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彭艳伶，陈世云，伍天碧，周可磊，李昊
（1.四川省西昌市动物疫病预防控制中心，四川 西昌 615050；
2.四川省凉山州动物疫病预防控制中心，四川 西昌 615050；
3.西昌学院，四川 西昌 615050）
圆环病毒是一类无囊膜单链环状DNA病毒，属于圆环病毒科，包括圆圈病毒属、圆环病毒属。鸭圆环病毒（DuCV）目前被列为圆环病毒属的暂定种，DuCV 无囊膜，呈二十面体对称，直径为14～17 nm，基因组大小为2 kb。
感染DuCV 的病鸭在临床上表现为发育迟缓、体重减轻及羽毛杂乱等。从病理学分析，感染DuCV鸭的免疫组织受损，导致淋巴细胞萎缩、凋亡甚至坏死等，从而让鸭免疫力降低，对其他疾病易感，容易发生继发感染和多重感染，DuCV与鸭大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌（RA）、鸭病毒性肝炎Ⅰ型病毒（DHV）等混感率较高。
病鸭为樱桃谷肉鸭，其羽毛凌乱，羽轴出血，生长迟缓，站立不稳，行走时双脚向外叉开，呈八字脚。个别鸭瘫痪，脚皮干燥、无光泽，蹼有出血斑，流泪，眼周围有泪圈，脸部一侧有囊肿，排绿色、褐色稀便。
剖检20 羽病鸭，见心包积液，心脏有针点状出血，个别的心尖弥漫性出血；
胸腺萎缩，有出血点；
喉头变形；
肝脏肿大，边缘钝圆，有的肝变性、坏死，与气囊粘连，表面有淡黄色纤维素性渗出物；
脾脏肿大或萎缩；
胰腺有出血点；
气囊内有白色或黄色纤维素性渗出物；
脸部囊肿内容物为黄色干酪样物质。
无菌采集病鸭胸腺、肝脏、脾脏、心脏、肺脏等组织。采集的样本分为两份，一份进行细菌分离，冷藏保存，一份进行鸭病原分子检测，冷冻保存。
3.1 病料总核酸提取 取0.5 g胸腺、肝脏、脾脏、心脏、肺脏等组织置于2 mL EP 管中，加入灭菌PBS，于匀浆器进行研磨，反复冻融3 次，离心取上清，用总核酸提取试剂盒进行核酸提取。
使用实验室建立的RT-qPCR 方法对坦布苏病毒（DTMUV）、C型鸭肝炎病毒（DHCV）、A型鸭肝炎病毒（DHAV）、血清4 型禽腺病毒（FAdV-4）、禽肉瘤病毒（ASV）、新型鹅细小病毒（NGPV）、鸭圆环病毒（DuCV），番鸭细小病毒（MPDV）8 种病原进行检测，所有检测反应体系为：2×One Step SYBR Green Mix 10 μL、One Step SYBR Green Enzyme Mix 1 μL、上下游引物各1μL、模板2μL，ddH2O补足至20 μL，反应程序为：逆转录50 ℃3 min，预变性95 ℃30 s，循环反应95 ℃15 s，55 ℃20 s（循环数为40），溶解段：95 ℃15 s，60 ℃1 min，95 ℃15 s（循环数为1）。
引物序列见表1，RT-qPCR结果见图1。
表1 常见病原检测引物信息
图1 RT-qPCR结果
3.2 细菌分离鉴定 无菌取鸭肝脏等病料分别接种于麦康凯琼脂平板和血琼脂平板，于37 ℃恒温培养24～48 h，结果未见菌落生长。
在20份样本中，有4份样本为DuCV阳性，其他病原DTMUV、DHCV、DHAV、FAdV-4、ASV、NGPV和MPDV均为阴性。
根据鸭场情况制定有效防控方法，降低鸭的死亡率，控制继发感染。
4.1 加强消毒和饲养管理 对饲养环境、鸭群、器具、饮水、饲料等进行严格消毒，使用0.3%的过氧乙酸带鸭消毒，饮水用2%～5%的含氯量25%以上漂白粉消毒，消毒液现配现用。加强进出场人员的隔离和管理。
加强饲养管理，改善养殖环境，增加饲料营养，提高病鸭抵抗力。
病鸭、疑似感染鸭隔离饲养，病死鸭进行无害化处理。
4.2 治疗
紧急利用抗病毒类中草药板蓝根10 g、黄芪10 g、金银花10 g、连翘10 g、党参5 g、苍术5 g、当归5 g、白术3 g、陈皮3 g进行治疗。
鸭圆环病毒可造成免疫抑制，导致其感染其他病原而死亡。
临床上防控鸭圆环病毒传播和流行应加强早期诊断，发现疑似病例要及时隔离及治疗。避免该病造成损失，应做好平时防控和消毒。
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