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[摘要]目的：研究TGF-β1，Co-Ⅳ表达与CHB预后的关系。方法：对131例CHB首、末2次肝活检样本作TGF-β1，Co-Ⅳ免疫组化染色，部分样本进行了TGF-β1mRNA原位杂交测定。结果：TGF-β1，Co-Ⅳ表达变化、分布范围与肝组织炎症、血管增生及纤维化有关(P0.05）。提示TGF-β1， Co-Ⅳ表达变化随肝组织的炎症、肝纤维化的好转或加重而升降，这在3次、4次随访的肝活检标本中被进一步证实（表4）。
①②③④分别表示1次、2次、3次、4次肝活检
2.2 TGF-β1，Co-Ⅳ在不同肝活检标本中的表达变化
免疫组化染色显示，在正常肝组织汇管区的动、静脉肌纤维、内皮细胞质膜TGF-β1，Co-Ⅳ为阳性，余者阴性。而CHB肝组织TGF-β1，Co-Ⅳ表达则有以下特点：①原位杂交显示TGF-β1mRNA蓝色或紫蓝色细颗粒状，位于血管纤维化的间隔、血管壁及少数肝细胞质膜；②免疫组化染色显示TGF-β1位于小静脉的内皮细胞及血管纤维化区；③在阻塞的血管壁及内皮细胞示强阳性，与肝细胞接合部增生的小血管尤为显著；④桥接性血管及肝窦毛细血管化区�示强阳性；⑤明显炎症区的肝细胞质膜示强阳性。⑥Co-Ⅳ表达有条块形、圆形及弥漫形，主要分布于肝窦壁、血管间隔、纤维带及纤维瘢痕中。随访结果提示，TGF-β1，Co-Ⅳ随肝组织病理学好转或加重其表达程度和分布范围而增减（表3）。
3讨论
本研究提供了以下信息：①G与S病变明显不同，本组首次肝活检提示G1，G2，G3，G4分别占20%，18%，21%，41%;而S1~3，S4~6，S7~10则分别占31%，44%，18%，少数（7%）则为S0，然而其间可以互相转变，故认为CPH，CAH是不同的病变、肝纤维组织不可逆欠妥，G,S诊断较为科学。②G，S的病理转变亦有所不同，肝细胞变性坏死及炎症反应减轻较快，而肝纤维组织降解则较慢，在判断CHB病变是否加重时，前者肝活检间隔3~5个月与5~10年之间无差异性(P>0.05)，而纤维组织则有缓慢增加之势（表2）。③TGF-β1，Co-Ⅳ与肝细胞变性坏死、肝血管纤维化、肝窦毛细血管化有关，特别是在肝血管纤维化、肝窦毛细血管化形成区，TGF-β1，Co-Ⅳ表达程度明显增强，表明TGF-β1，Co-Ⅳ参与了血管纤维间隔、肝窦毛细血管化形成的整个过程并起着重要的作用。④资料提示，随着CHB肝病变的减轻，TGF-β1，Co-Ⅳ表达程度下降，分布范围缩小。
TGF-β1，Co-Ⅳ表达变化与肝脏的血管炎症、血管破坏、血管阻塞、血管增生和肝窦毛细血管化的程度、分布范围呈同步关系，表明TGF-β1，Co-Ⅳ在肝血管形成中是重要的物质。本资料提示，在CHB肝组织的炎症区，具有炎症肉芽肿样特征，并且随着CHB肝病变的减轻或加重而有不同的转化形式：即若肝病变减轻，则毛细血管化逐渐老化，形成纤维瘢痕；若肝病变加重，则毛细血管增生更加明显，向周围组织扩大，形成汇管~汇管、汇管~中央静脉桥接性血管周围炎症（坏死），病变严重者纤维性血管则向肝实质穿插，构成大小不一的假小叶。免疫组化染色显示，TGF-β1，Co-Ⅳ表达程度和分布范围明显增强扩大，表明在CHB肝纤维化、肝硬变及肝窦毛细血管化的动态变化中，TGF-β1，Co-Ⅳ担当一个重要角色。我们曾发现[4]，在CHB肝血管增生、改建中，肝窦内皮细胞的作用引人关注：在扩张的肝窦形成一较宽的旁路通道[5]，肝窦两旁肝细胞萎缩，顶端倒塌，少数窦内皮窗孔闭锁伴基膜形成，与肝细胞分离，窦周间隙扩大，形成一个新生的内皮细胞屏障[6]。在毛细血管增生区，肝板与肝板之间的内皮细胞有“芽苞”样结构，偶见一个腔隙直达肝窦。原位杂交显示TGF-β1 mRNA主要在肝窦内皮细胞、肌成纤维细胞表达，而TGF-β1，Co-Ⅳ表达则随肝纤维化转变而变化，提示TGF-β1，Co-Ⅳ参与了肝血管增生、毛细血管基膜构成、肝纤维化的形成与降解。
本研究提示，TGF-β1 mRNA表达与其蛋白的表达有一致性，提示在CHB病程中，肝细胞可能通过TGF-β1受体基因转录水平的改变而增强受体表达。尤其在活动性肝硬变期，由于肝组织TGF-β1自分泌作用，肌成纤维细胞受体进一步被激活，导致Co- 1/Co-Ⅳ生成增加。此外，TGF-β1还可抑制TGF-β1降解酶的产生，活性降底，并使一些抑制蛋白酶活性物质增加，引起细胞外基质堆积。
本研究用随访的肝活检标本，从蛋白质及分子水平，探讨了TGF-β1在CHB病理过程中的表达变化，作用机理，对预防和治疗肝纤维化有一定的参考价值。
[参考文献]
[1]中华医学会.病毒性肝炎防治方案[J].中华传染病杂志，2001,19（1）：56～62.
[2]严家春，刘健虎，马勇，等.肝炎组织学活动性指数的修改及预报组织学后果的价值[J].中华肝脏病杂志，1994，2（1）：39-42.
[3]姜泊，张亚历，周殿元.分子生物学常用实验方法[M].北京：人民军医出版社，1996.128-193.
[4]严家春，马勇，陈文笔，等.乙型肝炎肝窦病变的免疫组织化学及电镜观察[J].世界华人消化杂志1999；7（11）943-947.
[5]Dubisson L,Boussarie L,Bedin CA,et al.Transformation of sinusoids into capillaries in a rat model of selenium-indular regenerative hyperplasia:an lmmunolight and lmmunoelectron microscopic study[J].Hepatol，1995，21(3)：805-813.
[6]Bedossa L,Peltier E,Terris B,Franco D,Poynard T.transforming growth factor-beta 1(TGF-β1) and TGF-β1 receptors in normal,cirrhotic,and neoplastic human livers[J].Hepatol，1995，21(3)：760-765.
（收稿日期：2008-11-04）
[作者简介]徐长江，男，（1963-）主治医师。解放军第一二三医院肝病中心工作。
