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【摘要】 目的 建立液相色谱法测定唐福康胶囊中罗格列酮含量的方法。方法 选用C18�色谱柱,以0.01 mol/L醋酸胺(用冰醋酸调节pH值至3.5)-乙腈(45:55)为流动相,UV检测波长为230 nm。 结果 本方法的回收率为99.31%,RSD=0.9%(n=6)。结论 该方法简便,准确,重现性好。
【关键词】HPLC法;罗格列酮
Application of HPLC Determination Tang Fukang capsules rosiglitazone
CHENG Yong-ming.Insititute for Drug Control of Shanxi,Weinan 714000,China
【Abstract】 Objective To develop a HPLC method for the contents determination of Rosiglitazone intangfukang Capsules.Methods The C18� column was used with a mobile phase was 0.01 mol/L ammonium acetate solution(adjusted to pH=3.5 with acetic acid)-Acetonitrile(45:55).The detection wavelength was 230nm.Results The average recovery was 99.31%(n=6).Conclusion The method is simple,sensitive andaccurate.
【Key words】 HPLC; Rosiglitazone
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作者单位:714000陕西省渭南市药检所
罗格列酮属噻唑烷二酮类口服抗糖尿病药,通过提高胰岛素敏感性而控制血糖水平。其主要作用机制为激活脂肪、骨骼肌和肝脏等胰岛素所作用组织的PPARg核受体,从而调节胰岛素应答基因的转录,控制血糖的生成、转运和利用。单一服用本品,并辅以饮食控制和运动,可控制2型糖尿病患者的血糖。其含量测定方法多采用高效液相色谱法[1,2]和紫外分光光度法[3]。HPLC法对于其唐福康胶囊中罗格列酮的含量测定方法未见报道。本文建立了高效液相色谱法测定复方制剂中罗格列酮的含量测定方法。试验结果表明,该方法操作简便、准确、使罗格列酮与其他组分能很好的分离,结果重现性好。
1 仪器与试药
液相色谱仪(日本岛津LC-2010AHT);马来酸罗格列酮对照品(由中检所提供,批号:100952-200701,含量按C18�H19N3O3S•C4H4O4计为:99.5%);唐福康胶囊(市售);所用试剂乙腈为色谱纯,其他均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱:Venusil MP C18�(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相:以0.01 mol/L醋酸胺(用冰醋酸调节pH为3.5)-乙腈(45:55),紫外波长230nm;柱温为室温;理论板数按罗格列酮峰计应均不低于2000;流速:1.0 ml/min;进样量:10 μl。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取马来酸罗格列酮对照品适量,加流动相稀释成含罗格列酮0.08 mg/ml的溶液,作为储备液。精密量取储备液5 ml,置25 ml的量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得。
2.3 标准曲线的制备分别精密量取上述对照品溶液1、5、10、15、20 μl照2.1色谱条件分别进样,记录色谱图,以进样量为横坐标(μg),色谱峰面积A为纵坐标绘制标准曲线。计算罗格列酮的回归方程分别为A=2.1412×10�4+1.7482×10�6•C,r=0.9998。结果表明,罗格列酮在进样量为0.016~0.32μg范围内线性良好。
2.4 精密度试验 取上述对照品溶液10 μl ,重复进样6次,其峰面积的RSD为 0.46%。
2.5 稳定性试验 取标准曲线项下的对照品溶液,每隔1 h测定1次,共考察8 h,结果表明,溶液在8 h之内其峰面积基本不变。
2.6 加样回收率的实验
2.6.1 供试品溶液的制备取本品10粒,精密称定,将内容物倾出,混匀,精密称取1粒的量置50 ml量瓶中,精密量取上述对照品储备液各6、10、12 ml分别加入上述量瓶中,再加流动相适量,超声溶解20 min,放至室温,加流动相稀释至刻度,摇匀,经0.45 μm的滤膜滤过,即得。
2.6.2 测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10 μl,照2.1项下的方法注入液相色谱仪,记录色谱图,分别计算罗格列酮的回收率。回收率的结果见表1,图谱见图1。
表1
罗格列酮加样回收率测定结果(μg/ml,%)
已知量�(μg/ml)
加入量�(μg/ml)
测得量�(μg/ml)
回收率�(%)
平均�(%)
RSD�(%)
9.229.6018.7298.95
9.169.6018.6999.27
9.2316.0025.1199.25
9.3516.0025.0698.1899.310.9
9.1719.2028.2799.47
9.1919.2028.53100.72
对照品供试品 A-罗格列酮
图1 HPLC图
2.7 含量的测定
2.7.1 供试品溶液的制备取本品10粒,将内容物研细,精密称取相当于2粒量的细粉,置50 ml的量瓶中,加流动相适量,超声溶解20 min,放至室温,加流动相稀释至刻度,摇匀,经0.45 μm的滤膜滤过,即得。
2.7.2 测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10 μl,注入液相色谱仪,照2.1项下的方法,计算罗格列酮含量为0.46 mg/粒。
3 讨论
罗格列酮的保留时间随流动相pH值的变化会发生很大的变化,将流动相胺的pH值调节到3.5时,罗格列酮与其他干扰成分得到了很好的分离,分离度符合要求,峰形对称,取得了满意的效果。本方法简便、可快速、准确的测定此制剂中的罗格列酮。
参 考 文 献
[1] 尚京川,邓安容,等.反相高效液相色谱法定量测定血浆中马来酸罗格列酮.西南师范大学学报(自然科学版),2003,6:148-149.
[2] 刘晓,张相林.反相高效液相色谱荧光法测定人血浆中酒石酸罗格列酮含量.中日友好医院学报,2006,20(4):99-102.
[3] 杨玉芳,周燕文.紫外分光光度法测定马来酸罗格列酮片中罗格列酮含量.广西中医学院学报,2004,02:51-52.
