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【摘要】 中药荔枝草,植物形态 二年生草本,高15～90 cm。主产于江苏、浙江、安徽,几乎分布于全国各地,资源丰富。功能有清热,解毒,凉血,利尿。用于咽喉肿痛、支气管炎、肾炎水肿、痈肿;外治乳腺炎、痔疮肿痛、出血。实验证明荔枝草有抗氧化和抗菌等其他药理活性。
荔枝草干燥全草20 kg粉碎,用体积分数为的乙醇加热回流提取3次,每次2 h,过滤,减压回收溶剂,提取液过夜放置除掉水层不容物,减压浓缩得8L混悬液,依次用石油醚、氯仿和正丁醇等量萃取3次,回收溶剂得3个部分。利用各种色谱手段,包括硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备薄层色谱和开放ODS柱色谱等,从荔枝草氯仿层中分离得到化合物1高车前素 (25 mg)、2柳穿鱼素(16 mg),从正丁醇层中分离得到化合物3高车前苷、4泽兰黄酮。化合物2为首次从该植物中分离得到。
1 荔枝草化学成分及药理活性研究进展
中药荔枝草,主产于江苏、浙江、安徽,几乎分布于全国各地,资源丰富。在《本草纲目》中记载为唇形科鼠尾草属植物荔枝草Salvia plebeia R.Brown的地上部分,别名有雪见草、蛤蟆草、青蛙草、皱皮草等。该草性凉,性苦、辛,《四川中药志》中记载“性平,味辛,无毒。”功能有清热,解毒,凉血,利尿。用于咽喉肿痛、支气管炎、肾炎水肿、痈肿;外治乳腺炎、痔疮肿痛、出血[1,2,3]。荔枝草的研究主要集中在20世纪70、80年代,作为一种平喘、抗菌、抗病毒药物,人们对荔枝草的化学成分做了基础研究。国外报道了荔枝草中的黄酮、木质素、二萜类等成分,国内对黄酮、木质素、甾醇、挥发油亦有报告[4]。
1.1 荔枝草的化学成分研究进展
1.1.1 黄酮类 从荔枝草分离的黄酮类成分有高车前素、高车前苷、泽兰黄酮等[7]。其中高车前苷为荔枝草的主要成分,含量较高。目前已有很多关于荔枝草中黄酮类成分的研究报道,但并没有关于黄酮类成分抗氧化作用的报道。
1.1.2 二萜类 在各种文献报道中,从鼠尾草属植物中分离了多种萜类化合物,萜类化合物是鼠尾草属植物主要活性成分之一,具有抗寄生虫、抗菌、抗肿瘤和抗氧化等作用,是目前该属植物研究的热点。主要为松香烷型二萜及克罗烷型二萜等,在荔枝草中已分到了多个二萜类化合物,如木香醌酸[5]等。
1.1.3 其他类 在荔枝草中还含有酚性物质、挥发油、皂甙,强心甙、不饱和甾醇及多萜类。种子含脂防油、硬脂酸、油酸、亚油酸[3]。
1.2 荔枝草的药理作用研究进展
1.2.1 抗氧化作用 荔枝草具有显著的抗氧化功能,荔枝草的各部分都有抗氧化作用。董新伟、曹国峰等人将荔枝草全草根、茎、叶、花、果实五部分分别粉碎、真空干燥后,做OSI实验,结果表明荔枝草中以花和叶两部分的抗氧化作用最强,根和果实两部分的抗氧化性最弱,茎部有较明显的抗氧化性,花和叶两部分的抗氧化性随着浓度的增加而增强[6]。翁新楚、谷利伟等人将荔枝草用乙酸乙酯提取,去溶剂,然后再分别用石油醚、乙醚、丙酮和乙醇依次溶解。各组分的抗氧化活性依次降低:乙醚溶解部分>原提物部分>石油醚部分>丙酮部分≥乙醇部分[8]。
1.2.2 止咳平喘作用 我国民间有用荔枝草煎汤饮、晒干研末烙干饼治疗咽炎、气管炎等用法。《四川中药志》更有荔枝草“清肺热,除风湿。治咳嗽,痢疾,牙痛及痒疹,疮毒。”的记载。郭仁永等的研究表明,荔枝草液可延长氨水引起的小白鼠咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,能对抗乙酰胆碱所致豚鼠离体气管平滑肌的收缩作用,延长豚鼠引喘潜伏期[9]。从而证明了荔枝草具有止喘平咳作用。
