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【摘要】 目的 探讨抗核小体抗体(AnuA)在系统性红斑狼疮(SLE)中的诊断意义及其与狼疮性肾炎(LN)的关系。方法 用免疫印迹法检测50例系统性红斑狼疮(SLE)患者、50例其他风湿性疾病患者以及30例健康体检者血清AnuA水平,同时检测血清ANA,抗dsDNA抗体、抗-Sm抗体。分析AnuA对SLE的诊断价值及其与狼疮性肾炎的关系。结果 AnuA在SLE患者的敏感性和特异性分别为70.0%和98.0%,敏感性高于抗dsDNA抗体、抗-Sm抗体,且有显著性差异;特异性与抗dsDNA抗体、抗-Sm抗体差异无显著性;AnuA在狼疮性肾炎患者中的阳性率为83.3%,在无肾损害患者中的阳性率为50.0%,二者有显著性差异(P0.05);AnuA高于抗dsDNA和抗Sm,且有统计学差异(P0.05),见表2。
在SLE诊断中,AnuA与抗Sm抗体、抗dsDNA抗体联合检测时敏感性显著提高,与单一检测比较有统计学差异(χ�2值分别为17.628、16.243,P0.10),即自身抗体的联合检测,提高了诊断的敏感性,并不降低特异性。ANA与AnuA联合检测与单一检测比较敏感性、特异性无统计学差异(χ�2值分别为2.901、18.296,P 3 讨论
SLE以患者血清中出现大量的自身抗体为主要特征,尤其是出现针对整个染色质(核小体)及其某些成分如组蛋白、dsDNA的自身抗体,核小体是真核生物细胞染色的基本单位,当细胞受到致病因素作用时,细胞发生线粒体肿胀,细胞膜破裂并导致核小体的释放。近年来,核小体的致病作用愈来愈引起人们的重视。越来越多的证据表明,DNA并非是引起SLE的免疫原,而由组蛋白和DNA组成的核小体很可能是SLE发病中最重要的自身抗原,启动最终的自身免疫反应。
核小体是人类SLE主要自体抗原之一,在诱导SLE、LN发生和发展,抗核抗体反应中起重要作用。1978年Hannested等[7]首先描述了AnuA。1993年Burlingame等[3]第一次以鼠模型显示AnuA由T辅助细胞免疫反应产生。SLE患者细胞凋亡异常及凋亡产物清除障碍导致的核小体过度释放、AnuA及抗dsDNA抗体的产生很可能是本病免疫异常的主要诱发环节之一[7,8]。核小体又可通过与靶细胞表面特异性受体的交互作用引起细胞坏死,从而使炎症加剧[9]。Berden等[10]认为细胞凋亡是机体产生核小体的唯一途径,同时凋亡过程还为这些自身抗原提供修饰,增强其免疫原性,当机体清除能力下降时,便激发自身免疫反应。生理情况下,凋亡形成少量核小体迅速被邻近单核巨嗜细胞吞噬,故不诱导炎症反应,不能在外周血清中检出凋亡核小体。病理情况下,大量细胞发生坏死或凋亡,产生核小体不能被及时清除,大量释放到细胞间质中,诱导机体产生一系列自身抗体,早期以AnuA为主,后期出现抗dsDNA抗体[11]抗组蛋白抗体[12-14]。而细胞凋亡和自身抗体是互相作用互相加强的,一些自身抗体进入细胞内,甚至到达细胞核,引起功能紊乱,诱发凋亡。
本研究显示,血清中AnuA对于SLE诊断具有较高的敏感性和特异性。国外学者 [15]发现,AnuA对SLE敏感性和特异性分别为64.2%和98.8%。国内研究[15]亦提出AnuA可出现于SLE疾病进程的各个时期,对SLE诊断的敏感性(69.9%)高,特异性(97.9%)强,可能是SLE诊断的标记性抗体之一。本研究中,AnuA对SLE的敏感性和特异性分别为70%、93%,与以往报道[16]相比,敏感性和特异性接近。与其他自身抗体比较诊断敏感性方面虽不及ANA但高于抗dsDNA、抗Sm抗体,其特异性很好,与抗dsDNA、抗Sm抗体相近且高于ANA。AnuA与抗dsDNA联合时,诊断SLE敏感性为74.17%;AnuA与抗Sm联合时,诊断SLE敏感性为82.50%,较单一抗体诊断,敏感性显著提高,且不降低特异度。故AnuA阳性可作为SLE敏感而特异指标之一,增加AnuA检测作为常规使用在联合诊断SLE中有重要价值。
LN是SLE最主要的的并发症和死亡原因,抗-dsDNA抗体是公认的与肾损害密切相关的自身抗体。近年来有研究显示,将纯化的核小体注入健康小鼠,诱导LN的发生,提示核小体与LN的发生密切相关。在LN的肾小球基底膜的沉积物中发现有核小体和AnuA复合物,这些免疫复合物沉积在肾小球基底膜,固定并活化补体,所释放的趋化因子吸引中性粒细胞,释放炎性介质导致LN的发生[17,18]。本研究结果显示,在50例SLE患者中,AnuA和抗-dsDNA抗体在LN患者组的阳性率显著高于SLE无LN组(P [12] Berden JH,light R,van Bruggen MC,et al.Role of nucleosomes forinduction and glomerulur binding of autoantibodies in lupus nephritis.Curropin Nephrol Hypertens,1999,8(3):299-306.
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