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生化检验目前已经成为临床医师诊断疾病、观察疗效、判断病情的发展和预后不可缺少的工具。随着近年来科学技术的不断发展,生化分析仪自动化程度和校准品质量的不断改进,大大提高了临床生化检测的精密度和准确度[1],但分析过程之外的影响因素常被忽视。本文对引起生化检验结果误差的各种分析前因素进行简单阐述。关键词血液标本;生化检验;分析前因素
1生理因素对生化检验结果的影响
1.1年龄
正常生长期儿童由于骨骼生长使得碱性磷酸酶(ALP)增加,比健康成人要高3倍左右[3];新生儿肝脏缺乏葡萄糖酸转移酶,血清总胆红素(TBiL)和间接胆红素(IBiL)水平比正常成人高[4] ;年龄还可以影响血脂和肾功能[5]。因此年龄的变化会影响某些生化检验的结果,因而应针对这些项目在不同的年龄段制定相应的参考范围。
1.2性别
不同性别其体内的性腺激素水平不同,并且生育期女性的性腺激素水平还随其处在月经周期的不同阶段而有明显变化;因此对于有性别差异的项目,需要针对不同的性别制定相应的参考范围。
1.3运动
强烈的肌肉运动可以明显加快体内的新陈代谢,因此一般主张在清晨抽血,住院病人可在起床前抽血,门诊的病人应至少休息15分钟后采血。
1.4情绪
情绪激动、紧张可影响神经-内分泌系统功能,使血清游离脂肪酸、乳酸、血糖(GLU)等升高。
1.5生活方式
非素食者尿酸(UA)、尿素氮(BUN)的水平比素食者高;吸烟和饮酒会对某些生化项目产生影响[6],嗜烟者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下,而饮酒后会使血浆UA、乳酸增加,长期饮酒者血清HDL-C、γ-谷氨酰转移酶(GGT)水平亦会增高。
1.6妊娠
当女性处于妊娠阶段时,微量元素水平明显降低;妊娠期代谢需求增加,使血清TG、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)增加;在妊娠后期,胎盘产生的雌激素和绒毛膜促性腺生长激素使血糖的水平升高。妊娠是特殊的生理过程,临床医疗人员查看孕妇的检测结果时应充分考虑妊娠的影响。
2饮食对生化检验结果的影响
抽血前1天进食高蛋白食品会导致BUN、UA等结果偏高,但对Cr影响不大[7];高比例不饱和脂肪酸食物可减低胆固醇含量;含咖啡因饮料可使血浆游离脂肪酸增加。临床生化血样原则上必须坚持空腹采血。但是如果让患者空腹时间过长超过16小时后,因为过度饥饿反而会使血清ALb、TRF、GLU、补体C3含量下降,而血清胆红素因清除率减少而上升[8]。
3药物对生化检验结果的影响
药物对检测的影响非常复杂,国内外有许多专著论述[9]。可分为物理干扰和化学干扰,物理干扰是由于药物进入体内后使血清的物理性质如颜色等发生变化进而影响某些项目的检测,而化学干扰是由于药物本身的化学性质如药物的强还原性等对体内某些物质测定的影响。值得注意的是长期静脉点滴的病人可使标本稀释,造成某些项目结果偏低,又因静点时高浓度的药物进入标本中,使许多检验结果发生巨大变化。因此护理人员应避免在静点时和用药4h以内采取检验标本。
4标本采集对生化检验结果的影响
4.1采集时间
同一患者在不同时间所采集标本的检验结果会有明显的差异,生化检验原则上都是于清晨早餐前或进食12h后采集[10]。这是因为血液生化指标参考值,通常以空腹血样的检测值为统计样本。
4.2采集部位
临床上常有危重患者需要多通道输液,在采集他们的血标本出现困难时,应尽可能避免在补液侧肢体采血,以防止血液被稀释。
4.3抗凝剂
草酸盐、枸橼酸盐、EDTA的抗凝原理是与血液中的凝血因子ⅣCa2+发生反应从而阻断凝血反应,用这些抗凝剂分离的血浆一般不适用于酶活性的测定。肝素对ALT、AST、LDH、ACP无影响,适用于急诊时迅速分离进行测定,但值得注意的是肝素对CK等酶有轻微的抑制作用,因此临床上生化检测除纤维蛋白原测定外,基本都是采用血清标本[11]。
5标本处理、储存对生化检验结果的影响
5.1标本处理
只需要低速离心分离血清即可。
5.2标本储存
标本分离前放置太久可造成溶血以及血液葡萄糖浓度进行性下降 [12];Na+、Cl-、K+静置2-3h后则会有明显上升的趋势[13]。血清蛋白对酶蛋白有一定的稳定作用,如果没有细菌污染,大部分酶存在于清蛋白中可在室温下保存1-3天而活性不受影响[11],此外大部分酶在低温下比室温更稳定;LDH在低温下反而不如室温稳定。因此标本应尽快分析,对于暂时不能分析的标本应该先密封然后保存于4℃冰箱中。
6标本状态对生化检验结果的影响
6.1溶血
溶血能引起很多指标明显异常。引起溶血的原因有很多,有研究者主张抽血时不束扎止血带[10],若确需扎带,则不宜过紧,且不能超过1分钟。溶血的干扰机理有以下三种[14]:①血细胞中高浓度组分逸出,使测定结果增高(如:LDH、ACP、AST、K+[2]等)。另外若某些物质的血细胞内浓度低于血清浓度时检测值降低(如Ca2+、Na+、Cl-、UA等)。②血细胞成分进入血清中后因化学反应而引起其他物质的浓度改变。③血红蛋白本身颜色对检测的光学干扰。
6.2脂血
血液脂浊对吸光度一般产生正向干扰,导致某些项目如ALB、UA、总蛋白(TP)等测定结果偏高。而在pH10以上的环境中,乳糜中的TG会皂化可使血清逐渐变清,使许多比色法测定如Ca2+、Cr、ALP、TP等结果产生负误差,此时可以用双波长法[15]或设计样本空白消除干扰。在某些实验室用乙醚处理脂血以消除脂浊对生化检验结果的影响,但是乙醚处理的脂浊标本不能排除对ALB、GGT、LDH、BUN、GLU、Ca2+等指标的干扰[16]。
6.3黄疸
胆红素对反应结果产生黄色化合物的比色分析影响很大,一般可以用样本空白或两点比色法、连续监测法来消除胆红素对黄色结果的影响。此外胆红素作为一种还原剂对氧化反应有干扰,如氧化酶法测定GLU、TG、UA、胆固醇等,导致结果偏低。此时也可用双波长法[15]或设计样本空白消除干扰。
综上所述,影响生化检验结果的标本因素确实很多,亦很复杂,因此分析前的标本质量问题不能忽视。检验人员除了应该不断的加强专业学习外,还应该多向临床各科室宣传和讲解分析前标本的质量控制对保证检验结果的重要性。临床医疗人员也应该了解标本因素对检验结果的影响,在分析病情时应排除这些影响因素。临床科室与检验科携手合作,共同把好分析前的质量关,保证检验结果的准确性,为临床提供可靠的诊疗依据。
参考文献
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