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【摘要】 目的:采用正常小鼠和实施慢性轻度应激(CMS)小鼠观察乌灵菌的抗抑郁作用。方法:正常小鼠行为学实验采用悬尾和强迫游泳两种方法。CMS采用9种不同应激源对小鼠实施2周刺激后,参考蔗糖饮水量进行分组并继续应激和给予药物干预共4周,检测蔗糖饮水量和自发运动变化。两组乌灵菌粉口服剂量均为0.25、0.50、1.0g/kg。结果:悬尾实验和强迫游泳实验中,小鼠的不动时间和绝望时间明显延长,经乌灵菌治疗后症状明显改善。CMS小鼠的蔗糖饮水量和自发运动明显减少,治疗后蔗糖饮水量和自发运动明显增加。结论:在行为学实验中可观察到乌灵菌粉有很好的改善抑郁状态的作用。
【关键词】 乌灵菌、慢性轻度应激、抑郁模型、行为学
【中图分类号】 R971+.43【文献标识码】 B【文章编号】 1007-8517(2009)24-0150-01
乌灵菌(炭角菌科真菌黑柄炭角菌,Xylaria nigripes)是生长在土栖白蚁巢中的一种真菌的菌核。主要成分有蛋白质、多糖、无机元素、维生素、腺苷类及铁、锰、锡等微量元素。据四川《中药志》记载,乌灵菌具有利尿,补心神,治失眠、吐血及产后失血等药用价值[1]。为确认乌灵菌的药效,本实验采用正常小鼠及慢性轻度应激(chronic mild stress,CMS)小鼠抑郁模型,观察乌灵菌对其行为的影响。
1 材料与方法
1.1 动物 健康BALB/c雄性小鼠,健康CD1雄性小鼠,8周龄,体重21±2 g,购自中国医学科学院实验动物研究所。室温25±1��(C,明暗各12h,自由摄食。
1.2 悬尾实验[3] 小鼠口服给药1周后,于末次灌胃给药后1h,将尾部用胶布固定在玻璃棒上,悬放入高于水面5cm处,让小鼠适应1min后,开始记录时间,记录小鼠在5min内不动的时间。
1.3 小鼠强迫游泳实验[3]小鼠口服给药1周后,于实验前16h禁食不禁水,于末次灌胃给药后1h进行实验。有机玻璃缸高30cm,直径18cm。水深10cm,水温23±2℃。小鼠放入水中游泳6min,使用秒表,记录最后4min内累计不动的时间。
1.4 慢性轻度应激模型制备及分组 健康BALB/c雄性小鼠熟悉环境3天后,分为对照组和慢性轻度应激组,其中应激组单独饲养,并实施慢性应激实验,采用以下应激源处理:1次16h饮水剥夺、2次5min游泳(30℃)、2次彻夜光照、1次悬尾30min、45度斜笼2次(1次7h,1次17h)、 1次17h空笼无垫料、1次17h湿笼(100ml)、2次14h食物剥夺、2次合笼(1次17h,1次2h)。上述应激源随机组合,每天实施两种[2]。2周后,对所有应激组小鼠先行2 %蔗糖饮水实验。然后根据动物单位体重蔗糖溶液饮用量,平均将应激组动物分为:慢性轻度应激(CMS)组(灌胃1%羧甲基纤维素溶媒)、乌灵菌高、中、低三个剂量治疗组(0.25、0.50、1.00 mg /kg)。继续慢性应激并给予药物干预共4周,最后进行行为学评价,包括蔗糖饮水实验、自发运动实验。
1.5 蔗糖饮水实验 先行禁食禁水3 h,饮水瓶内加入2 %蔗糖溶液,称取瓶重并记录。1 h后撤掉饮水瓶再次称重。前后差值为小鼠蔗糖溶液饮用量,并用动物体重加以校正。
1.6 自发运动实验 实验于每天13:00～18:00安静环境下进行。将直径90 cm的圆桶置于安静环境中,将小鼠置于同一出发点,观察记录5min内小鼠的自发运动情况。圆桶上方通过数码摄像头与计算机连接并使计算机成功追踪小鼠的活动轨迹,记录小鼠走动的路程及活动范围。实验过程中及时清理桶底动物粪便,减少气味等影响因素。
1.7 实验材料 乌灵菌粉(浙江佐力药业有限公司提供)。
1.8 统计学处理 数据用均数±标准误(mean± SE)表示,采用SPSS 11.0统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA),以P
