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准确的血型鉴定是临床安全、有效输血的重要基础保证，是使交叉配血实验顺利进行的前提，随着《临床输血技术规范》的实施，标准血型鉴定操作越来越为大家重视，不再以简单的红细胞肉眼玻片法抗原鉴定来确定被检者血型，而是以正定型和反定型双相结果来综合判断。使输血安全向前迈进了一步。但也会经常遇到一些正反定型不符的病例，经过一些特殊实验，如抗人球蛋白实验、吸收放散实验血型物质的测定，基因分型等方法，最终确定了血型，现将各种疑难病例分为7类，总结报告如下：
1对象与方法
1.1检测对象
自2001年5月～2008年5月来我站自愿无偿献血者8000名中，共检出血型正反不符者82例。
1.2试剂、仪器
仪器：日本以保田普通离心机，达亚美卡式离心机、温浴箱；试剂：抗人球蛋白试剂（上海市血液中心），标准谱细胞（上海市血液中心），凝聚胺法试剂（珠海贝索），Coombs卡（达亚美）。标准血清抗A抗B抗A1血清、A1、A2红细胞（长春博德生物制品公司），抗D（上海血液生物医药有限公司）
1.3实验方法
正反定型及抗体筛查鉴定方法均按照《临床输血与输血技术学实验指导》；抗人球蛋白实验方法按照《临床输血与输血技术学实验指导》；血清浓缩法：即在观察完原来实验结果的基础上再次离心，弃掉上清液，再次加入血清（试剂或标本）离心后再观察结果，还可以反复进行以上操作；吸收放散实验：按照《临床输血与输血技术学实验指导》；亚型血型鉴定实验：方法同血型鉴定，试剂为抗A1血清、A1、A2红细胞；唾液血型物质测定：包括被检者唾液的留取，抗血清标化和血型物质测定均按照《临床输血与输血技术学实验指导》。
2结果
将正反定型不符结果分类如表
3讨论
血型不符的输血一旦发生，会导致严重的并发症[1]，Linden等[2]报道在美国每年因溶血反应死亡的病例中，约10例是输血失误引起的。SaZamn[3]报道，在输血相关死亡病例报告中，51%是由于输入了ABO不相溶的血液制品导致急性溶血反应致死的。因此，正确的血型鉴定，尤其是ABO血型是正确配血，安全输血的基础。
若血型鉴定准确无误，大部分配血是安全顺利的。过去，由于条件和观念所限，许多地方医院仅凭简单的玻片法的的红细胞抗原测定（正定型）就确定患者血型，进而给患者输注同型血液，使输血中的人为错误率很高。2001年后卫生部《临床输血技术规范》实施后，人们安全输血的意识不断提高，血型鉴定技术也规范为正反定型技术，有些医院还在正定型中添加被检者RBC与抗A+B(O型血清)的反应结果的观察，以对与抗A抗B反应进行质量控制，在反定型中添加被检者血清与O型红细胞的反定结果，以排除ABO以外的抗体影响定型实验结果，从多方面控制实验结果的准确性。在我们日常工作中遇到的各种情况的处理中发现，添加这些检查很有必要。 反定型时增加O管检查是检出ABO以外抗体的有效方法之一，因为正常情况下O型红细胞上不存在ABO抗原的，若O管发生凝集，很可能存在ABO以外抗体。提示我们进行抗体筛查和鉴定来进一步确定抗体的性质。在我们实验中40例O管凝集标本中，通过抗体筛查抗体鉴定，发现28例为非特异性抗体（大多为RBC直接Coombs试验阴性的病人和冷凝集病人），12例为特异性抗体，包括抗M、抗E、抗D等盐水抗体，因此O管反定型十分必要。
通常情况下，红细胞上的抗原是不变的，而且用来检测抗原的标准血清效价较高。因此正定型的错误率很低。反定型则是检测被检者的血清中抗体，由于人血清中抗体强弱差异较大，尤其是老人小孩或免疫功能低下者及大量输液病人，血清中抗体较弱使得反定型检出率降低。在这种情况下，通常用血清浓缩的方法来使实验更加清晰，即通过增加血清抗体的浓度和比例，使抗原完全结合，使弱凝集转强供肉眼观察，我们用这种方法对29例弱抗体患者进行实验，效果很明显，只有3例患者反复浓缩无效，后用家系调查确证了血型，此类病人体内确无抗体，属免疫缺陷病。
在正反定型不符问题的解决中，家系调查也是可以帮助我们确定疑难血型的有效方法之一，在一些疾病如癌症肿瘤或亚型血型中，抗原减弱或消失时有发生，往往会影响被检血型的准确判断。我们有5例血液病及肿瘤患者，红细胞上抗原已经完全消失用浓缩法无法确定，3例血清抗体缺失病人，将其父母、兄弟、配偶及子女的血型鉴定出来和被检者的实验结果综合起来加以分析判断,也可以得出正确的血型，此外，基因分型也是取得正确血型的方法之一。
在血型鉴定中尤其是亚型的鉴定时，唾液的血型物质鉴定和血液的吸收放散实验也是一种必不可少的检测手段，因为红细胞抗原还少量存在于唾液等体液中，检测到唾液中的血型抗原，亦可以帮助确定血型。因为微量抗原可以通过吸收放散实验才能检出，血液中抗原减弱无法检出时，可以借助吸收放散实验来检测以帮助抗原确定。3例亚型和2例肿瘤病人的血型用此方法得以确定。只是此方法操作有些繁琐，需要较长时间，不适合急诊情况下的处理。此外，人源性血清在弱抗原检出方面优势相当明显，因为多个人份新鲜抗血清混合应用效价很高，确实可以使不易观察的弱凝集变得清晰可见。
另外，我们在工作中发现：在ABO血型一时还不能确定的情况下，病人急需输血，输注O型洗涤红细胞确实为一种可行有效的方法，因为有些血型鉴定需要花费很多时间进行很多实验来综合分析判定结果，为了不因此而延误病情，先给病人输注O型洗涤红细胞应急，待血型确定后再输入同型血液是较好的解决方法。
参考文献
[1]魏小斌，输血人为误差和输血安全，中国输血杂志2005.6.18（3）.
[2]LindenJV,TouraultMA,ScribnerCL.(letter)Decreaseinfre-quencyoftransfusionfatalities.Transfusion,1997,37(2):243.
[3]SazamaK. Report sof355 transfusion-associated deaths:1976 through 1985.Transfusion,1990,30(7).
