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[摘要] 目的：探讨p21基因表达与口腔扁平苔藓及口腔鳞状细胞癌发生、发展的关系。方法：应用免疫组织化学技术（S-P法）检测p21基因在20例正常口腔黏膜组织、38例糜烂型口腔扁平苔藓和38例口腔鳞状细胞癌标本中的表达。结果：38例口腔糜烂型扁平苔藓患者中p21阳性表达率为34.21%（13/38）；在口腔鳞状细胞癌组织p21阳性表达率为60.53%（23/38）和正常组织中检测到p21的表达为10%，口腔鳞状细胞癌组织、口腔扁平苔藓、正常组织之间的p21基因的表达差异有统计学意义（P 1.2.2 结果判定阳性显色为细胞核和（或）胞浆被染成黄褐色、呈现粗细不等、深浅不一的颗粒状。参照Fromowitz的方法，显微镜下（20×10）对细胞染色作如下评分，①着色：无着色为0，淡黄色为1，棕黄色为2，棕褐色为3 ；②判定标准：（-）阳性细胞数为＜10%，（+）阳性细胞数10%～30%，（++）阳性细胞数为30%～50%，（+++）阳性细胞数50%～100%。
1.3 统计学处理
采用SPSS 10.0统计软件进行统计学处理。p21蛋白在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌中表达的差异性采用χ2检验。计量资料均以均数±标准差（x±s）表示，如果符合正态分布且方差齐，则采用单因素方差分析，两组之间比较采用t检验。计数资料用秩和检验。以P0.05）。见表1。
以上各组做两两比较发现，鳞状细胞癌组与正常对照组相比，阳性细胞计数差异有统计学意义（χ2=35.714，P=0.000，P0.05）。
3 讨论
目前普遍认为扁平苔藓是一种慢性浅表性炎症。皮肤和黏膜可单独或同时发病[3]。有独特的临床症状和特征。女性多于男性。据统计大约有44%的皮肤扁平苔藓患者伴发有口腔黏膜病变[4]。患病率为0.5%～1.0%，文献报告有0.4%～12.3%的癌变率。因糜烂型OLP易恶变，且糜烂多发生在黏膜表浅的角化层和颗粒层，而免疫病理变化主要发生在较深的棘细胞层和基底细胞层及上皮基底膜区，故不影响基因的表达，而肿瘤的发生和发展是处于一种动态平衡的状态，通过细胞凋亡和细胞增殖来调节体内细胞数目及状态的稳定。细胞增殖速度太快或者死亡速度的减慢，都将导致细胞群体数量增加，很多肿瘤是由于细胞增殖与死亡的速度平衡失调所造成的。
ras癌基因族主要包括三种癌基因：H-ras、K-ras和N-ras，它们具有相似的结构。每一种ras基因都分别编码一种高度同源的鸟苷酸结合蛋白，分子量为21 kb，故称p21蛋白。研究表明，三种ras基因中任一种基因的活化都是人类肿瘤中最常见的优势突变。作为转移相关基因，活化的ras可诱导多种肿瘤细胞的转移表型，并能提高某些细胞在免疫缺陷动物或同系动物体内的转移能力，因p21蛋白是一种GTP结合蛋白，可通过细胞内信号传导途径影响细胞的生长、转化、浸润转移等特性[5]。而当ras基因突变后，mRNA转录加速DNA无法控制的复制，使p21蛋白大量表达，促使肿瘤的形成。
已有研究表明在肺癌前列腺癌及胃肠道癌[6-8]细胞中p21蛋白过量表达。研究发现，ras 蛋白表达率随着胃癌临床进展而逐渐升高[9-10]。Tahara E等[11]研究也得出相似的结论，认为 ras基因突变可作为临床判断预后的重要指标。然而，Czemiak等研究发现，发展缓慢预后好的肠型胃癌，ras-p21免疫组化的阳性率高于预后较差的弥漫性胃癌[12]。
本实验对口腔鳞状细胞癌（鳞癌）及口腔扁平苔藓，正常组织的p21 蛋白表达作了对比研究，附表表明，各组两两比较，鳞癌Ⅰ级组与正常对照组相比，阳性细胞计数差异有统计学意义（χ2=35.714，P=0.000，P0.05）。由此表明检测p21 表达蛋白可以反映口腔鳞状细胞癌及口腔扁平苔藓的病变严重程度。糜烂型口腔扁平苔藓p21表达为34.21%，提示有癌变的可能，在临床上要注意复查。
本实验中鳞癌Ⅰ级p21表达为83.33%，鳞癌Ⅱ级p21表达这57.14%，支持在趋于分化成熟及高分化的上皮细胞中p21 表达水平高，金岩等[13]的研究结果显示，在颊黏膜上皮的癌变过程中，从癌前病变状态开始就有H-ras 的高表达，体现为p21 免疫组化染色的PI值升高。此外还观察到ras 表达水平由邻近癌旁而又无明显恶性变指征的癌旁上皮（EAC）升高至鳞癌Ⅰ级为最高，随着口腔鳞状细胞癌肿瘤细胞分化程度的降低又出现下降。对组织学的观察结果也显示出p21表达的高水平与细胞分化状态和程度关系密切，无论是在正常、癌前、癌旁及癌变的上皮中，上皮细胞分化趋于成熟而又未到最终的角化期时有 ras基因的高表达。因此，检测P21 蛋白表达对口腔扁平苔藓的监测及对口腔鳞状细胞癌的早期诊断具有重要价值，p21蛋白可作为口腔癌早期诊断的一个可靠标志物。p21在口腔鳞状细胞癌中高度表达可能与口腔扁平苔藓预后及癌的发生发展有关，p21 蛋白可以作为一种可靠的标志物，指导临床治疗和判断预后，对癌的早期诊断具有重要价值。至于p21蛋白在鳞癌Ⅲ级中表达低水平的原因有待进一步探讨。ras原癌基因在口腔癌的发生中占有重要的地位。
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（收稿日期：2010-08-11）
