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[摘要] 目的 初步探讨脑胶质瘤中MGMT、P53蛋白表达与胶质瘤临床病理的关系。方法 免疫组织化学(Envision两步法)检测49例脑胶质瘤中MGMT蛋白表达及P53蛋白表达。结果 49例脑胶质瘤MGMT蛋白表达阳性率为55.10%(27/49)。脑胶质瘤病理分级Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级MGMT蛋白表达阳性率分别为59.09%、50.0%、45.45%,各组间差异无统计学意义(P=0.754),MGMT蛋白表达在男性为59.26%,女性为50.0%,两者之间差异无统计学意义(P=0.517);MGMT蛋白表达在>50岁患者中为53.84%,≤50岁患者中为61.11%,两者之间差异无统计学意义(P=0.915)。27例MGMT蛋白表达阳性的组织中7例P53蛋白表达阳性;22例MGMT蛋白表达阴性的组织中12例P53蛋白表达阳性,胶质瘤组织MGMT与P53的表达呈负相关(r=-0.292,P 1.2 免疫组织化学方法
采用Envision两步法检测胶质瘤组织MGMT及P53蛋白表达。第一抗体鼠抗MGMT单克隆抗体(克隆号MT3.1,工作浓度1∶100)、鼠抗P53单克隆抗体(克隆号DO-7,工作浓度1∶50),二抗和Envision试剂盒,DAB显色剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。具体操作:连续石蜡标本4μm厚切片;梯度脱蜡水化;3%过氧化氢封闭内源性过氧化物酶活性,室温10min,磷酸盐缓冲液(PBS,pH=7.4)冲洗;2%山羊血清封闭非特异性抗原,室温30min;甩去多余血清后滴加一抗(MGMT、P53),37℃1～2h,PBS冲洗;加二抗IgG,37℃ 30min,PBS冲洗;DAB显色,显微镜下观察显色效果,蒸馏水冲洗终止显色;苏木素复染细胞核,酒精梯度脱水,透明树胶封片。分别设阳性、阴性和空白对照。
判断标准:MGMT蛋白定位在肿瘤细胞核或胞质内有棕黄色着色颗粒。P53蛋白定位在肿瘤细胞核,呈棕黄色着色颗粒。阳性细胞数>75%为强阳性(+++);阳性细胞在25%～75%为阳性(++);阳性细胞在10%～24%为弱阳性(+),阳性细胞数0.05)。男性脑胶质瘤中MGMT蛋白表达阳性率为59.26%,女性为50.0%,两者间差异无统计学差异(P>0.05)。发病年龄>50岁和≤50岁患者胶质瘤中MGMT蛋白表达阳性率分别为53.84%和61.11%,两者间差异无统计学差异(P>0.05)(表1)。�MGMT蛋白在细胞核表达强阳性�图1 胶质瘤组织MGMT蛋白免疫组织化学染色�结果(Envision两步法 ×200)�
2.2 脑胶质瘤组织MGMT蛋白表达与P 53蛋白表达关系
MGMT蛋白表达与P53蛋白表达相关分析结果显示,49例脑胶质瘤标本中,27例MGMT蛋白表达阳性的组织中,7例P53蛋白表达阳性,阳性率为25.9%;22例MGMT蛋白表达阴性的组织中,12例P53蛋白表达阳性,阳性率为54.5%。用Spearman等级相关分析,胶质瘤组织MGMT与P53蛋白表达呈负相关(r=-0.292,P
