【www.zhangdahai.com--读后感】
【摘要】目的：对解毒抗白颗粒的鉴别与检查方法进行研究。方法：采用TLC法对解毒抗白颗粒中白花蛇舌草、夏枯草、半枝莲、浙贝母、龙葵和黄芪等药材进行了鉴别试验，并进行了制剂通则检查。结果：薄层色谱鉴别的药材在相应的位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰；制剂检查结果符合要求。结论：所建立的鉴别方法简便、灵敏、重复性较好，为该制剂的质量控制提供了实验依据。
【关键词】 解毒抗白颗粒；薄层色谱鉴别；制剂通则检查
解毒抗白颗粒由壮医药临床经验方研制而成，具有清热解毒、化瘀散结、益气生血的功能。用于治疗急性白血病、慢性白血病各期，单用或配伍化疗药物。该制剂主要由白花蛇舌草、半枝莲、夏枯草、莪术、甘草等中药和壮药组成。白花蛇舌草清热解毒，
主要成分为齐墩果酸[1]；半枝莲具有清热解毒、化瘀利尿[2] 的功效 ，其主要成分为野黄芩苷；夏枯草清火、散结、消肿，主要成分为熊果酸[2]。本文对该制剂中白花蛇舌草、夏枯草、半枝莲、浙贝母、龙葵和黄芪等药材进行了薄层色谱鉴别研究，并作了制剂通则检查，为该制剂的质量控制提供了实验依据，可保证该制剂的质量可控。
1仪器与试药
1.1仪器939型薄层自动铺板器（重庆南岸贝尔德仪器），Linomat5半自动点样仪。
1.2试药齐墩果酸对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、三七皂苷R1对照品、贝母素甲对照品、贝母素乙对照品、野黄芩苷对照品、黄芪甲苷对照品、白花蛇舌草对照药材、夏枯草对照药材、浙贝母对照药材、半枝莲对照药材、三七对照药材、红参对照药材和黄芪对照药材（均由中国药品生物制品检定所提供）。龙葵对照药材由南宁元桂中药饮片有限责任公司提供并经鉴定。硅胶G（60型，青岛海洋化工集团公司），实验所用试剂均为分析纯。
1.3实验样品解毒抗白颗粒由我院中药制剂工程中心制备提供。
2薄层色谱鉴别
2.1白花蛇舌草和夏枯草的鉴别
取本品约1g，研细，加乙醇20mL回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚（60℃-90℃）浸泡2次，每次15mL，2min后倾去石油醚液，残渣加乙醇1mL溶解作为供试品溶液。另取齐墩果酸对照品适量，加乙醇制成每1mL含1mg 的溶液作为对照品溶液。再取白花蛇舌草和夏枯草对照药材各0.5g，按供试品溶液制法制得对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述吸取上述五种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10:2.5:4:0.25)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液。105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.2三七和红参的鉴别
取本品约2g，研细，加乙醚20mL加热回流30min，放冷，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干后加甲醇20mL回流30min, 放冷至室温，滤过，滤液蒸干，残渣加水10mL溶解，用水饱和正丁醇提取 3 次（15 mL，10 mL，5 mL），合并正丁醇液, 用氨试液洗涤4次（20 mL，20 mL，15 mL，10 mL），再用正丁醇饱和水洗涤2次（15 mL，10mL），弃去洗涤液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1、Rb1、Re，三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1mL含人参皂苷Rg1 0.70mg，人参皂苷Rb1 0.50mg，人参皂苷Re 0.70mg，三七皂苷R1 0.50mg的混合溶液作为对照品溶液。再取三七和红参对照药材各1g，同法制得对照药材溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.3半枝莲的鉴别
取本品约2g，研细，加乙醚30mL加热回流30min，弃去乙醚液，残渣加甲醇30mL使溶解，加热回流30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为供试品溶液。另取野黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液作为对照品溶液。再取半枝莲对照药材1g，同法制得对照药材溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.4浙贝母的鉴别
取本品约10g，研细，加甲醇30mL，加热回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加0.1mol/L 盐酸20mL溶解，滤过，滤液加浓氨试液调pH值至9～10，用氯仿提取两次（30mL,30mL），合并氯仿液，蒸干，残渣加氯仿0.5mL溶解作为供试品溶液。另取贝母素甲、贝母素乙对照品适量，加甲醇制成浓度为每1mL各含2mg的混合溶液作为对照品溶液。再取浙贝母对照药材1g，同法制得对照药材溶液。按处方比例取缺浙贝母以外的药材，按制法项下规定制成缺浙贝母的阴性样品，按供试品溶液制法制成缺浙贝母阴性对照溶液。吸取上述四种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨水（17:2:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的橙红色斑点，阴性对照无干扰。
