【www.zhangdahai.com--乡镇街道公文】
[摘要] 目的 观察脑出血患者IL-10蛋白的表达情况,探讨IL-10蛋白在脑出血患者中表达特点与脑出血时间的关系和意义。方法 应用免疫组化方法检测65例脑出血患者出血灶周围脑组织IL-10蛋白的表达。结果 65例脑出血灶周边脑组织标本中,IL-10蛋白阳性表达率为89.2%(58/65),10例正常脑组织中IL-10蛋白阳性表达率为20.0%(2/10),两者比较有显著性差异(P24h 88.9%(16/18),出血组之间比较无差异(P>0.05)。结论 IL-10可减轻脑水肿并能减轻血肿周围炎症反应、增加周围神经细胞数,提示IL-10对脑出血有神经保护作用。
[关键词] IL-10蛋白; 脑出血; 免疫组化
[中图分类号] R743.34 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)05-110-02
The Expression of IL-10 in Intracerebral Hemorrhage and Its Significance
YANG Yanli1 WEI Maofu2 LIU Jingwen2
1.Department of Medicine 2.Department of Pathology,Humen Hospital,Dongguan 523900,China
[Abstract] ObjectiveTo investigate the expression of IL-10 in intracerebral hemorrhage(IHC)and find out its significance and its correlationwith the time of intracerebral hemorrhage. MethodsThe expressionof IL-10 were assessed by immunohistochemistry staining. ResultsIn 65 cease of intracerebral hemorrhage positive expression rates of IL-10 was 89.2%(58/65)and 20.0%(2/10)in normal brain tissues. The positive rate was significantly higher in intracerebral hemorrhage than in normal brain tissues(P0.05). ConclusionInterleukin-10 has protective efects on nervous system in intracerebral hemorrhage.
[Key wolds]IL-10; Intracerebral hemorrhage; Immunohistochemistry
白细胞介素-10(IL-10)是由单核巨噬细胞、淋巴细胞等产生的具有广泛生物活性的细胞因子,具有很强的免疫抑制及抗炎作用。近年来,国内外研究发现急性脑出血后血液及脑脊液中白细胞介素-10浓度明显升高[1,2],提示白细胞介素10在急性脑出血的发生、发展中具有一定的作用。我们采用免疫组织化学技术对65例脑出血患者和10例正常脑组织中IL-10表达的情况进行研究,探讨IL-10在脑出血灶周围的表达特点及意义。
1 材料和方法
1.1 标本来源
收集陕西省延安市人民医院和延安大学附属医院2003年1月～2006年12月期间进行手术清除血肿的脑出血患者65例,男28例,女37例,年龄25～83岁,平均48.6岁。手术时机:发病24h内手术者47例,24h后手术者18例,正常脑组织10例取自同期住院进行颅内减压的患者。所有病人入院时均行头颅影像学检查进行证实。
1.2 试剂及免疫组化染色方法
鼠抗人IL-10单克隆抗体、抗体稀释液及试剂盒均购自基因公司。其稀释度为1∶50。所有标本均用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,4μm连续切片,按二步法进行免疫组化染色,染色前标本切片进行抗原修复处理,一抗在室温孵育1h,二抗在室温下孵育0.5h,DAB显色,苏木素复染。用已知阳性的对照片作IL-10抗体的阳性对照,用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。
1.3 判断标准
所有免疫组化片子用奥林帕斯BX50显微镜进行定性和半定量评估。请三个高职称病理医生在不知道临床信息的情况下独立地对所有免疫组化片子进行评估。阳性判断标准为胞质出现了黄色或棕黄色颗粒状,并用阳性片作为对照。每张切片随机选择10个视野,40×10高倍显微镜下观察计数。参照文献[3]方法根据染色的强度及阳性细胞的数量分别计分:A:染色强度:不着色为0分,淡黄色为1分,黄色为2分,棕黄色为3分;B:阳性细胞所占百分率:75%为4分。根据染色强度与阳性细胞数得分之积分为4级,即(-)为0分,弱阳性(+)为1～2分,阳性(++)为3～4分,强阳性(+++ )为5～6分。将A×B作为其染色的计数,只有A×B>3 分才算免疫反应阳性,并按乘积分数将染色结果分为4 个等级:-(0～2 分)、+(3～5 分)、+ +(6～8分)和+ + +(9～12分)。
1.4 统计学方法
统计学处理应用SPSS10.0软件进行χ2检验和Fisher确切概率法,P0.05)。见表1。
3 讨论
白细胞介素-10(IL-10)在1989年由DNAX研究所首次在小鼠的辅助性T2细胞培养中发现,1990年Moore将其命名为白细胞介素-10。白细胞介素-10的生物学活性很广泛,在机体中具有很强的免疫抑制和抗炎症作用,其作用包括抑制辅助性T1细胞类淋巴因子、TNF-α、IL-1β、IL-2和IFN等的合成及其活性,抑制辅助性T0细胞向辅助性Tl细胞转化[4],抑制单核细胞依赖性辅助性Tl细胞增生,抑制单核组织细胞表面MHC-Ⅱ的表达,减低单核组织细胞的抗原提呈能力,阻止抗原特异性的单核巨噬细胞因子的产生,抑制NK细胞的活性,抑制T细胞凋亡和反应性氮氧化物的产生;促使单核组织细胞以外的依赖性T细胞增殖和成熟,激活肥大细胞(mast cell)和其干细胞增殖,激活抗原特异性B细胞增殖,并分化为能产生抗体的浆细胞,以及抑制促炎症细胞因子(IL-1,TNF-α,IL-6)、NO和MHC-II的表达,并抑制炎症细胞因子的迁移[4],从而发挥抗炎作用。有人研究发现从侧脑室或尾静脉注入白细胞介素-10能明显缩小大鼠的脑梗死面积、减轻缺血对大鼠大脑的损伤,对缺血性脑损伤的预后有较好的改善作用[5]。本研究表明IL-10可减轻脑水肿并能减轻血肿周围炎症反应,增加周围神经细胞数,提示IL-10对脑出血有神经保护作用。适当的抗炎介质治疗有助于控制炎症,恢复内环境稳定,如果抗炎介质治疗过量,也可产生免疫功能抑制和感染的易感性,白细胞介素-10水平越高免疫抑制就越严重。
[参考文献]
[1] NicamhllaoibhR,HeenanM,ClearyI,et al. A1tered expression of mRNAs for apoptosis limed ulating proteins in a low level muhidrugr- esistant variant of a human IIlI1g carcinoma cell line that also expresses mdrl mRNA[J]. Int J Cancer,1999,82:368-376.
[2] Zhou YZ,Chen HZ,Yang QY,et al. Study on the establishment and mechanism of cisplatin resitant human ovarian cancer cell subline[J]. National Medical Journal of China,1996,76:680-683.
[3] Liu WH,Kaur M,Wang G,et al. Inverse PCR-based RFLP scanning identifies low-level mutation signatures in colon cell and turmors[J]. Cancer Res 2004,64:2544-2551.
[4] DU C,Fang M,LI Y,et al. Smac,a mitochondral protein that promotes cytochrome C-dependent Caspase activation by eliminating Lap inhibi- tion[J]. Cell,2000,102:33-42.
[5] Grilli M,Barbieri I,Basudev H,et al. Interleukin-10 modulates neuronal thre-Shold of vulnerability to ischemic damage[J]. Eur J Neurosci,2000, 12(7):2265-2272.
(收稿日期:2009-11-23)
