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[摘要] 目的:探讨入院即刻患者血清中人热休克蛋白60（HSP60）检测在反映急性冠状动脉综合征病情中的作用，并分析其与冠心病其他危险因素之间的关系。方法：89例研究对象分为急性冠状动脉综合征组、稳定性心绞痛组、无冠心病组。所有患者均行冠状动脉造影术明确病变程度；建立调查表收集资料，记录所有患者的一般临床资料；应用ELISA方法测定所有患者入院即刻血清中人HSP60的含量。结果：3组之间血清中人HSP60含量差异具有统计学意义（F7.870，P0.001）。进一步发现，急性冠状动脉综合征组中血清人HSP60的含量较稳定性心绞痛组及无冠心病组均增高（P＜0.05）。与其他反映冠心病病情指标的相关性研究发现，血清人HSP60含量与入院即刻BNP、肌酸激酶同工酶、天冬氨酸转氨酶、乳酸脱氢酶、Gensini积分呈正相关关系（P＜0.05），与左室射血分数呈负相关关系（P＜0.05）。与冠心病其他危险因素关系的研究中发现，正在吸烟患者比从不吸烟者血清中人HSP60含量明显升高，具有统计学差异（P＜0.05）。结论：血清中人HSP60含量可作为反映急性冠状动脉综合征病情的一个重要的生化指标。
［关键词］ 热休克蛋白60； 急性冠状动脉综合征； 冠心病
［中图分类号］ R541.4 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1671-7562（2011）01-0001-05
doi:10.3969/j.issn.1671-7562.2011.01.省略
［通信作者］ 吴小庆 E-mail: wuxiaoqing@medmail.省略
The value of human heat shock protein 60 in acute coronary syndrome
YANG Jun, WU Xiao-qing, BO Xiao-ping, XIE Ping, ZHANG Chang-ying
（Deptartment of Cardiology, Wuxi People"s Hospital Affiliated to Nanjing Medical University, Wuxi 214000, China）
［Abstract］ Objective: To analyze the effect of heat shock protein 60（HSP60） on reaction of the severity of acute coronary syndrome（ACS） at the time of admission, and to investigate the relationship with other risk factors of coronary heart disease（CHD）. Methods: 89 cases of hospitalized patients were collected from Department of Cardiology, Wuxi People"s Hospital Affiliated to Nanjing Medical University from November 2009 to May 2010, who were divided into ACS group,stable angina pectoris（SAP） group and non-CHD group. All patients underwent coronary angiography. Information obtained via questionnaire and all the clinical data of patients was collected. HSP60 levels in human serum was immediately measured using ELASA in all patients at the time of admission. Results: There was a significant difference in serum HSP60 levels in the three groups（F7.870，P0.001）, further analysis showed HSP60 in human serum was（931.32±219.23）pg・ml-1 in ACS group, which was significantly higher than SAP group[（824.74±112.62）pg・ml-1] and non-CHD group[（743.20±146.33）pg・ml-1]（P＜0.05）. Correlations between HSP60 and other index indicating the severity of CHD showed there was a positive correlation between HSP60 and brain natriuretic peptide（BNP）, creatine kinase MB, aspartate aminotransferase, lactate dehydrogenase, Gensini points（P＜0.05）, and a negative correlation with left ventricular ejection fraction（LVEF）（P＜0.05）. And we found that human HSP60 in serum was significantly increased in patients who were current smokers than that in patients who was never（P＜0.05）. Conclusion: Human HSP 60 can be used as a biochemical index in reaction the severity of ACS.
