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【摘要】 目的 制定复方头痛灵颗粒的质量标准。方法 采用薄层色谱法(TLC)进行定性鉴别，高效液相色谱法(HPLC)测定天麻素的含量。色谱条件：Hyperisil ODS(5 μm,200 mm×4．6 mm)，流动相为甲醇：0．1%磷酸(12�∶�88)，流速1 ml/min，检测波长222 nm，柱温:30℃。结果 TLC色谱中斑点清晰，易于识别；HPLC法精密度、重现性良好。天麻素在0．08~0．44 μg范围内具有良好的线性关系，平均回收率为95%(RSD=2．00%)。结论 本法可有效控制复方头痛灵颗粒的质量。�
【关键词】复方头痛灵颗粒；薄层色谱法；高效液相色谱法；质量标准
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Compound Toutongling granules of quality standards
REN Wei-qiong,CHEN Ying-chun,LIAO Jian-ping.
The First AffiliatedHospital,Hunan University of TCM,Hunan 41007,China
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【Abstract】 Objective To establish the method for quality standard of compound Toutonglinggranules.Methods TLC and HPLC method were used to identify the Chinese herbal medicines.The determination was carried on HPLC,using hyperisilODS column(5 μm,200 mm×4．6 mm),ethanol-0．1%phosphoric acid solution(12�∶�88)as mobile phase,detected at the wavelength of 222 nm and the column temperature of 30℃.Results The TLC sports developed were fairly and simply identical.HPLC was accurate and reproducible.A good linearity was obtained in the range of 0．08~0．44 μg，and the average recovery was 95% with RSD=2．00%.Conclusion The methods can be used to control the quality of compound TouTongLlingGranules effectively.
�【Key words】Compound Toutongling granules;TLC;Quality standand
复方头痛灵颗粒主要由川芎、天麻等8味中药组成，具有祛风止痛，活血化瘀等功效，临床主要用于气滞血虚型偏头痛，且具有明显疗效。为了有效控制该制剂的质量，笔者对处方中川芎、白芷、赤芍3味药材进行定性鉴别，采用HPLC法测定天麻素的含量，结果方法简便、准确，适用于该制剂的质量控制。�
1 仪器与试药�
Agilent 1100 高效液相色谱仪；二极管阵列检测器(DAD)；MA110型电子天平(上海天平仪器厂)；超声波提取器(北京医用设备厂)；K-82A型真空干燥箱(上海实验仪器总厂)。药材购自湖南省药材公司；天麻素购自中国药品生物制品检定所(供含量测定用)；川芎嗪对照品、欧前胡素对照品、异欧前胡素对照品、芍药苷对照品均购自中国药品生物制品检定所；硅胶G(自制)，甲醇(湖南大学化学试剂厂，色谱纯)，其余均为分析纯。�
2 薄层色谱的鉴别�
2．1 川芎的薄层鉴别 取成品颗粒5 g磨成粉末，用20 ml水溶解，氯仿萃取2次，每次15 ml，合并氯仿，挥干，加乙酸乙酯1 ml使残渣溶解，作为供试品溶液；取不含川芎的空白样品5 g，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液；另精密称取川芎嗪0．5 mg，溶于5 ml的甲醇中，制成0．1 mg/ml的对照品溶液。照2005版《中国药典》一部薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述3种溶液各5 μl，分别点于同一CMC-Na为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正已烷-乙酸乙酯(9�∶�1)为展开剂，展开10 cm，取出晾干，置紫外灯(365 nm)下检视，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色斑点，而阴性对照品在此位置则无荧光斑点。�
