个机制：（1)Ang1-7与AngⅡ竞争前体物质限制AngⅡ合成或通过羟脯酰肽链内切酶(PE)、羟脯酰羧肽酶(PCP)灭活AngⅡ，调节AngⅡ的含量。它通过激肽、NO、前列腺素(PG)产生与AngⅡ完全不同的扩血管降压作用，以及抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用。提示Ang1-7可能是RAS调节自身活性的重要物质[4-7]。（2)有实验表明Ang1-7能够通过血管紧张素2型受体（AT2R）或一种非血管紧张素1型/血管紧张素2型（非AT1/AT�2）受体促进体外培养的平滑肌细胞、猪和人的血管内皮细胞释放前列环素（PGI�2）/前列腺素E�2(PGE�2)，并且具有种属差异性[5-8]。钟健等[9]研究发现，Ang1-7明显抑制AngⅡ对动脉环的收缩作用，对内皮完整的动脉环比去除内皮的动脉环作用更明显；Ang1-7同样明显抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞［Ca�2+］i上升幅度；AngⅡ能下调AT1R mRNA，而Ang1-7上调AT1R mRNA，AngⅡ和Ang1-7对AT2R mRNA影响不明显。我们的实验结果也证实了这一点。�
本研究结果显示，Ach抑制苯肾上腺素收缩血管的能力比Ang1-7强，相应地Ach的半数抑制浓度比Ang1-7小，对AngⅡ(10�-7mol・L-1)引起的血管收缩效应，Ang1-7比Ach的抑制作用大，并且呈浓度依赖性增大,Ang1-7和 Ach的IC�50也存在统计学差异。造成差异的可能解释是Ach和苯肾上腺素为神经系统的一对活性物质，而Ang1-7和AngⅡ为RAS系统内的一对活性物质，不同系统内的活性物质的对抗性强，因而对苯肾上腺素来说Ach抑制作用更强，而对AngⅡ来说Ang1-7的抑制作用更强。另外我们的研究还发现苯肾上腺素收缩血管作用较快，而AngⅡ收缩血管作用缓慢，这也说明神经系统对应激反应快，能迅速调节机体功能；而属于内分泌系统的RAS对应激反应慢，它主要对高血脂、高血压、动脉硬化等的长期刺激发挥调节作用，引起心血管系统病理性改变。AngⅡ收缩血管的潜伏期比苯肾上腺素长，说明两者收缩血管机制存在着差异，这可能与两种受体后效应机制有关。�
综上所述，本研究发现以苯肾上腺素为收缩血管物质时,Ach舒张大鼠动脉环的能力比Ang1-7强；而以AngⅡ为收缩血管物质时，Ang1-7舒张大鼠动脉环的能力比Ach强。其机制还需要进一步探讨。�
[参考文献]�
[1]秦旭平,廖端芳,李元建.血管平滑肌细胞的增殖与调控[J].中国动脉硬化杂志,2001,9(5):450-454.�
[2]Kawasaki H.Effects of chronic administration of antihypertensive drugs on vasodilation mediated by calcitonin gene-related peptide-containing vasodilator nerves in spontaneously hypertensive rats[J].Clin Exp Pharmacol Physiol，1992,19（8）:569-573.�
[3]Qin X P,Ye F,Liao D F,et al.Involvement of CGRP in depressor effect of losartan or perindopril in rats[J] Eur J Pharmacology,2003,464(1):63-67.�
[4]Yoram Y,Chana Y.Hypothesis ACE�2 modulates blood pressure in the mammalian organism[J].Hypertension,2003,41(4):871-873.�
[5]乔木.血管紧张素Ang1-7研究新进展[J].高血压杂志，2000,8(1):5-8.�
[6]Brosnihan K B,Li P,Ferraio C M.Angiotensin-(1-7)dilates canine coronary arterise through kinis and nitric oxide[J].Hypertension,1996,27(3 Pt 2):523-528.�
[7]Porsti I,Bara A T,Busse R,et al.Release of nitric oxide by angiotensin-(1-7)from porcinecoronary endothelium:implications for a novel angiotensin receptor[J].Br J Pharmacol,1994,111(3):652-654.�
[8]Zhou Y Z,Deng H W,Li Y J.Angiotensin-(1-7)dilates guinea-pig coronary arteries via nitric oxide[J].中国药理与毒理学杂志,2001,15(2):111-115.�
[9]钟健，祝之明，杨永健，等.血管紧张素1-7舒血管机制的研究[J].高血压杂志,2001，9（3）：232-234�
[收稿日期] 2006-09-11
“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文”
