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【摘要】 目的 检测bcl-2和ki-67在结肠癌及癌前病变中的表达情况，并探讨其临床意义。方法 采用免疫组化方法检测56例结肠癌，38例结肠腺癌，20例正常结肠粘膜，分别进行bcl-2和ki-67蛋白的检测。结果 bcl-2阳性表达率在腺癌与腺瘤中基本相同，阳性表达强度腺癌明显高于腺瘤(P[1]，细胞凋亡是由基因调控的细胞程序性死亡[2]。bcl-2是重要的细胞凋亡调节分子，在肿瘤的发生发展中起着重要作用。ki-67参与细胞周期的调节，从理论上讲，与肿瘤发生也可能有密切的关系。本组试验采用免疫组话的方法检测bcl-2和ki-67在结肠癌及癌前病变中的表达及临床意义。�
1 材料与方法�
1．1 一般资料 结肠癌手术标本56例，内镜下电切腺瘤标本38例均来自本院病理科，所有病例均经过病理组织学证明。对56例结肠癌进行分级，高分化14例，中分化24例，低分化18例，有淋巴结转移的34例，无淋巴结转移的22例。另选取20例正常结肠粘膜作对照。�
1．2 免疫组化染色 标本经10%甲醛固定，石蜡包埋切片，切取4 μm厚切片。bcl-2和ki-67抗体和免疫组化试剂盒均购于武汉博士德公司，采用免疫组化SABC法，基本步骤严格按试剂盒说明书进行。切片脱蜡入水；3%H�2O2处理5～10 min；正常山羊血清孵育20 min；加一抗1～2 h；加生物素标记二抗，加SABC(链霉素合素-生物素-过氧化物酶复合物)20 min，DAB显色，苏木精复染，中性树胶封固，阳性对照用一直的阳性片作对照，阴性对照用PBS代一抗。�
1．3 结果判断 bcl-2以细胞膜、细胞浆显示棕黄色或棕褐色颗粒为阳性，ki-67阳性表现为细胞核内出现棕黄色颗粒。选取5个不同高倍视野（×100），每个视野计数100个肿瘤细胞，取其平均值为细胞的阳性率，参照文献[3-5]，阳性细胞数≥50%为强阳性(+++)，30%～49%为阳性(++)，10%～29%为弱阳性(+)，2检验)，应用SPSS 11．5软件包完成，以P 2．2 ki-67细胞核表达 56例结肠腺癌中弱阳性(+)2例，阳性(++)18例，强阳性(+++)34例，表达率为96．43%；38例结肠腺瘤中弱阳性(+)11例，阳性(++)4例，强阳性(+++)3例，表达率为47．37%；20例正常黏膜中无1例表达。结肠腺癌的阳性表达率及表达强度相助高于腺瘤(P0．05)，有淋巴结转移和无淋巴结转移的表达情况差异无统计学意义(P>0．05)。结果表明，ki-67阳性表达及表达强度对诊断腺癌和监视腺瘤癌变有重大意义，对结肠癌早期发现有较高价值，而与结肠腺癌的分化程度和淋巴结转移无明显相关性。国外有学者研究指出：癌细胞分化程度越低，伴有淋巴结转移者ki-67表达越强[6]。本结果似有不同，有待进一步研究。�
bcl-2是从滤泡性淋巴瘤中分离处的一种癌基因，也是细胞凋亡抑制因子，具有抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的功能。bcl-2作为抑制凋亡的基因，其过表达能延长细胞寿命，使已有DNA受损的细胞生存期延长，以致增加其他基因突变的机会，从而导致肿瘤的发生[7]。本组研究中，正常结肠粘膜、腺瘤和腺癌中均有bcl-2表达，腺瘤与腺癌的阳性表达率亦无显著性，腺癌的表达强度则明显高于腺瘤(P0．05)。�
参 考 文 献�
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