淋巴细胞染色体畸变率 淋巴细胞染色体畸变和微核分析估计生物剂量体系研究

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  为了解不同剂量的放射线对血细胞的致畸作用和实验室正常值,采用不吸烟的健康成年人外周血,用不同剂量的X射线照射,用以估计受照剂量的生物体系。采用0~3 GY之间的剂量范围进行外照射,经外周血淋巴细胞的培养,染色体标本的制备、染色体畸变分析后与相关剂量的对应关系进行比较。同时做微核分析,观察淋巴细胞微核与受照剂量的相关关系。这项技术对受意外辐射照射的剂量估计,放射性疾病的诊断治疗,了解实验室淋巴细胞染色体畸变和微核的正常值范围,有积极的意义。
  
  1材料和方法
  1.1材料
  1.1.1不吸烟的健康成年人外周血、1 640外周血淋巴细胞培养基。
  1.1.2主要仪器XH―600C直线加速器(高LETX射线)、培养箱、离心机、多媒体显微镜。
  1.2方法采用GB/T 12715 ―91的染色体畸变分析估计生物剂量方法进行操作。微核按WS/T 187―1999方法操作,采用常规培养法。
  1.2.1细胞培养 选用不吸烟的健康成年人外周血、用XH―600C直线加速器高LET的X射线0、0.1、0.5、 1.0、 1.5、 2.0、2.5 、3.0 GY照射,37 ℃保温1 h后取0.3 ml接种于加入小牛血清、PHA、肝素的1 640培养基中,37 ℃培养48 h后加秋胺使最终浓度为0.5~0.75 μmol/ml,继续培养至72 h。收细胞、制片、染色。微核采用常规培养法观察。
  1.2.2显微镜分析每个照射剂量分析100个细胞的染色体,分析畸变类型有:单断、双断、环、微小体、双着丝。1 000个淋巴细胞的微核,分析典型的与主核相切或分开,结构与主核相同,着色与主核一致,大小为主核1/3以下的小核。
  
  2结果
  2.1各项指标的显微镜分析结果见表1。
  
  3分析与讨论
  3.1实验室染色体畸变的正常值范围根据《外照射慢性放射病诊断标准及处理原则》,血细胞染色体的畸变率的增高是各实验室的正常值高限作标准。因此将放射从业人员的正常值范围定在总畸变率0~4%之间,超过4%为异常。高于8%,又有双着丝粒出现,可判断超过了1 GY的剂量,有慢放病的危险。
  3.2实验室微核率的正常值范围由于常规培养法受培养条件、受检者个体差异因素影响,各实验室之间差异较大,正常个体自发率波动范围较大。我们用培养法分析微核辐射剂量在0~0.5 GY时微核率为0~5‰。在对放射人员常规体检中观察微核率范围一般在0~3‰左右。根据《外照射慢性放射病诊断标准及处理原则》,根据放射工作人员辐射剂量<0.5 GY,将培养法微核率正常值定在<5‰。
  3.3放射工作从业人员染色体畸变分析和微核分析―生物剂量估计可行性染色体分析技术作为辐射生物剂量学的可选方法已被一致承认,在世界范围内已广泛被应用。对大剂量1次性照射,辐射泄漏等意外事故,通过染色体畸变和微核分析可估计其受照剂量。因为从相关系数界值表查得在相关系数为0.925时P(1)=0.0005,证明辐射剂量的增加与染色体畸变的增加有显著性相关。其中以总畸变率和微核的相关性更好。双着丝在高剂量段的意义更大。但对慢性小剂量照射主要是指长期小剂量低剂量率的分次照射诱发的染色体畸变是否存在阈值和适应性反应;个体差异及各种影响因素的交互作用对小剂量电离辐射和累积剂量的估计变得困难。
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本文来源:http://www.zhangdahai.com/gerenwendang/minqingriji/2019/0404/54337.html

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