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【摘要】 目的 通过对169例子宫颈癌前病变(CINⅡ~CINⅢ)患者的高危型HPV(人乳头状瘤)感染及临床相关信息的研究分析,探讨子宫颈癌前病变与宫颈高危型HPV感染的关系,为子宫颈癌前病变及宫颈癌的防治提供客观依据。方法 HPV-DNA检测取169例子宫颈癌前病变患者的宫颈刷取物,采用HC-Ⅱ HPV-DNA检测试剂盒,利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号,检测样本中的HPV-DNA含量。结果 169例患者(57例为CINⅡ,112例为CINⅢ)中高危型HPV感染率为93.49%(158/169)。其中57例CINⅡ患者中有48例高危型HPV阳性,感染率为84.21%(48/57);112例CINⅢ患者中有110例高危型HPV阳性,感染率为98.21%(110/112)。结论 子宫颈癌前病变与高危型HPV感染密切相关,这与文献报道的高危型HPV感染是子宫颈癌前病变及宫颈癌的主要致病原因是一致的。
【关键词】
子宫颈癌前病变;高危型HPV;HPV-DNA检测
子宫颈癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤,其发病率在女性恶性肿瘤中居第二位,仅次于乳腺癌。近年来子宫颈癌前病变及子宫颈癌的防治研究取得了突破性进展,确立了高危型HPV感染是子宫颈癌及癌前病变发生的必要条件。HPV病毒分高危型(16、18、45、31、33、58、52等型)和低危型(6、11等型),其感染一般通过性生活传播,通常没有临床症状,大部分妇女HPV感染后,一般在8~10个月左右自行消失,有大约5%~10%的妇女不能自动清除,呈现持续感染状态,这些持续感染HPV的妇女,有更高的风险发生子宫颈癌前病变,如果不经治疗癌前病变可在3~15年左右时间进展为子宫颈癌。因此在HPV持续感染期间,可以检查出子宫颈的癌前病变,早期检测癌前病变是预防子宫颈癌的有效防治策略。
1 资料与方法
1.1 一般资料 169例标本均来自2007年9月至2009年6月我院妇科门诊就诊,宫颈脱落细胞学阳性并自愿接受做HPV-DNA检测的患者。年龄19~65岁,有性生活史,知情同意,无子宫切除使。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 HPV标本收集方法采用美国Digene公司开发研制的第二代杂交捕获实验(HC-Ⅱ)系统专用宫颈脱落细胞取样器,将取样器在宫颈外口移行带附近转3周,缓慢取出取样器,并将其置于标有受检者编号的缓冲液中保存,4℃冷藏待检。
1.2.2 HPV-DNA检测方法[1] 采用HC-Ⅱ对宫颈脱落细胞行HPV-DNA半定量检测。该方法可一次性检测出13种已确认的致癌基因型高危HPV-DNA,是唯一被美国FDA批准认可的HPV-DNA检测技术。该方法利用免疫学技术并通过化学发光使基因信号放大的微孔板对标本中的病毒进行微量检测。其具体步骤如下:样品DNA在变性液的作用下,被裂解为单链核苷酸,裂解后的单链DNA与RNA探针结合为RNA-DNA杂交体,特异性的抗体将RNA-DNA杂交体固定在微孔壁上,结合有碱性磷酸酶的多个第二抗体与RNA-DNA杂交体结合,使信号放大,碱性磷酸酶使底物发光,根据光的强度可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNA-DNA杂交体的含量。
1.2.3 判断及评估标准[1],以每份样本的检测值相对发光单位(RLU)与专用试剂合中HPV-DNA阳性对照临界值(CO)的比值(RLU-CO)表示宫颈组织细胞HPV-DNA的负荷量,如RLU/CO>1.0,则表示每毫升标本中HPV-DNA的含量>1.0 pg,结果为阳性,反之,结果为阴性。
2 结果
169例癌前病变患者中,有158例高危型HPV检测值≥1 �pg/ml�,感染率为93.49%。169例患者中,57例为CINⅡ,112例CINⅢ。57例CINⅡ中有48例高危型HPV检测值≥1 pg/ml,感染率为84.21%(48/57);112例CINⅢ患者中有110例高危型HPV检测值≥1 pg/ml,感染率为98.21%(110/112)。宫颈癌前病变患者人数与高危型HPV感染人数及感染百分率见表1。
3 讨论
通过以上数据可以看出子宫颈癌前病变与高危型HPV感染关系密切。有研究表明高危型HPV感染是子宫颈癌与癌前病变的主要致病因素。本文的数据也证明了这一观点。HPV感染的高峰年龄在25~30岁,其中部分人可逆转,因此在30岁以上的妇女中进行HPV检测对于早期发现由于HPV持续感染导致的宫颈癌前病变及宫颈癌有重要意义。由于HC-Ⅱ对高危型HPV检测的阴性预测值很高,可大大降低由细胞学假阴性而造成的宫颈癌前病变及宫颈癌的漏诊。由于HPV-DNA检测费用昂贵,在我们基层医院,把HPV-DNA检测作为宫颈癌前病变的筛查手段还不现实,现在我们通常把HPV-DNA检测作为对细胞学检查提示不典型鳞状细胞(ASCUS)和低度鳞状上皮内病变(LSIL)的随访分流。因此选择适宜的规范技术进行宫颈癌及癌前病变的筛查是非常重要的。
参 考 文 献
[1] 万建萍,李隆玉,乔志强.HR-HPV在农村宫颈癌前病变高位年龄妇女中的感染状况调查.中国妇幼保健,2008,23(29):4179.
