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【摘要】目的:研究非小细胞肺癌（NSCLC）中磷酸化糖原合成酶激酶-3β（PGSK-3β）、T细胞因子（TCF-4）的表达，探讨它们与肺癌的临床病理因素及预后的关系及两指标之间的相关性。方法：运用免疫组织化学方法（SP法），检测150例非小细胞肺癌PGSK- 3β、TCF-4的表达。结果：1. PGSK-3β、TCF-4在不同分化程度的肺癌中表达有差异（P均0.05）2.肺癌中PGSK-3β、TCF-4的表达水平之间存在正相（r=0.255,P=0.002）3. 随访到的PGSK-3β、TCF-4中位生存时间分别为44个月和46个月，两指标阴性表达组与阳性表达组间的差异有显著统计学意义（P均0.05).2. Positive correlation was found between PGSK-3β and TCF-4 in NSCLC（r=0.255,P=0.002）3. The median survival time of PGSK-3β and TCF-4 were 44 and 46 months respectively.Significant difference were found between the positive and negative expression of PGSK-3β and TCF-4 (P>0.05). Conclusion: 1. PGSK-3β and TCF-4 were positive regulator in the formation of NSCLC, stimulating it�s evolution, and correlated with it�s differentiation .⒉PGSK-3β and TCF-4 were all promote the growth of lung cancer through Wnt signal system. We belive they may play an important action in the generation and development of lung cancer. 3.The positive correlation was found between PGSK-3β、TCF-4 in NSCLC.
【Key words】non-small cell lung cancer, PGSK-3β, TCF-4, prognosis
非小细胞型肺癌(NSCLC) 是最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率近年来呈明显上升趋势,在多数发达国家居恶性肿瘤首位, 在我国多数大城市肺癌发病率和死亡率也居恶性肿瘤的第一位或第二位。近年来研究证实Wnt信号通路是调控细胞增殖和癌变的关键途径，与肿瘤的发生发展及肿瘤的分化程度密切相关［1-2］。PGSK-3β和TCF-4在致癌WNT通路中均具有重要意义。
1、材料与方法
1.1 标本来源: 150例肺癌标本来自盐城市第一人民医院2003年6月-2006年6月手术切除标本，所有病例术前均未放、化疗、免疫治疗，术后均经病理确诊。腺癌89例，鳞癌61例，中-低分化癌118例, 高分化癌32例。
1.2 主要试剂:羊抗人PGSK-3β（Ser9）多克隆抗体原液（sc-11757）购自美国Santa Cruz生物有限公司, 鼠抗人TCF-4单克隆抗体和SABC免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司，鼠抗羊IgG购自上海基因有限公司，抗原修复液为柠檬酸钠缓冲液，抗体稀释液购自DaKo公司。
1.3实验方法 :免疫组化染色SP法按说明书操作步骤进行，使用PBS代替一抗处理的切片作为阴性对照，已知阳性组织切片作为阳性对照。
1．4 随访及资料整理: 随访方式选择电话随访。随访原则如下：手术之日为随访开始之日，截止日期为2007年8月。生存时间按月计算，随访期内死亡者随访时间记为完全数据，随访期内未死亡者随访时间记为截尾时间。
1.5 结果判断 :PGSK-3β和TCF-4的阳性信号为肿瘤细胞的细胞浆或细胞核出现棕黄色染色。在400倍显微镜下随机计数5个视野，阳性细胞数≥5个，即为PGSK-3β、TCF-4染色阳性。阳性程度分级 ：50%为强阳性(+++)。
1.6 统计学分析: 统计学分析应用spss11.5英文版统计分析软件采用χ2检验和Spearman等级相关分析，随访资料用单因素生存分析Log-rank检验，应用Kaplan-Meier绘制生存曲线。取p 表2 TCF-4表达与肺癌临床病理因素的关系
两指标表达差异均存在显著统计学意义。
2.3 肺癌PGSK-3β与TCF-4表达的关系（见表3）
表3 肺癌PGSK-3β与TCF-4表达的相关性
r=0.255,P=0.002
由表3可见肺癌中PGSK-3β与TCF-4表达呈显著正相关。
2.4 PGSK-3β、TCF表达与预后的关系:随访150例肺癌患者，随访到118例，本组随访率为78.67%。随访到的118例患者PGSK-3β中位生存时间为44个月，经Log-rank检验发现其阴性表达组与阳性表达组间的生存时间差异有显著统计学意义（χ2=6.010, P=0.014），见图1。TCF-4中位生存时间为46个月，经Log-rank检验发现其阴性表达组与阳性表达组间的生存时间差异有显著统计学意义（χ2=5.915, P=0.015），见图2。
图1. 肺癌PGSK-3β表达的Kaplan-Meier生存率曲线比较
图2. 肺癌TCF-4表达的Kaplan-Meier生存率曲线比较
3 讨论
肿瘤细胞中存在异常的Wnt信号通路。β-catenin是正性调节因素，APC蛋白、GSK-3β、Axin是负性调节因素，GSK-3β是决定β-catenin磷酸化的关键激酶［3］。对GSK-3β的抑制能使β-catenin不被磷酸化而降解，从而发生β-catenin的核聚集，激活因子，促进细胞增殖［4］。磷酸化的GSK-3β（PGSK-3β）可抑制GSK-3β的活性，抑制Wnt信号通路调节蛋白降解，抑制凋亡发生，促进肿瘤细胞的发生、发展、侵袭与转移［5］。在垂直获得性儿童HIV-1患者中研究发现过度活化的GSK-3可引起产前及出生后的病理性神经元迁移及神经元凋亡，而通过磷酸化失活GSK-3可抑制该作用［6］。本实验中NSCLC中PGSK-3β的总阳性表达率90.00%（135/150），未发现两者存在统计学意义（P0.05）。本研究还发现TCF-4在中低分化癌中表达的阳性率明显高于高分化癌（P