1.2.3 祛痰抗组胺作用 荔枝草中的黄酮苷具有祛痰,止咳作用。刘旭杰、李玲等人的研究表明用药后的小鼠ip50 g/L酚红生理盐水溶液处死后,荔枝草组可使酚红排出量比对照组增加42%,从而证明了荔枝草具有祛痰作用[10]。同时他们的研究表明荔枝草既有抗组胺作用又有可能作用于组胺受体。
1.2.4 抑菌
裴云萍等通过对荔枝草进行水提、醇提取后,进行体外抑菌实验。结果表明荔枝草的水提液及醇提液对金黄色萄葡球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞茵均有较强抑制作用[11]。裴云萍经过进一步研究发现,荔枝草水煎液对白色葡萄球菌、肺炎双球菌、甲型链球菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞茵有较好抑制作用[12]。孙伟光等对荔枝草农用活性进行研究。结果表明荔枝草乙醇提取液对苹果腐烂病菌等27种病原真菌均有较好的抑制作用[13]。
1.2.5 抗病毒 荔枝草的全草粗提物对单纯疱疹病毒有体外抑制作用,有效成分是咖啡酸。荔枝草治疗带状疱疹的机制可能有以下2个方面:①凉血止痛利水功能,荔枝草凉血止痛及利水效应能减轻带状疱疹的炎性反应,从而达到止痛等治疗目的;②解毒杀虫功能,荔枝草很有可能直接杀灭水痘-带状疱疹病毒,从而达到治本的目的[14]。
1.2.6 治疗肺癌
荔枝草含有多种黄酮类物质、挥发油、皂甙等有效成分,具有清热解毒、消痈肿、疗恶疮、止咳血的功效。李欣、隋秀竹用荔枝草煎液治疗肺癌患者,效果较佳[15]。
1.2.7 其他作用 在其他一些报道中荔枝草还有治疗实验性气管炎,瘙痒性皮肤病和痔疮等疾病[3]。
2 荔枝草的黄酮类成分的研究
利用各种分离纯化手段,从荔枝草提取液中分离得到四种黄酮类化合物,通过理化性质和多种波谱手段鉴定了它们结构,其中化合物2为首次从该植物中分离得到。化合物名称、结构及鉴定方法见表1。
表1
化合物名称、结构及鉴定方法
No.NamesStructuresMethods
1高车前素(Hispidulin) 1H NMR
2柳穿鱼素(pectinarigenin) 1H NMR
3高车前苷(homop lantaginin) 1H NMR
4泽兰黄酮(nepetin) 1H NMR
化合物1:浅黄色针状结晶(氯仿-甲醇),mp 284~285 ℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性,提示结构中有酚羟基,10%硫酸乙醇溶液显黄色,盐酸-镁粉反应阳性,推测为黄酮类化合物。1H-NMR(600 MHz,DMSO-d6):13.08(1H,s,5-OH)、7.92(2H,d,J = 9.0 Hz,H-2′,6′)、6.92(2H,d,J = 9.0 Hz,H-3′,5′)、6.79(1H,s,H-3)、6.60(1H,s,H-8)、3.75(3H,s,C6-OCH3),10.70和10.36为7位和4′位的羟基信号。将1H-NMR数据与文献[1,2]对照基本一致,故鉴定该化合物为高车前素(hispidulin)。
图1 compound 1