［Key words］ heat shock protein 60； acute coronary syndrome； coronary heart disease
冠心病的发病机制目前仍不清楚，许多研究表明，人热休克蛋白60（heat shock protein 60,HSP60）所介导的炎症和免疫反应在其发生发展过程中起着重要的作用。
目前国内外研究较多的是人HSP60抗体水平升高与冠状动脉血管病变的存在和进程相关，血清中人HSP60抗体含量越高，冠心病血管病变程度越重，为冠心病的独立危险因素［1-2］。但人HSP60抗原与冠心病的相关性研究报道尚少，尤其是入院即刻患者血清人HSP60检测在急性冠状动脉综合征（acute coronary syndrome， ACS）中的价值不是十分清楚。本研究通过测定患者入院即刻血清中的人HSP60含量，探讨人HSP60与ACS的关系，并分析其与冠心病其他危险因素之间的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料
从我院2009年11月到2010年5月心内科住院患者中选择89例研究对象，分为ACS组（50例）、稳定性心绞痛（SAP）组（19例）、无冠心病（non-CHD）组（20例）3组。ACS组包括急性ST段抬高型心肌梗死组（36例）、急性非ST段抬高型心肌梗死组（7例）、不稳定型心绞痛组（7例）3个亚组。所有患者均行冠状动脉造影检查明确病变程度，冠心病患者定义为冠状动脉3支血管至少1支≥50%狭窄，无冠心病患者定义为冠状动脉血管无狭窄或狭窄程度＜50%。89例中男69例，女20例，平均年龄（61.71±10.46）岁。研究对象排除：（1） 有严重或活动性感染性疾病者；（2） 有严重血液性疾病者；（3） 肝肾功能不全者；（4） 行骨髓移植术者；（5） 有风湿瓣膜性心脏病者；（6） 有严重创伤或肿瘤者；（7） 近期使用抗氧化、非甾体类消炎镇痛药等；（8） 有免疫性疾病者。
1.2 资料采集
建立调查表收集资料，记录所有患者的性别、年龄、身高、体重、吸烟史、饮酒史，是否合并糖尿病、高血压病及入院即刻血压、血糖值；入院即刻抽取静脉血检测心肌酶谱、脑钠肽（BNP）、超敏-C反应蛋白（hs-CRP）；次日抽取静脉血检测血脂，心脏超声检查测定左室射血分数（LVEF），由身高和体重计算体重指数［BMI体重（kg）/身高2（m2）］；病情稳定后行冠状动脉造影术明确冠状动脉病变程度。
1.3 冠状动脉造影及Gensini积分
所有患者均应用Jundkin’s法行冠状动脉造影，应用Gensini积分对冠状动脉病变程度进行积分，即冠状动脉狭窄率达到0～25%、26%～50%、51%～75%、76%～90%、91%～99%和100%分别积1、2、4、8、16和32分。根据病变部位乘以相应系数，即左主干、左前降支近段、左前降支中段、左前降支远段、回旋支近段分别×5、2.5、1.5、1、2.5，回旋支远段、右冠状动脉、第1对角支、第2对角支和左室后支均×1，其余×0.5。Gensini积分冠状动脉病变的狭窄程度积分×病变部位系数之和。
1.4 人血清中HSP60含量的检测
入院即刻抽取患者静脉血5 ml,2 h内送我院中心实验室离心，1 000×g 10 min，取上层血清400 μl，去除溶血标本，标记后－70 ℃冰箱内保存。所有标本收集完后取出，采用酶联免疫吸附分析（ELISA）方法检测血清人HSP60含量（试剂盒由美国RD公司提供）。
1.5 统计学处理
数据处理用SPSS 13.0软件包完成，计量数据以均数±标准差表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，计数资料采用卡方检验，两因素间相关性分析采用Pearson检验。P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 各组一般资料比较
见表1。可见各组间性别、年龄、BMI、合并高血压病例数、饮酒程度、血脂水平、入院即刻hs-CRP未见显著统计学差异（P＞0.05）。3组间合并糖尿病例数、吸烟程度、心肌酶谱、入院即刻BNP、LVEF及Gensini积分有显著性差异（P＜0.05）。
表1 各组一般资料比较
注：吸烟程度依次为目前正在吸烟/过去吸烟但目前已戒烟/从不吸烟;饮酒程度依次为目前正在酗酒/过去酗酒但目前已戒酒/从不酗酒
2.2 各组血清人HSP60含量及方差分析结果
血清人HSP60含量检测结果行方差分析显示，3组之间血清人HSP60含量差异具有统计学意义（F7.870，P 0.001），进一步两两分析发现，ACS组血清人HSP60的含量为（931.32±219.23）pg・ml-1，较SAP组［为（824.74±112.62）pg・ml-1］及无冠心病组［为（743.20±146.33）pg・ml-1］均增高（P＜0.05），SAP组血清人HSP60含量与无冠心病组无明显差异（P＞0.05）;ACS组内急性ST段抬高型心肌梗死、急性非ST段抬高型心肌梗死、不稳定性心绞痛3个亚组之间应用方差分析未发现统计学差异（P＞0.05）。
