[当归补血汤对化疗小鼠红细胞黏附功能及IL-2免疫调节作用的影响]小鼠骨髓细胞

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  【摘要】 目的 探讨当归补血汤对化疗小鼠红细胞免疫黏附功能及脾细胞IL-2产生的影响。方法 以红细胞C3b受体花环、免疫复合物花环及脾细胞IL-2的产生为检测指标,观察当归补血汤对化疗小鼠红细胞免疫黏附功能的作用。结果 当归补血汤可明显提高受化疗药物作用小鼠红细胞C3b受体花环率,并可促进小鼠IL-2的产生。特别是在小鼠接受化疗前预防性接受当归补血汤治疗,其疗效更加显著。红细胞C3b 受体花环和免疫复合物花环百分率明显高于对照组(P<0.05)。结论 当归补血汤对机体血液免疫系统有调节作用,可减轻化疗药物对小鼠红细胞免疫黏附功能的损伤。
  【关键词】 当归补血汤;红细胞黏附;IL-2
  
  当归补血汤主要由当归、黄芪组成,是中医常用的补血方剂,具有补气升血、填精益髓之功效。有资料表明[1],当归补血汤对辐射所致血虚模型动物的红系、粒系造血祖细胞(CFU-E/CFU-GM)增殖能力的降低有明显的恢复作用。因此,当归补血汤补气升血作用在临床上具有减轻放化疗所致肿瘤患者造血功能低下的应用前景。本文以红细胞C3b受体花环和免疫复合物花环形成能力为检测指标,观察此药对化疗小鼠红细胞免疫黏附功能及脾细胞IL-2产生的影响,探讨当归补血汤对机体血液免疫系统的调节作用。现将结果报告如下。
  
  1 材料与方法
  
  1.1 实验动物 C57BL/6小鼠,雌雄兼用,6~8周龄,体质量(20±2)g。购自吉林大学实验动物部(动物合格证号:10-1032)。
  1.2 受试药 按常规方法煎制,弃渣、浓缩,2 500 r/min离心10 min,除沉淀,置4℃冰箱备用。含生药量为2 g/ml。
  1.3 主要试剂和仪器 RPMI1640培养基和FCS为美国GIBCO公司产品;丝裂霉素C(MMC)为日本Koygo公司产品;ConA和MTT(四甲基偶氮唑盐)为美国Sigma公司产品;CO2孵箱为日本RIKA-Koygo公司产品;补体致敏酵母及致敏酵母多糖由长春中医学院新药中心惠赠。
  1.4 实验分组 将动物按体质量随机分为正常对照组,常规饲养;化疗药物组,按3.0 mg/kg腹腔注射(ip)MMC;中药治疗组,按上述剂量ip给药MMC后第2 d开始灌胃给药(ig)当归补血汤,每10 g体质量0.2 ml,连续10 d;预防治疗组,腹腔注射MMC前6 d开始预防性灌胃给药当归补血汤至化疗后10 d,剂量同上组。
  1.5 检测指标 小鼠红细胞C3b受体花环和免疫复合物花环检测按文献[2]方法进行。眶静脉取血,肝素抗凝。在高倍镜下以1个红细胞上结有3个以上酵母菌为1个花环,计数200个红细胞,结果以百分率表示;IL-2检测见文献[3]。
  1.6 IL-2反应细胞制备 取细胞浓度为5×106/ml正常小鼠脾淋巴细胞,按10 mg/ml加入ConA,在5%CO2、37℃条件下培养48 h,用含20 mg/ml a-甲基甘露糖RPMI1640液洗3次,调细胞浓度为5×105/ml,接种至40孔培养板中,每孔100 ml,双复孔,CO2孵箱培养48 h,MTT比色分析法测定。
  
  2 结果
  
  2.1 当归补血汤对小鼠红细胞C3b受体花环及免疫复合物花环形成能力的影响 见表1。
  
  由表1可见,小鼠受化疗药物作用后,红细胞C3b受体花环和免疫复合物花环百分率均下降明显,而中药治疗组RBC-C3bR有很大恢复,与化疗药物组比较,差异有统计学意义(P<0.05);预防治疗组疗效更加明显,与中药治疗组比较,上述两项指标均有明显改善(P<0.05)。
  
  2.2 当归补血汤对小鼠脾细胞IL-2生成的影响 结果见表2。由表2可见,中药治疗组和预防治疗组对小鼠脾细胞IL-2的产生均有明显的促进作用,与化疗药物组比较,差异有统计学意义(P<0.001);但预防治疗组和中药治疗组比较,两者差异无统计学意义(P>0.05)。
  
  3 讨论
  
  红细胞膜上C3b是红细胞黏附作用的关键部位。因85%以上的C3b受体(C3bR)存在于红细胞膜上,每个红细胞膜上约有500个C3bR,在血液免疫中起重要作用。黏附免疫复合物送至肝脾内清除而红细胞本身不受损伤,可重返循环体系中发挥免疫复合物功能。因此,保护和增强红细胞的黏附功能,对促进血液免疫功能具有重要意义。本研究表明当归补血汤可保护受MMC作用小鼠红细胞的黏附功能,特别是在化疗前给予预防性治疗,可提高RBC-C3bR和RBC-ICR花环百分率。当归补血汤除具有补气生血作用外,还具有增强红细胞免疫功能的作用,从而发挥清除循环体系中免疫复合物和外源病原的作用,以达到维持机体免疫力平衡之功效。
  本研究发现,当归补血汤可明显提高小鼠脾细胞IL-2的产生,这对发挥细胞毒细胞的免疫监视和肿瘤免疫监视作用有着实际意义。
  
  参考文献
  1 陈奇.中药药理研究方法学.人民卫生出版社,1993:1012.
  2 郭峰.红细胞免疫及其调节功能测定方法.免疫学杂志,1990,6(1):60-66.
  3 杨贵贞.免疫生物工程纲要与技术.吉林科学技术出版社,1991:44.

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