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【摘要】 目的 采用高效液相色谱法测定祛风通痹胶囊中士的宁的含量。方法 选用C18色谱柱；流动相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-三乙胺(47.5∶47.5∶5∶0.4)；检测波长：280 nm。结果 本方法的回收率为97.76%，RSD=1.75%(n=6)。结论 HPLC法准确，重现性好，可用于祛风通痹胶囊的质量标准。
【关键词】HPLC法；士的宁；祛风通痹胶囊
Determination of strychnine in qufentongbi capsules by HPLC
WANG Zhi-wei,JI Ling,SONG Yue.Heilongjiang Jiamusi Institute for Drug Contrl，Heilongjiang 154007，China
【Abstract】 Objective A HPLC method was developed for the contents determination of strychnine in qufentongbi capsules.Methods The C18 column was used with a mobile phase wasn-hexane-dichloromethane-methanol-Triethylamine(47.5∶47.5∶5∶0.4).The detection wavelength was 280 nm.Results The average recovery was 97.76%，RSD=1.75%(n=6).Conclusion The method was accurate and reliable.It can be used for the quality control of qufengtongbi capsules.
【Key words】HPLC; Strychnine ;Qufengtongbi Capsules
祛风通痹胶囊是由三七、延胡索(制)、马钱子(制)等十二味中药组成的传统医院制剂，具有除湿通络，活血化瘀的功效。用于痹症，肩周炎，肌肉关节疼痛，屈伸不利，以及风湿性关节炎、类风湿性关节炎见以上证候者。其中马钱子(制)中的士的宁既是治疗风湿痹症的活性成分，又是毒性成分，笔者根据中国药典［1］中马钱子的用量，对方中马钱子的用量进行折算，采用HPLC法对方中的士的宁进行了含量测定。方法简便、准确、重复性好，适用于该制剂的质量控制。
1 仪器与试药
Agilent1100自动进样高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)士的宁(中国药品生物制品检定所 批号0705-200004 含量测定用)。样品(医院提供 批号：080711、080712、080713)。所用试剂甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件［2］ 色谱柱：AgilentC18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-三乙胺(47.5∶47.5∶5∶0.4)；检测波长：280 nm； 流速：1.0 ml/min,柱温：30℃，进样量：5 μl。上述色谱条件下，理论板数按士的宁峰计不低于2000。见图1。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取士的宁对照品10.25 mg，置100 ml量瓶中，加醋酸乙酯溶解并稀释至刻度，制成每1 ml含0.102 5 mg的溶液，作为对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备［2］ 取本品20粒内容物，精密称定，混匀，研细，取6 g，精密称定，置250 ml圆底烧瓶中，加浓氨试液4 ml及氯仿25 ml，加热回流50 min，放冷，滤过，残渣加氯仿洗涤4次，每次5 ml，并入滤液，置分液漏斗中，用硫酸溶液(3→100)振摇提取5次，每次15 ml，合并酸液，用浓氨试液调节pH值至9~10，用氯仿振摇提取5次，每次20 ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加醋酸乙酯适量使溶解，转移至5 ml量瓶中，加醋酸乙酯至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.4 线性关系考察 分别精密量取上述对照品溶液0.5、1、2、4、8 μl照“2.1”色谱条件分别进样，记录色谱图，以进样量为横坐标(μg)，色谱峰面积A为纵坐标绘制标准曲线。计算士的宁的回归方程为A=1 525.930 2X+25.312 8，r=0.998 3结果表明，士的宁在51.25~820.0 μg范围内线性关系良好。
2.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液各5 μl，重复进样5次，测定峰面积，结果士的宁峰面积的RSD为0.5%。
2.6 重复性试验 取样品(批号080711)，平行称取5份，按“2.3”方法制备，进样，测定，计算。结果平均含量为0.045 mg/粒，RSD为2.1%。
2.7 稳定性试验 精密吸取供试品溶液(批号080711)各5 μl，在0、2、4、6、8 h进样，测定峰面积，结果士的宁峰面积的RSD为1.5%，表明士的宁在8 h内稳定。
2.8 加样回收率试验 取已测定含量的样品(批号080711，含量为0.045 mg/粒，平均装量为0.432 g/粒)样品6份，各精密称定3 g，置250 ml圆底烧瓶中，分别加入上述对照品溶液2.4、3.0、3.6 ml，按2.3方法制备，进样，测定，结果见表1。
2.9 样品测定 分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各5 μl，注入色谱仪，按“2.1”色谱条件测定峰面积，以外标法计算士的宁含量，分别为0.045 mg/粒(批号080711)、0.055 mg/粒(批号080712)、0.050 mg/粒(批号080713)。
3 讨论
3.1 检测波长的选择 笔者通过紫外光谱扫描，表明样品和士的宁对照品的图谱基本一致，且在280 nm处有最大吸收。
3.2 流动相的选择 笔者参考文献使用乙腈-1%的冰醋酸(10∶90)为流动相，但此流动相不能较好地将对照品峰与杂质峰分离。而本试验确定的流动相却能达到满意的结果。
参考文献
［1］ 国家药典委员会.中国药典(一部)．化学工业出版社，2005：34.
［2］ 国家药品监督管理局编，国家中成药标准汇编.中成药地方标准上升国家标准部分经络肢体脑系分册，2002：338-339.