2.3 血清人HSP60与其他反映ACS病情程度指标之间的关系
见表2。可见血清人HSP60含量与入院即刻血糖值、血压值、hsCRP、肌酸激酶无相关关系，与入院即刻BNP、肌酸激酶同工酶、天冬氨酸转氨酶、乳酸脱氢酶、Gensini积分呈正相关关系（P＜0.05），与LVEF呈负相关关系（P＜0.05）。
表2 血清中人HSP60与其他反映冠心病病情指标的相关分析结果
2.4 血清人HSP60与与冠心病其他危险因素的关系
t检验及方差分析结果显示，血清中人HSP60含量在男女性别之间、是否合并糖尿病、是否合并高血压病及饮酒程度之间均未发现显著性差异（P＞0.05）。在吸烟程度中，目前正在吸烟者血清中人HSP60含量为（911.45±218.20）pg・ml-1，明显高于从不吸烟者［为（806.63±149.01）pg・ml-1］，差异具有统计学意义（P＜0.05），而目前正在吸烟患者与过去吸烟目前已戒烟患者之间、过去吸烟目前已戒烟与从不吸烟患者之间血清中人HSP60含量均未见显著性差异（P＞0.05）。相关性分析发现，血清中人HSP60含量与年龄、BMI、及血脂水平均无相关关系（P＞0.05）。
3 讨 论
正常情况下HSP60存在于细胞内，当机体受到各种刺激时，细胞内HSP60产生增多，释放入血循环形成可溶性HSP，这种可溶性的HSP60可以与TLR4/CD14受体结合［3］，通过不同信号转导途径诱导动脉粥样硬化斑块的内皮细胞产生E-选择素、细胞内黏附分子-1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）和白介素-6（IL-6），诱导单核细胞来源的巨噬细胞产生IL-1、IL-6、IL-12、IL-15和肿瘤坏死因子-α（TNF-α），也可诱导平滑肌细胞产生IL-6［4］。 Kol等［5］也证实了人HSP60 可以诱导巨噬细胞表达TNF-α和基质金属蛋白酶-9（MMP-9），而且可以激活血管内皮细胞、平滑肌细胞、单核细胞来源的巨噬细胞产生IL-6，诱导内皮细胞产生E-选择素、ICAM-1、VCAM-1的效果类似于脂多糖。这些产生的炎症因子可造成冠状动脉血管内皮细胞的损伤，促进冠心病动脉粥样硬化的发生发展。
在ACS病人的外周血和动脉粥样硬化斑块中发现有大量的单克隆CD4+CD28null T细胞的增殖［6］。进一步的研究发现，人HSP60作为抗原可以刺激此种细胞的产生［7］。增多的CD4+CD28null T细胞可以表达穿孔素损伤内皮细胞［8］，也可以表达干扰素-γ（IFN-γ）［7］，IFN-γ通过改变脂质代谢和介导巨噬细胞、内皮细胞、平滑肌细胞基因改变促进斑块的进展和不稳定［9］，从而引发急性冠状动脉事件的发生。
本研究结果证实，ACS组血清人HSP60含量明显高于SAP组和无冠心病组，与Hoshida等［10］的研究结果相同。但ACS组内及SAP组与无冠心病组人HSP60无明显差别。Schett等［11］研究显示，大鼠心肌梗死后心肌细胞会释放HSP60入血循环，因此心肌梗死组应高于不稳定性心绞痛组。本组研究未发现此结论，目前国内外亦少见此类大规模研究。
我们发现入院即刻血清人HSP60含量与反映ACS病情程度的其他指标有一定的相关关系。如与反映冠状动脉血管病变程度的Gensini积分呈正相关，相关系数为0.300；与反映心肌坏死的肌酸激酶同工酶、天冬氨酸转氨酶、乳酸脱氢酶指标呈正相关，相关系数分别为0.307、0.284、0.264；与反映心功能的指标如入院即刻BNP呈正相关，相关系数为0.425；与LVEF值呈正相关，相关系数为0.313。因此，本研究证实了在一定程度上血清中人HSP60含量也可作为反映ACS病情程度的一个重要的生化指标。
进一步研究发现，人HSP60与冠心病的其他已确立的影响因素如年龄、性别、血糖、血压、血脂、饮酒、BMI及hsCRP等均无关，但正在吸烟者血清中人HSP60含量明显高于从不吸烟者，提示吸烟可以使冠心病患者血清中人HSP60含量增高，考虑与吸烟的促炎作用有关。但Shamaei-Tousi 等［12］的研究结果却显示，不吸烟患者血清中人HSP60含量明显高于目前正在吸烟的患者，合并糖尿病、高血压的患者血清中人HSP60也较高。研究结果不尽一致。
总之，在ACS患者中，检测血清中人HSP60含量对判断病情程度有重要的参考价值,降低血清中人HSP60含量也成为治疗ACS的一个重要手段［13-15］。但仍有许多问题有待解决，如人HSP60与冠心病的其他危险因素之间的关系各研究结果不一，ACS各种诊疗活动对人HSP60的影响研究较少，人HSP60在ACS病人住院期间的变化及对预后的影响等等。希望能有大规模的基础和临床研究进一步对其两者的关系进行深入的研究，为ACS诊断治疗提供新的依据和手段。
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