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[摘要] 心肌肌钙蛋白I(cTnI)是心肌肌钙蛋白的一种亚型,正常人血液中含量很低,当心肌细胞损伤时,cTnI在血液中的含量迅速升高。近年来随着cTnI检测方法的不断改进,cTnI已成为最具有价值的心肌损伤标志物之一,被广泛应用于心脏疾病的临床诊断和病情评估。
[关键词] 心肌肌钙蛋白I;医学用途;酶联免疫分析;化学发光免疫分析
[中图分类号] R446.11+2 [文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2010)05(c)-011-02
心肌肌钙蛋白(cTnI)是一种新型的的心肌生化标志物,广泛用于诊断急性心肌缺血,能高特异性、高灵敏度地反映心肌损伤,其特点是在血液中出现时间早、持续时间长。cTnI正逐渐取代传统的检测酶活性的心肌酶学,成为目前评价心肌损伤的标志物及指导治疗和预后判断的指标。
1 医学用途
1.1 急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)的临床诊断、危险性估计和预后判断
ACS是以冠状动脉粥样硬化斑块破裂或糜烂,继发完全或不完全闭塞性血栓形成为病理基础的一组临床综合征,它是包括不稳定型心绞痛,非Q波心肌梗死和Q波心肌梗死的一系列临床病征。目前,公认的早期心肌损伤的生化标志物主要限于肌红蛋白(myoglobin,Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)[1]。肌钙蛋白(Troponin,Tn)是横纹肌收缩的重要调节蛋白,由3个亚基组成:肌钙蛋白C(TnC),肌钙蛋白T(TnT)和肌钙蛋白I(TnI)。 cTnI仅被发现存在于心肌细胞中,含量比CK-MB高13倍。心肌受损发生时,cTnI被释放入血液中,而在慢性肾病、骨骼肌疾病和创伤性疾病发生时很少升高。因此,cTnI的测定对心肌损伤具有高度特异性。有文献报道[2]cTnI在急性心肌梗死(AMI)患者胸痛发作2～6 h即可升高,8～16 h达高峰,明显早于CK-MB,其诊断AMI的敏感度为98.6%,特异度为94.4%,且在血中可持续5～7 d。因此,测定cTnI含量可提高诊断AMI的敏感性,延长诊断窗口时间。
cTnI还可对AMI的危险性估计和预后判断有一定的帮助。有研究证实,cTnI在AMI症状出现后12 h,对危险分层最为适宜[3]。Maisel等[4]将cTnI和2h-Mb作为CK-MB的辅助手段,对505例胸痛患者的AMI作出判断,结果表明cTnI+2h-Mb二者联合与cTnI+2h-Mb+CK-MB三者联合早期诊断AMI,结果同样准确。所以cTnI+2h-Mb检测可节省费用,并且对迟发事件的估计优于CK-MB。同时cTnI+2h-Mb对CK-MB正常者是否有并发症的发生具有预测价值。
1.2 判断心肌缺血、损伤面积
有研究报道,由于cTnI仅存于正常人的心脏中,当不可逆心肌损伤发生4～6 h后血液中的cTnI水平开始升高,约18 h即可达到平均峰值120 ng/ml,而且可以维持这种水平6～8 d[5]。经研究发现,cTnI可以检测到用CK-MB无法检测到的微小的心肌损伤,而且肌肉损伤时也不会影响cTnI 的检测[6]。cTnI(4～6 h)与CK-MB(4～8 h)在AMI后在血中浓度升高的时间相当,但cTnI测定的特异性和灵敏性明显比CK-MB高。cTnI与CK-MB具有基本相同的诊断窗口期(6～8 d),但对急性胸痛患者(无论有无骨骼肌损伤)的诊断,cTnI均优于CK-MB,有研究表明,在对AMI的诊断方面cTnI能检测出CK-MB所不能检测出的心肌损伤。
1.3 心肌炎
虽然血清中的CK-MB的活性在心肌损伤后可升高,其对心肌损伤的诊断也有一定的灵敏度[7-8],但由于其诊断窗口期较短,因此很容易出现漏诊现象。而由于cTnI在心肌受损后有相对较长的升高时间及较高的血清检测值,因此检测cTnI比CK-MB具有更高的敏感性[9]。
2 cTnI检测方法进展
2.1 放射免疫法(RIA)
放射免疫法最早由Cummins于1987年建立[10],采用的是双抗体竞争法,先通过检测放射元素标记的cTnI的放射强度,再通过标准曲线求得cTnI的浓度。该方法使用cTnI的多克隆抗体,最低检测值为10 μg/L,与骨骼肌肌钙蛋白(sTnI)只有2%的交叉反应,并且24～36 h才能看到结果。由于更先进的方法的出现,RIA法已很少用于cTnI的检测。
2.2 酶联免疫吸附试验法(ELISA)
酶联免疫吸附试验法在20年中,由多克隆抗体的竞争抑制法发展为单克隆的双抗体夹心法,大大提高了测定灵敏度,检出低线为0.1~0.2 μg/L[11],操作简便,且仅需30 min,用免疫项目检测常规设备即可。目前酶联免疫吸附试验法已成为检测cTnI较为成熟的方法。
2.3 化学发光法
化学发光法是应用双抗体一步夹心酶免疫分析的方法,利用化学发光剂作为底物,用单克隆抗cTnIIgG抗体包被磁性微粒为固相载体,增加了吸附表面积,因此可在磁场中与液体分离。这个反应体系利用发光剂AMPPD在ALP催化下去磷酸化,生成具有荧光活性的AMPD,再检测其相对光单位数,最后通过多点定标曲线计算cTnI浓度。AMPPD-ALP系统具有反应快速的特点,其最低检出浓度为0.03 μg/L[12],CV [4]Maisel AS, TemplinK, LoveM, et al. Aprospective study of an algorithm using cardiac troponin I and myoglobin as adjuncts in the diagnosis of acute myocardial infarction and intermediate coronary syn-dromes in a veteran s hospital[J]. Clin Cardiol,2000,23(12):915-920.
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(收稿日期:2010-04-23)