2．2 白芷的薄层鉴别 取成品颗粒5 g，用20 ml乙醚溶解，超声15 min，过滤，取续滤液挥干乙醚，残渣加乙酸乙酯1 ml溶解，作供试液。取不含白芷的空白样品5 g，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。精密称取欧前胡素和异欧前胡素，加乙醇制成浓度都为0．5 mg/ml对照品溶液。照2005版《中国药典》一部薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述3种溶液各5 μl，分别点于同一CMC-Na为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(30℃~60℃)-乙醚(3�∶�2)为展开剂，展开10 cm，取出，晾干，置紫外灯下(365 nm)检视。供试品色谱中，在对照品色谱相应的位置上，显相同的斑点。�
2．3 赤芍的薄层鉴别[1] 取成品颗粒3 g，加乙醇20 ml，振摇5 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2 ml使溶解，作为供试品溶液。取不含赤芍的空白样品3 g，按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。精密称取芍药苷，加乙醇制成浓度为0．5 mg/ml的对照品溶液。照2005版《中国药典》一部薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取上述3种溶液各5 μl，分别点于同一CMC-Na为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(5�∶�1)为展开剂，展开10 cm，取出，晾干，喷5%香草醛浓硫酸溶液显色，日光下检视，在供试品色谱中，在对照品色谱相应的位置上，显相同紫红色斑点，而阴性对照品未见干扰。�
3 含量测定�
3．1 供试品、阴性对照与对照品溶液的制备 取本品适量，研细，取细粉2．0 g，精密称定，置磨口锥形瓶中，加入甲醇25 ml，超声处理(200 W，40 KHz)30 min，滤过，取续滤液作为供试品溶液。取缺天麻阴性样品颗粒2．0 g，同法制备阴性对照品溶液。精密称取1．1 mg天麻素对照品置25 ml量瓶中,加甲醇溶解,并稀释至刻度,摇匀，即得0．044 mg/ml的对照品溶液。�
3．2 色谱条件 色谱柱：HypersilODS(5 μm,200 mm×4．6 mm)，流动相：甲醇：0．1%磷酸(12∶88)，流速1 ml/min，检测波长222 nm，柱温30℃。�
3．3 线性关系的考察 精密吸取浓度为0．044 mg/ml的天麻素对照品溶液2、4、6、8、10 μl进样，测定其峰面积积分值，以浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为：Y=95 549．65×-1278．7(r=0．999 9)。表明，天麻素在0．08~0．44 μg范围内具有良好的线性关系。�
3．4 干扰试验 照上述色谱条件，分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照液各5 μl,注入色谱仪。供试品色谱中，在与对照品色谱图相应的位置上有一相同的色谱峰，而阴性对照液未见干扰，见图1。�
3．5 精密度、稳定性和重复性试验 精密吸取同一对照品溶液5 μl，重复进样5次，测定其峰面积积分值，结果RSD=1．49%，表明精密度较好。分别精密吸取同一样品供试溶液5 μl，于0、1、2、4、8、24 h进样，测定其天麻素峰面积积分值，RSD=0．77%，表明供试品溶液在24 h内峰面积积分值基本稳定。取同一批号样品(20070901)约2．0 g，共5份，制的供试品溶液，按上述条件测定含量，结果RSD为2．46%，表明测定方法的重复性较好。�
3．6 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品(批号：20070901，含量为0．19 mg/g)约2．32 g，分别精密加入天麻素对照品溶液(0．044 mg/ml)10 ml(即0．44 mg)，于水浴上挥干溶剂，然后按上述方法制备供试品溶液，并测定含量，计算回收率。结果见表1。�
3．7 样品测定 取3个批号的样品，测定天麻素的含量，结果见表2。�
4 讨论�
4．1 经多次试验建立了川芎、白芷、赤芍等3味药材的TLC鉴别方法。表明，供试品色谱中，在对照药材色谱相应的位置上，均显相同颜色的斑点，而阴性对照品在此位置则无干扰，且重现性良好。�
4．2 川芎为方中君药，其有效成分川芎嗪能改善微循环，改变血液流变性，防止血栓形成[2]。但因川芎嗪含量极低，且川芎药材中川芎嗪含量相差甚远。以它为评价指标，不能作为保证成品质量的含测对象。因此选用臣药天麻的有效成份天麻素作为本制剂的含测对象。�
参考文献
［1］ 刘陶世,等.甘芍注射液的质量标准研究.中成药，2000，22(3)：196.�
［2］ 张梅.川芎嗪对脑缺血后调相关基因表态影响的实验研究.中成药，2003，25(2)：164-165.�
