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��【摘要】 目的 研究内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG�VEGF)在多囊卵巢的表达，并与血管内皮生长因子(VEGF)的表达进行比较，探讨EG�VEGF在多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制中的作用。方法 采用免疫组化SP法检测多囊卵巢及正常卵巢组织中EG�VEGF及VEGF的表达情况。结果 EG�VEGF在研究组中的表达水平显著高于对照组(P=0.001)。VEGF在研究组中的表达水平明显高于对照组(P=0.021)。研究组中EG�VEGF的表达水平高于VEGF的表达水平(P=0.036)，二者表达无相关性(P=0.327)。对照组中EG�VEGF的表达水平略高于VEGF的表达水平，但差异无统计学意义(P=0.655)，二者表达仍无相关性(P=0.928)。结论 EG�VEGF蛋白的过度表达促进多囊卵巢综合征患者的血管生成，与多囊卵巢综合征的发生相关。�
【关键词】
多囊卵巢综合征；内分泌腺来源的血管内皮生长因子；血管内皮生长因子；免疫组化
��The expression and significance of endocrine gland�derived vascular endothelial growth factor in polycystic oraries
WU Li�shu,REN Feng�yan,WANG Chun�xiao,et al.
Department of Obstetrics and Gynecology,The People’s Hospital of Daqing HeiLongJiang，163316,China
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【Abstract】 Objective To research the expression of EG�VEGF in polycystic ovaries and compare with VEGF,in order to explore the role of EG�VEGF in development and progression of PCOS. Methods The expression of EG�VEGF and VEGF in polycystic ovaries and normal ovarian tissues were detected by immunohistochemistry.Results The expression levels of EG�VEGF in the study group were significantly higher than those in the control group(P=0.001). The expression levels of VEGF in the study group were significantly higher than those in the control group(P=0.021). The expression levels of EG�VEGF in the study group were higher than that of VEGF(P=0.036),but there was no dependablity between the two factors(P=0.327). The expression levels of EG�VEGF in the control group were a little higher than that of VEGF,but there were no statistically significant(P=0.655),and there was no dependablity between the two factors(P=0.928). Conclusion Overexpression of EG�VEGFpromote angiogenesis of polycystic ovary syndrome and is associated with the progression of polycystic ovary syndrome. �
【Key words】
Polycystic ovary syndrome; EG�VEGF；VEGF；Immunohistochemistry
多囊卵巢综合征（PCOS）是常见的育龄妇女内分泌疾病之一，以卵泡内膜及间质的增生和过度血管化为主要特征,发病率为6%~8%。多年来由于确切的发病机制不清，一直缺乏理想的治疗手段。目前研究表明，血管生成及其相关因子在PCOS的发病中有一定的作用［1，2］。内分泌腺来源的血管内皮生长因子(Endocrine Gland�derived Vascular Endothelial Growth Factor，EG�VEGF)是最近发现的一个组织特异性血管内皮生长因子，主要表达在生成类固醇的内分泌腺组织，如卵巢、睾丸、肾上腺和胎盘组织［3�6］，可能与血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)互补，共同调节血管生成。明确EG�VEGF在多囊卵巢中的特异性作用，将对特异性基因治疗的开展具有重大意义。目前有关EG�VEGF在PCOS中的作用报道稀少，本文对多囊卵巢中EG�VEGF的表达进行研究，并与VEGF的表达进行比较，探讨EG�VEGF在PCOS发病机制中的作用。�
1 资料与方法�
1.1 一般资料 收集中国医科大学附属盛京医院及大庆市人民医院妇产科于1995年9月至2010年2月间收治的PCOS患者，参照欧洲人类生殖和胚胎协会(ESHRE)和美国生殖医学协会(ASRM)于2003年鹿特丹PCOS研讨会制定的标准［7］，确诊了63例作为研究组，年龄19~41岁，平均(28.14±5.02)岁，收集其腹腔镜下卵巢打孔术钳取或开腹手术楔形切取的部分多囊卵巢组织的石蜡标本。选取同期因非PCOS疾病的良性病变在手术时进行对侧卵巢剖探获得的正常卵巢组织的石蜡标本为对照组，共20例，年龄19~36岁，平均(28.05±4.40)岁，与研究组比较，差异无统计学方法(P>0.05)。其中卵泡期10例，黄体期10例，排除月经不规律、不孕症患者。两组入选患者术前三个月内均未使用性激素、促排卵剂或雄激素等药物。�
1.2 实验方法 进行HE染色，经病理学专家读片，选择具有颗粒细胞及卵泡膜细胞的多囊卵巢切片，并将对照组分为卵泡期及黄体期。采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白�过氧化物酶连接(S�P)法，以已知胎盘组织阳性切片作为阳性对照，以0.01 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(PBS)代替一抗作为阴性对照。羊抗人EG�VEGF多克隆抗体购自Santa Cruz Biotechnology公司，兔抗人VEGF多克隆抗体购自博士德生物工程有限公司，SP免疫组化试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司。�
1.3 结果判定 以细胞浆内出现棕黄色颗粒者为阳性。将免疫组化切片置于Olympus显微镜下(400×)观察，对所测视野进行准确定位后由摄像系统提取数字化细胞图像输入MetaMorph/Evolution Mp5.0/Bx51显微图像分析系统进行处理，每例随机选取6个完整而不重叠的视野进行半定量分析，测定EG�VEGF及VEGF蛋白免疫组化反应阳性颗粒的光密度(总密度/扫描面积)，以6张图像的平均光密度值代表该例EG�VEGF及VEGF蛋白的表达水平。�
1.4 统计学方法 统计结果用均数±标准差(x±s)表示，采用SPSS 13.0软件包进行分析。采用两样本均数比较的t检验，直线相关分析，P ［5］ Hamish M,Fraser,Julie,et al. Localization and quantification of cyclic changes in the expression of endocrine gland vascular endothelial growth factor in the human corpus luteum. J Clin Endocrinol Metab,2005,90(1):427�434.�
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［7］ The Rotterdam ESHRE/ASRM�sponsored PCOS Consensus Workshop Group. Revised 2003 consensus diagnostic criteria and long�term health risks related to polycystic ovary syndrome(PCOS). Hum Reprod,2004,19(1):41�47.�
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