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【摘要】 目的 探讨p53基因在子宫内膜癌发生发展中的作用，以及p53蛋白表达与其预后相关性。方法 应用免疫组织化学方法和TUNEL技术，对子宫内膜腺癌癌变过程中各种病变组织中p53蛋白和细胞凋亡进行测定。结果 p53蛋白在正常增生期子宫内膜、早期子宫内膜癌和晚期子宫内膜癌的表达率分别为8．31%、38．9%和57．1%。p53蛋白在晚期子宫内膜癌的表达率明显增高。结论 子宫内膜癌的发生发展，受p53基因调控，p53蛋白可能成为评判预后的指标。
【关键词】子宫内膜癌；p53基因；免疫组织化学方法
子宫内膜癌是妇科生殖道三大恶性肿瘤之一。近20年来发病率呈上升趋势，但有关子宫内膜癌发生的分子机制仍不明确。研究显示肿瘤的发生不但与细胞增殖、分化异常有关，而且细胞抑癌基因也参与其中。本文就子宫内膜癌中p53基因的表达进行研究，采用免疫组织化学方法检测p53蛋白，探讨子宫内膜癌发生发展机制和p53蛋白成为子宫内膜癌预后因子的可行性。
1 材料与方法
1．1 选取保定市妇幼保健院和保定市第一医院2006年9月至2007年9月收治的子宫内膜癌患者手术切除后石蜡包埋病理标本39例。患者年龄29～68岁，平均54岁，术前未接受化学治疗或放射治疗。全部为子宫内膜腺癌，按WHO组织分化标准高分化G1 15例，中分化G�2 21例，低分化G�3 6例;按FIGO标准手术分期为Ⅰ期18例，Ⅱ期12例，Ⅲ期8例，Ⅳ期1例，术后病理证实有淋巴结转移者12例。另取石蜡包埋正常增生期子宫内膜21例作为对照，其源自非子宫内膜癌而患有其他妇科疾病的患者。选取的标本经福尔马林固定石蜡包埋，切片厚度40 mm。
1．2 主要试剂与方法 p53单克隆抗体购自福建迈新生物技术有限公司。SP免疫组化试剂盒购自福洲迈新生物技术开发公司，采用免疫组织化学方法进行染色。一抗浓度均稀释为1∶200，以PBS液代替一抗作阴性对照，正常胃黏膜细胞核棕黄色染色为阳性对照。
1．3 结果判定
p53蛋白阳性产物定位于细胞核内或细胞浆。每例切片随机选择10个，高倍视野每个视野计数100个肿瘤细胞，总计1000个肿瘤细胞，根据细胞阳性的比例进行判断：>30%的肿瘤细胞染色与正常细胞相同时为正常表达，10%～30%的肿瘤细胞与正常细胞相同时为减弱表达，10%的肿瘤细胞与正常细胞相同或完全缺失为阳性。切片中阳性细胞数20%为阳性。
1．4 统计学方法 应用SPSS11．5软件，P2检验或四表格确切概率法。
2 结果
2．1 p53蛋白在子宫内膜不同组织中的表达情况 在正常增生期p53蛋白为细胞核着色，子宫内膜癌既可见于细胞核又可见于细胞质着色。早期子宫内膜癌中p53蛋白阳性表达率明显低于晚期子宫内膜癌。二者间p53蛋白表达差异有统计学意义，见表1。
2．2 p53蛋白与子宫内膜癌组织分级和淋巴转移关系随癌组织的分级增高，p53蛋白表达率明显上升，而淋巴转移也与这项指标改变有关，见表2。
3 讨论
p53基因蛋白是研究最为广泛的肿瘤抑制基因之一，野生型p53基因是通过停止细胞生长和诱导细胞凋亡而发挥其肿瘤抑制者的功能。突变型p53基因表达的蛋白可干扰野生型p53蛋白功能[1]。在转化和永生细胞中存在野生/突变p53复合物，导致基因组不稳定，突变型p53基因不仅丧失抑制活性反而具有促进恶性转化的活性细胞倾向于增殖、转化和癌变。突变型p53蛋白也可与其他癌基因协作使细胞获得增殖、转化和致癌潜能。突变型p53蛋白半衰期较野生型p53蛋白长，能沉积在细胞核中，故突变的p53蛋白用免疫组织化学方法可以检测出来，因此可以将检测率看做突变率[2]。p53基因被认为是恶性肿瘤发生与发展的主要原因。有研究表明p53基因发生于子宫内膜癌晚期。在病理分级1级、Ⅱ~Ⅲ级中二者相比差异有显著性，病理分级越高p53表达越高。本研究结果显示：正常增生期子宫内膜、早期子宫内膜癌、晚期子宫内膜癌，突变型p53蛋白渐增，三者p53蛋白阳性表达率差异显著；p53蛋白与子宫内膜癌组织分级和淋巴转移关系随癌组织的分级增高，p53蛋白表达率明显上升，而淋巴转移也与这项指标改变有关。这表明子宫内膜组织细胞受该种基因调控，突变型p53蛋白抑制筛除一些低恶性的细胞，随癌细胞手术分期与组织分化级别的增加，选择 有侵袭力的细胞群体，从而对子宫内膜癌的发展有促进作用。癌细胞组织分级特征与p53蛋白表达的相关性及p53有完备的检测试剂、简单的检测方法，癌细胞组织分级特征与p53蛋白表达的相关性提示p53可能成为子宫内膜癌预后因子。
参考文献
1 苏红，吕申，王长智，等.PTEN p53及hMSH2在子宫内膜癌组织中的表达及意义.中国妇科与产科杂志，2007，8：631-632.
2 付颖，徐金江，等.子宫内膜癌中细胞凋亡和p53基因的表达.中华现代中西医杂志，2004，2(4).