2.5龙葵的鉴别
取本品约5g，研细，加水30mL煮沸1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加70%乙醇20mL溶解，在5-10℃下放置2h，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL 使溶解，用氯仿振摇萃取3次（15mL，15 mL，15 mL），合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为供试品溶液。另取龙葵对照药材1g，同法制得对照药材溶液。按处方比例取缺龙葵以外的药材，按制法项下的规定制成缺龙葵的阴性样品，按供试品溶液制法制成缺龙葵阴性对照溶液。吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-氯仿-正己烷-氨水（13:2:0.6:0.25）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.6黄芪的鉴别
取本品约3g，研细，加甲醇20mL回流1h，滤过，滤液过中性氧化铝柱（氧化铝7g），用40%甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30mL溶解，用水饱和正丁醇萃取2次，每次20mL，合并正丁醇液，再用水洗涤2次，每次20mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成浓度为每1mL含1mg的溶液作为对照品溶液。再取黄芪照药材3g，同法制得对照药材溶液。按处方比例取缺黄芪以外的药材，按制法项下规定制成缺黄芪的阴性样品，按供试品溶液制法制成缺黄芪阴性对照溶液。吸取上述四种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，置以氯仿-甲醇-水(12:9:4)为展开剂的展开缸中饱和15min，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
3制剂通则检查
3.1性状
本品为颗粒剂，棕黄色颗粒，味苦。
3.2粒度检查
按照《中国药典》2005年版一部附录IC颗粒剂粒度检查项下粒度测定法（附录Ⅺ B第二法，双筛分法）测定。取供试品30g，称定重量，置规定的药筛中，保持水平状态过筛，左右往返，边筛动边轻扣3分钟，取不能通过一号筛和能通过五号筛的总和，不得过15％。共检查三批样品，粒度测定结果分别为：9.15%，9.95%，7.80%。
3.3水分检查
按照《中国药典》2005年版一部附录IC颗粒剂粒度检查项下水分测定法（附录Ⅸ H第一法，烘干法）测定。取本品2g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，在干燥箱中经105℃干燥至恒重，除另有规定外，不得过6.0％。共检查三批样品，水分测定结果分别为：3.03%，3.13%，3.36%。
按照《中国药典》2005年版一部附录IC颗粒剂粒度检查项下溶化性测定法测定。取供试品1袋，加热水200mL，搅拌5分钟，立即观察，应全部溶化或呈混悬状且不得有焦屑等。共检查三批样品，溶化性测定结果显示三批样品全部深化，符合规定。
3.5装量差异检查
按照《中国药典》2005年版一部附录IC颗粒剂粒度检查项下装量差异测定法测定。取供试品10袋，分别称定每袋内容物的重量，每袋装量与标示装量相比较，按附表中的规定，超出装量差异限度的不得多于 2袋，并不得有1袋超出限度1倍。共检查三批样品，结果符合中国药典2005年版一部附录颗粒剂粒度检查项下要求。
3.6微生物限度检查
按照《中国药典》2005年版一部附录ⅩⅢ C微生物限度检查法，对三批样品进行细菌、霉菌及大肠杆菌检查，微生物限度检查结果显示三批样品的细菌数＜10个/g，霉菌＜10个/g，大肠杆菌未检查出。
4讨论
4.1白花蛇舌草主要有效成分为齐墩果酸，而夏枯草主要有效成分亦为熊果酸。但齐墩果酸和熊果酸是同分异构体，TLC很难分离，因此采用白花蛇舌草、夏枯草对照药材和齐墩果酸对照品进行薄层鉴别。白花蛇舌草和夏枯草双阴性对照对鉴别结果没有干扰，方法专属性较好。
4.2三七和红参主要活性成分均为达玛烷型皂苷类成分，且其中很多成分相同，三七的特有成分三七皂苷R1与人参皂苷Re 结构极相似，斑点常重叠在一起，难以分离。所以采用缺三七和红参的双阴性对照，阴性对照对鉴别结果没有干扰，方法专属性较好。
4.3龙葵的主要成分为龙葵碱，因对照品无法买到，因此采用龙葵对照药材作为薄层鉴别对照，阴性对照对鉴别结果没有干扰，方法专属性较好。
参考文献
[1]许凤鸣, 王兆全, 李有文. 半枝莲化学成分的研究[J]. 中国现代应用药学, 1997, 14(6): 8.
[2]杨顺利. 正交实验优选半枝莲超临界CO2萃取条件研究[J]. 解放军药学学报, 2004, 20(1): 46.
