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摘要： [目的] 通过检测血清血管内皮生长因子（VEGF）、绒毛膜促性腺激素（HCG）在宫内早孕(IUP)、宫内胚胎停育(aIUP)及异位妊娠（EP）中的不同浓度，探讨VEGF在停经早期鉴别EP及aIUP的意义。 [方法] 选择孕40d左右妇女，采用酶联免疫聚合反应（ELISA）检测20例正常IUP妇女(正常对照组)、15例aIUP(即自然流产组)及20例EP妇女血清VEGF和HCG的浓度，并进行对比分析。 [结果] 血清VEGF浓度EP组为（295.6±52.1）pg/ml，明显高于IUP组的（40.4±21.5）pg/ml和aIUP组的（110.3±34.5）pg/ml，差异均有显著性(P0.05）。
[结论] VEGF在EP的高表达将有助于EP的早期诊断，VEGF可用于鉴别早期EP与aIUP，与HCG相比具有优越性。
关键词： 血管内皮生长因子； 异位妊娠； 宫内胚胎停育； 宫内早孕
中图分类号：文献标识码： Ａ
血管内皮生长因子（VEGF）是一种多功能的细胞因子，具有促血管生成的作用，能直接作用于血管内皮细胞，增加血管通透性，刺激血管内皮细胞有丝分裂，进而促进新生血管的形成，在缺氧条件下VEGF生成更多，推测EP患者的VEGF水平明显高于宫内妊娠。研究采用酶联免疫聚合反应（ELISA）检测VEGF浓度，并与绒毛膜促性腺激素（HCG）相比较，探讨VEGF在鉴别早期异位妊娠（EP）及宫内胚胎停育(aIUP)中的意义，有助于EP的早期诊断。
1 资料和方法
1.1 研究对象
采用前瞻性研究方法，选择2003年5月～2006年2月我院门诊及住院病人55例，停经940.5±5.d，年龄（28.6±3.3）岁。20例B超示正常IUP(正常对照组)、其余病例B超未见宫内外妊娠部位，其中15例发展成为aIUP、20例发展为EP。3组年龄、孕周差异无显著性，既往无其他内外科疾病。
1.2 研究方法
收集上述患者全血4ml，经离心机离心后取上清液1ml查HCG，剩余上清液冷藏于-70℃冰箱保存，用于检测血清VEGF含量。
1.2.1 血清VEGF含量的测定 采用ELISA法，VEGF-ELISA试剂盒由中国医学科学院肿瘤研究所提供，试剂盒包括鼠抗人VEGF单克隆抗体（一抗）、兔抗鼠多克隆抗体（二抗）、底物显色液A、B液以及96孔VEGF抗原包被的反应板等。实验操作按试剂盒说明书进行。显色后用酶标仪（波长450nm）比色读取吸光度（A）值。标准曲线的建立及结果判断：以标准品VEGF抗原系列浓度的对数值为Y轴，及其相应的A450值为X轴建立标准曲线。通过各个样品的浓度由标准曲线求出VEGF含量，所有标本均为复管检测。
1.2.2 血清β-HCG含量的检测 取离心后血清1ml，采用Bayer Acs180HCG双抗体夹心光化学测定法测定。
1.3 统计学处理
采用SPSS 10.0统计软件，计数资料采用非参数Kruskal-Wallis检验，P0.05； EP组明显低于IUP组的（14780.6±8777.3）mIu/ml、aIUP组也明显低于IUP组，差异均有显著性，P[１]发现EP患者的VEGF水平明显高于宫内妊娠。 目前认为缺氧影响VEGF的产生和分泌[2]，VEGF由蜕膜和滋养细胞组织产生，免疫组化显示VEGF早期在细胞滋养细胞和合体滋养细胞为强表达，Daniel[3]报道VEGF-mRNA在绒毛滋养细胞上的表达，同蜕膜腺上皮和巨噬细胞上的表达一样，缺氧可上调VEGF-mRNA在胎盘上的表达。[4]现已发现妊娠早期绒毛间氧分压极低，胎盘胎儿处于相对缺氧状态。输卵管妊娠部位由于管壁菲薄、缺乏蜕膜支持而更容易导致胚胎缺氧，而正常种植环境子宫内膜血管丰富，故VEGF水平在EP较IUP时升高。最近，Lam[5]等研究VEGF-mRNA和VEGF受体(KDR and FLT-1)在输卵管EP患者输卵管种植部位和非种植部位表达，发现VEGF-mRNA和VEGF受体(KDR and FLT-1)在种植部位显著高于非种植部位。推测aIUP时VEGF值轻度升高原因，胚胎停育HCG下降，蜕膜血供减少，早期在体内激素的作用下，蜕膜、滋养细胞依然存活，因血供减少，相对缺氧，故产生VEGF较正常妊娠增多。Felemban[6]等发现，VEGF在孕6-9周正常妊娠(27.0±4.4pg/ml)及异位妊娠中(306.0±1126.5pg/ml)水平差异有显著性，以VEGF[7]等研究认为孕龄平均7.15周，VEGF均值在IUP为2.3pg/ml，EP为227.2pg/ml，aIUP为107.2pg/ml，得出EP与aIUP区别的界点为174.5pg/ml。 本研究也得出相似结论。血清浓度VEGF在EP组，明显高于IUP及aIUP，差异均具有显著性；而HCG在EP组与aIUP组相比差异无显著性。
妊娠早期VEGF血清浓度在EP与aIUP显著不同，与HCG相比具有优越性，这将有益于早期准确鉴别EP，血清VEGF水平有望成为输卵管妊娠早期诊断的一项新的辅助指标，本研究结果的临床应用尚需大量前瞻性研究来评价。
4 参考文献
[1]Dekker GA, Sibai BM. Etiology and pathogenesis of preeclampsia: current concepts[J]. Am J Obstet Gynecol. 1998, 179(5):1359-1375.
[2]Khalig A, Dunk C, Jiang J, et al. Hypoxia down-regulates placenta growth factor, whereas fetal growth restriction up-regulates placenta growth factor expression: molecular evidence for “placental hyperoxia" in intrauterine growth restriction[J]. Lab Invest. 1999, 79(2):151-70.
[3]Daniel Y, Geva E, Lerner-Geva L, et al. Levels of vascular endothelial growth factor are elevated in patients with ectopic pregnancy: is this a novel marker?[J]. Fertil Steril. 1999, 72(6):1013-7.
[4]朱亚飞, 吕忠士, 史玉霞. 血清血管内皮生长因子诊断输卵管妊娠的价值[J]. 医师进修杂志. 2003, 26(9):24-26.
[5]Lam PM, Briton-Jones C, Cheung CK, et al. Increased messenger RNA expression of vascular endothelial growth factor and its receptors in the implantation site of the human oviduct with ectopic gestation[J]. Fertil steril. 2004, 82(3):686-90.
[6]Felemban A, Sammour A, Tulandi T. Serum vascular endothelial growth factor as a possible marker for early ectopic pregnancy[J]. Hum Reprod. 2002, 17(2):490�2.
[7]Daponte A, Pournaras S, Zintzaras E, et al. The value of a single combined measurement of VEGF, glycodelin, progesterone, PAPP-A, HPL and LIF for differentiating between ectopic and abnormal intrauterine pregnancy[J]. Hum Reprod. 2005, 20(11):3163-6.
(收稿日期：2006-06-06)
