【www.zhangdahai.com--叙职履职报告】
【摘要】目的研制的水蛭注射液并进行安全性检查。方法用家兔进行热源实验；用豚鼠进行过敏性实验；用小鼠进行异常毒性实验：观察红细胞混悬液进行溶血与凝血试验。结果本注射液符合药典安全性检查要求。结论本方法生产的水蛭注射液有一定的应用价值。
【关键词】水蛭注射液：安全性检查：热源；过敏性实验；异常毒性；溶血与凝血试验
【中图分类号】R392．8；R285．1
【文献标识码】A
【文章编号】 1673-7555[2007]02--48-02
水蛭始载于《神农本草经》，具有破血、通经、消淤之功效。古人多以全虫入药。现代研究表明，水蛭含有蛋白质、水蛭素等成分。水蛭素是其中最重要的物质，它是迄今为止世界上最强的凝血酶抑制剂。目前临床多用煎剂、胶囊剂、片剂、丸剂、口服液等，很少见注射液，我们尝试制备出注射液，并进行安全性检查，本品符合药典安全性检查要求，有一定应用价值。
1实验材料
1．1仪器分析天平日本岛津AXl20；酸度计德国塞多利斯PB-20；涡旋混合器天津药典标准仪器厂ZH-2；水浴涡北京长安科学仪器厂HH．W21-Cr：冷冻离心机德国eppendoff 5804；智能热源仪天津大学无线电厂ZRY-2A。
1．2实验动物健康小鼠，体重17～20克；健康家兔，体重1．7～3．0kg；健康豚鼠体重250～350g。
1．3药材与试剂水蛭药材牡丹江大药房。
2实验
2．1水蛭注射液的制备取干燥的水蛭药材用锉刀锉成粉末，称取水蛭粗粉5克在室温下，用0．9％生理盐水50ml浸泡24小时，匀浆，冷冻24小时后缓冻，再冷冻24小时后缓冻，如此共三次后，离心(3000r／mill)10分钟，收集上清液，取水蛭有效成分的提取液用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调PH值至中性，过滤，100℃30min灭菌，分装。工艺流程如下：水蛭(洗净)→水蛭粗粉→0．9％生理盐水浸泡24小时匀浆→冻24小时(三冻三缓)→离心取上清液→调PH值至中性→过滤→灭菌→分装。
2．2安全性检查
2．2．1热源试验按药典中热源检查法规定进行：取适用家兔3只，测定其正常体温后15分钟以内，自耳静脉缓缓注入lml／kg并温热至约38℃的供试品溶液，然后每隔30分钟用测量其体温1次，共测6次。结果见表1。
2．2．2异常毒性按药品检验标准操作规范[4]，取上述小鼠5只，将供试品溶液0．5ml注入小鼠尾静脉，在4～5秒中注射完毕。
2．2．3过敏性试验取豚鼠6只，隔日腹腔注射本品溶液0．5ml，连续3次，然后分成两组，每组3只，分别在第一次注射后第14日及21日静脉注射本品1．0ml。静脉注射后15分钟内均不得出现过敏反应。
2．2．4溶血与凝血试验取6支试管，分别加入2％红细胞混悬液2．5ml、生理盐水2．0、2．1、2．2、2．3、2．4、2．5ml和本品0．5、0．4、0．3、0．2、0．1、0ml，混匀后，于37℃恒温箱中。开始每隔15分钟观察一次，1小时后，每隔1小时观察一次，供3次。
3结果与讨论
3．1热源结果显示最高升温0．4℃，每只均小于0．6℃，三只兔升温总和1．0℃小于1．4℃。符合药典对注射液热源的要求。3．2按2．2．2异常毒性检查方法，5只小鼠尾静脉给药后，全部小鼠在给药后48小时内没有死亡。符合药典对注射液异常毒性的要求。
3．3按2．2．3过敏性检查方法，6只豚鼠静脉注射后15分钟内均没有过敏反应，没有竖毛、呼吸困难、喷嚏、干呕或咳嗽者，也没有锣音、抽搐、虚脱或死亡现象。
3．4按2．2．4溶血试验方法，水蛭注射液五个剂量试管中红细胞全部下沉，上层液体无色澄明；生理盐水对照管红细胞全部下沉，上层液体无色澄明。说明本注射液无溶血现象。
3．5以上结果显示本方法所制得的注射液安全性检查符合药典要求。有一定的应用价值。