化合物2:浅黄色针状结晶(氯仿-甲醇),mp 204~205 ℃。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性,提示结构中有酚羟基,10%硫酸乙醇溶液显黄色,盐酸-镁粉反应阳性,推测为黄酮类化合物。1H-NMR(600 MHz,DMSO-d6):8.03(2H,d,J = 9.0 Hz,H-2′,6′)、7.10(2H,d,J = 9.0 Hz,H-3′,5′)、6.86(1H,s,H-3)、6.60(1H,s,H-3)、3.75(3H,s,C4′-OCH3)、3.85(3H,s,C6-OCH3)。将1H-NMR数据与文献[3]对照基本一致,故鉴定该化合物为柳穿鱼素(pectinarigenin)。
图2 compound 2
化合物3:淡黄色粉末。三氯化铁-铁氰化钾反应阳性,提示结构中有酚羟基,10%硫酸乙醇溶液显黄色,盐酸镁粉反应阳性,推测为黄酮类化合物。1H-NMR(300 MHz,DMSO-d6):3.75(3H,s,C6-OCH3)、6.88(1H,s,H-3)、6.93( 2H,d,J = 8.76 Hz,H-3′,5′) 、7.01(1H,s,H-8)、7.69( 2H,d,J = 8.76 Hz,H-2′,6′),10.42(1H,4′- OH),12.96(1H,5-OH),5.11(1H,d,J =5.0 Hz, H-1�)3.20～3.81为糖上H-2�～H-6�。以上数据与文献[4] 对照基本一致,故鉴定该化合物为高车前苷。
图3 compound 3
化合物4:淡黄色针状结晶(氯仿-甲醇),10%硫酸乙醇溶液显黄色,三氯化铁-铁氰化钾反应阳性,推测为黄酮类化合物。1H-NMR(300 MHz,DMSO-d6):3.74(3H,s,C6-OCH3)、6.55(1H,s,H-3)、6.67(1H,s,H-8)、6.89(1H,d,J =8.1 Hz,H- 5′)、7.39(1H,d,J =2.2 Hz,H- 2′)7.43(1H,dd,J =2.2,8.1Hz,H- 6′)。将1H-NMR数据与文献[4]对照基本一致,故鉴定该化合物为泽兰黄酮。
图4 compound 4
3 实验部分
3.1 荔枝草化学成分的提取与分离 荔枝草干燥全草20 kg粉碎,用体积分数为70%的乙醇加热回流提取3次,每次2 h,过滤,减压回收溶剂,提取液过夜放置除掉水层不容物,减压浓缩得8L混悬液,依次用石油醚、氯仿和正丁醇等量萃取3次,回收溶剂得3个部分。利用各种色谱手段,包括硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备薄层色谱和开放ODS柱色谱等,从荔枝草氯仿层中分离得到化合物1 和2,从正丁醇层中分离得到化合物3和4。其提取分离流程见图5、6、7。
图5 荔枝草提取流程图
图6 荔枝草氯仿层分离纯化过程
图7 荔枝草正丁醇层分离纯化过程
4 结论
4.1 对唇形科鼠尾草属植物荔枝草的黄酮类化学成分进行了研究。利用系统溶剂萃取法、反复硅胶柱色谱、凝胶、反相柱色谱等方法分离得到四个化合物。通过理化性质和波谱数据分析鉴定了它们的结构。高车前素、柳穿鱼素、高车前苷和泽兰黄酮。化合物2为首次从该植物中分离得到。
4.2 据文献报道,荔枝草的化学成分有很好的药理活性,氯仿层中还含有抗氧化作用成分,正丁醇层也有待深入研究。
4.3 分离过程中,有好些性质相近的化合物都很难将其分开,由于时间有限就将它们放弃了,希望以后能有更多的人对荔枝草进行更深入、更系统的化学研究,进一步揭示其药理活性的化学物质基础。
参 考 文 献
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