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【摘要】 目的 探讨IL．5、IL．12与哮喘的关系。方法 大鼠48只，分为正常对照组和支气管哮喘组(模型组)。大鼠尾静脉取血分离血清,应用 ELISA法,测量其血清IL．5、IL．12的水平。结果 对照组的IL．5、IL．12的检测结果分别为(15．84±3．65)pg/ml,(79．32±6．48)pg/ml,模型组的分别为(39．15±13．13)pg/ml，(34．24±0．78)pg/ml。结论 哮喘患者血清IL．5水平升高,IL．12水平下降。
【关键词】 哮喘;白细胞介素．5;白细胞介素．12
支气管哮喘(以下简称哮喘)是一种慢性气道炎症性疾患,由多种炎性细胞和炎性介质及细胞因子参与其过程,近年来,不少学者认为细胞因子失衡在哮喘的发病中起着重要的作用,本文旨在探讨哮喘患者血清中IL．5和IL．12的变化。
1 材料与方法
1．1 动物及分组 大鼠48只,雌雄各半,体质量(200±40)g,由河南省实验动物中心提供，大鼠随机分为两组:正常对照组和支气管哮喘组(模型组),每组24只。
1．2 试剂 卵白蛋白(OVA)为Sigma公司产品,YY99801型雾化吸入器购自上海亿圣科技有限公司，大鼠．5．10检测试剂盒购自武汉博士得生物工程公司。
1．3 动物模型的建立[1] 模型组动物腹腔注射OVA10 mgAL(OH)3~10 mg,生理盐水1 ml的悬液,第10天重复1次,对照组动物腹腔注射AL(OH)3~10 mg生理盐水1 ml,第14天开始连续5 d两组动物均以1%OVA雾化吸收发敏,每次20 min,观察临床症状。
1．4 细胞因子的检测 发敏5 d后,以大鼠尾静脉取血2 ml,离心分离血清,低温冰箱保存,用ELISA法分别检测IL．5和IL．12水平，操作严格按照试剂盒说明书进行。
1．5 统计学处理 实验数据均以均数±标准差表示,两组间比较采用t检验,检验水准a=0．05。
2 结果
对照组的IL-5、IL．12的检测结果分别为(15．34±2．96)pg/ml,(79．32±5．99)pg/ml,模型组的分别为(39．15±11．10)pg/ml,(34．18±0．78)pg/ml。模型组与对照组比较,模型组大鼠血清中IL-5水平显著高于对照组，(P[2]。许多研究表明IL-5由于对EOS具有重要的调节作用从而参与哮喘的发病过程。本实验表明模型组大鼠血浆中IL-5水平明显高于对照组。IL．12是近年来发现的具有抗炎作用的细胞因子,能下调多种炎症介质。考虑有以下机制：①调节体内辅助T淋巴细胞亚群(Th1/Th2)细胞免疫应答的平衡。 IL．12通过促进纯真型T细胞分化为Th1细胞;对特异性抗原进行应答过程,发挥协同刺激功能，诱导分化后的Th1细胞产生大量的IFN．r(r干扰素);促进IFN．r产生型的记忆Th1细胞的分化等作用而激发机体诱导IFN．r的产生,因而形成一个正反馈调节,加强Th1类细胞的应答反应,抑制Th2型的细胞免疫应答；②诱导细胞因子产生 IL．2与IL．2RB2结合通过JAK2(酪氨酸激酶)/STAT4(signal transducerandactivator of transcription protein4)途径增加IFN．r的产生[3]。IL．12还可以诱导多种细胞因子的产生,包括肿瘤坏死因子a(TNF．a)、粒．巨噬细胞集落刺激因子(GM．CSF)、IL．2、IL．8、IL．10等。IL．12还通过IFN．r的作用抑制TGF2B(转化生长因子B)的产生。有报道认为,IL．12可抑制IL．4及IL．4诱导的IgE的产生[4]。由此可见,IL．12及其所诱导的细胞因子构成了复杂的网络系统,它们之间的相互作用调节着机体细胞之间的相互平衡;③刺激活化CD3+T细胞(包括CD4+和CD8+)增殖 ，IL．12诱导T细胞最大增殖水平低于IL．2的刺激增殖作用,但刺激50%最大增殖所需细胞因子浓度远低于IL．2；④促进B细胞Ig产生和Ig类型转化，IL．12对某些种类的Ig产生具有抑制作用。在小鼠体内,IL．12可使与Th1型细胞免疫应答有关的IgG2a、IgG2b、IgG3的产生增加10~1000倍,而抑制与Th2型细胞免疫应答有关的抗体如IgG1,IL．12还能够强有力地抑制IgE的应答反应;⑤IL．12可抑制嗜酸粒细胞向气道内浸润，其机制一方面是通过直接抑制嗜酸性粒细胞的活性,另一方面是通过抑制血管内皮细胞上粘附分子的表达,从而阻滞嗜酸粒细胞与血管内皮细胞的粘附;⑥IL．12能够增强NK细胞及LAK细胞(淋巴因子激活的杀伤细胞)的细胞毒活性,并能加强特异性CTL(肿瘤特异性杀伤T淋巴细胞)的应答反应。减轻气道炎症,降低支气管高反应性,减少哮喘的发生，具有潜在的治疗作用。在本实验中观察到模型组大鼠血清中IL．12水平明显低于对照组。结合IL-5水平检测的结果,说明哮喘中细胞因子紊乱,其实质是Th0向Th1/Th2功能性极化失衡的结果[5．7]。本研究表明,IL-5、IL．12可能在哮喘的发病中起到一定的作用,因此对支气管哮喘的诊断及治疗有一定的意义。
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