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【摘要】 目的 探讨P53与错配修复基因（hMLH1）在子宫内膜癌的表达情况与其临床病理学特征以及分期之间的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测42例子宫内膜癌P53与hMLH1蛋白的表达情况。结果 42例子宫内膜癌P53蛋白阳性表达率为(18/42)42．85%。病理分级1级中占(4/15)26．67%。Ⅱ~Ⅲ级中占(14/27)51．85%，比较两者有显著差异。hMLH1蛋白表达率为(7/42)16．67%，病理分级1级中占(5/15)33．33%，Ⅱ~Ⅲ级中占(2/27)7．40%，比较两者有显著差异。淋巴结阳性12例的子宫内膜癌中P53表达率(9/12)75%.hMLH1表达率为(2/12)16．67%。结论 P53与子宫内膜癌的分化程度、淋巴转移有关，hMLH1与子宫内膜癌的分化程度有关、与淋巴转移无关，两者均有利于判断其预后。
【关键词】 子宫内膜癌；免疫组织化学；p53;hMLH1；基因表达
子宫内膜癌是妇科生殖道三大恶性肿瘤之一。近20年来发病率呈上升趋势，但有关子宫内膜癌发生的分子机制仍不明确。研究显示肿瘤的发生不但与细胞增殖、分化异常有关，而且与细胞错配修复功能、抑癌基因P53等有关。本文就子宫内膜癌中错配修复基因(hMLH1)和突变型p53基因表达进行研究，采用免疫组织化学方法检测hMLH1蛋白、p53蛋白，探讨子宫内膜癌发生发展机制和hMLH1、p53蛋白成为子宫内膜癌判断预后的可行性。
1 资料与方法
1．1 一般资料 选取保定市妇幼保健院和保定市第一医院2006年9月至2007年9月收治子宫内膜腺癌按WHO组织分化标准患者病理分级Ⅰ级15例、Ⅱ~Ⅲ级27例，患者年龄29~68岁，平均54岁，术前均未经放疗或化疗，术后病理证实有淋巴结转移者12例。选取的标本经福尔马林固定石蜡包埋，切片厚度4 mm。
1．2 主要试剂与方法 P53单克隆抗体购自福建迈新生物技术有限公司。HMLH单克隆抗体购自美国Santa.Cruz生物制剂公司，SP免疫组化试剂盒购自福洲迈新生物技术开发公司，采用免疫组织化学方法进行染色。一抗浓度均稀释为1∶200，以磷酸盐缓冲液（PBS）液代替一抗作阴性对照，正常胃黏膜细胞核棕黄色染色为阳性对照。结果判定：P53蛋白阳性产物定位于细胞核内或细胞浆。hMLH1定位于细胞核。每例切片随机选择10个，高倍视野每个视野计数100个肿瘤细胞。总计1000个肿瘤细胞，根据细胞阳性的比例进行判断：>30%的肿瘤细胞染色与正常细胞相同时为正常表达；10%~30%的肿瘤细胞与正常细胞相同时为减弱表达；10%的肿瘤细胞与正常细胞相同或完全缺失为阳性。切片中阳性细胞数20%为阳性。
1．3 统计学方法 应用Spss11．5P2检验或四表格确切概率法。
2 结果
如表1,在42例子宫内膜癌标本中P53阳性表达率42．85%。在有淋巴结转移的子宫内膜标本中阳性率为75%, 与无淋巴结转移者阳性率30%两者间相比有显著差异。hMLH1蛋白表达率16．67%，有淋巴结转移的为16．67%，无淋巴结转移的为16．67．%，两者相比无显著性差异。
hMLH1蛋白阳性表达在病理分级1级33．33%，Ⅱ~Ⅲ级7．40%。两者相比差异有统计学意义，高级别者阳性表达明显减低。
3 讨论
P53基因蛋白是研究最为广泛的肿瘤抑制基因之一，突变的P53基因不仅丧失抑制肿瘤活性反而具有促进恶性转化的活性。突变的P53蛋白用免疫组织化学方法可以检测出来，因此可以将检测率看做突变率[1]。P53基因被认为是恶性肿瘤发生与发展的主要原因。有研究表明P53基因发生于子宫内膜癌晚期。本实验研究P53蛋白阳性表达率在病理分级1级、Ⅱ~Ⅲ级中两者相比差异有统计学意义，病理分级越高P53表达越高。
错配修复基因是1993年以来陆续发现的一组基因，主要包括hMSH2、hMLH1、hPMS1和hPMS2，其表达产物执行错配修复功能。错配修复(mismatch ripair，MMR)是细胞复制后的一种修复机制，具有维持DNA复制保真度、控制基因变异的作用，对于维持细胞的遗传稳定起重要作用。错配修复基因是一类肿瘤相关基因，人类DNA错配修复系统有系统基因组成，其中有6种错配修复基因与人类肿瘤发生有关，错配修复基因具有修复DNA碱基错配，增强DNA复制忠实性，维持基因组稳定性降低自发性突变的功能。为保证DNA复制的忠实性，维持基因组的稳定性，降低细胞的自发突变，需要对错配的碱基进行修复，即错配修复(MMR)。发挥这种作用的基因即MMR基因[2]。
hMLH1基因突变导致细胞错配修复功能缺陷，使发生在某些癌基因和抑癌基因中的修复功能缺陷。同时会发生细胞的增殖失控，导致其增殖失控，恶性肿瘤转化发生[3]。hMLH1是子宫内膜癌保护性基因，在子宫内膜癌变过程中逐渐减少，可能与早期子宫内膜癌变的启动有关[4]。本实验hMLH1基因阳性表达在病理分级1级、Ⅱ~Ⅲ级中两者相比差异有统计学意义，前者明显高于后者；Duggan等发现DNA MMR基因的突变发生在子宫内膜癌的早期[5]，本研究中hMLH1在淋巴结阳性与阴性的标本中表达相同，也可能与样本量少有关，有待大样本研究。目前认为DNA MMR基因的突变失活导致基因的损伤不能修复，包括癌基因、抑癌基因的改变，从而增加癌发生的可能性[6]。子宫内膜癌中错配修复基因hMLH1与突变的抑癌基因（P53）呈负相关。即突变的P53越多，错配修复基因hMLH1越少，其功能的共同缺失成为子宫内膜癌预后不良的标志。P53，hMLH1可作为子宫内膜癌的标志物有助于子宫内膜癌判断预后。
参考文献
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6 马琳，张军航，彭芝兰，等.错配修复基因蛋白在人卵巢恶性肿瘤组织中的表达及其临床意义.中华妇产科杂志，2000，35(5)：291．293.
