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在病理制片过程中,外检凝血块、尸检中的血栓及血肿标本不少见。尤其肺动脉栓塞标本,取材时血栓与动脉易分离破碎。这类组织切片有难度,因组织脆、硬、切片易碎、容易脱片、染色不佳。将血栓类组织切片进行探讨,方法如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本组收集2000年1月至2009年9月,外院送检医疗纠纷尸检96例,其中血栓栓塞、外伤出血、血肿形成死亡病例33例。尸检标本均用10%福尔马林液固定,1周后取材,脱水、切片至染色。
1.2 试剂 乙醇、无水乙醇加丙酮的混合液[1]。
1.3 方法 取保留血栓、血肿类标本66块分两组实验。a.用乙醇、丙酮等量混合后脱水;b.纯丙酮液脱水;时间:12、24 h分别进行,按常规透明、浸蜡、包埋、切片,厚度4~5μm,HE染色,中性树胶封固。
2 结果
回顾性观察血栓、血肿、凝血块组织病理切片、染色的现状。切片不全、刀痕、皱褶、染色掉片,常反复取材、染色差等因素。针对切片、染色差因素,经分析认为脱水剂、脱水方法是主要因素造成切片差主要因素。回顾与实验结果,见表1。
3 讨论
送检医疗纠纷尸检96例中,非手术死亡为63例,占65.6%。因手术、意外伤等导致动脉血栓栓塞、失血、凝血、形成血肿等33例,占尸检病例的34.4%。在外检中血块及凝血组织也不见,如输卵管妊娠破裂病例。活检切片对凝血组织没有特别研究,因尸检组织标本量较大,切片脆、硬、易碎,容易脱片多,因而进行研究探讨。从表1中看出33例均为出血、血肿、血栓栓塞标本,视病变浸及范围决定取材,肺动脉血栓最大直径2.8 cm、长6~8 cm;大血肿体积30 cm×25 cm×6 cm,将脏器包裹。此类标本取材后与其他脏器一起脱水、透明、切片和染色,结果血栓类切片不理想,反复切片染色。
在病理标本制作技术书中阐述:丙酮脱水力强,能使组织明显收缩,不单独使用,可与酒精混合使用。并提示:如单独使用丙酮脱水,不可超过1 h[1]。可直接用丙酮脱水,因丙酮比乙醇浸透组织速度快,组织不易变硬,脱水时间不宜过长,视组织块大小约1~2 h[2]。本组将2 cm×1.5 cm×0.3 cm大的血栓凝血组织块放到丙酮液里24 h脱水观察,将另份血块组织放到酒精丙酮混合液中12 h脱水观察。两组切片、染色观察没有异常改变。切片无皱褶、染色不掉片,成功率为93.9%,只有两张切片边缘有点脱落稍差,占6.1%,由此证明:酒精与丙酮混合后效果比予想的要好。
传统方法低浓度到高浓度一直延用。没有去探讨、实验研究,没有最佳的方法。教材及文献中提到丙酮脱水时间限于1~2 h。因此,在日常工作中一般不会去改变。本组取血栓标本实验两液按等量配备,加在前两缸低浓度酒精里。按常脱水时间进行,自然将混合液由低浓度带到高浓度,脱水剂起到互补的作用。经过切片染色证明:能连续切片、切片不破碎、厚薄适宜、染色不掉片、组织结构清晰、层次分明,解决了多年来大血栓、血肿切片掉片的困扰。
参 考 文 献
[1] 李敏,秦军,孙丽娟,等.血块组织制片方法的改进.诊断病理学杂志,2001,8:53.
[2] 于洪藻,李成库.病理标本制作技术.白求恩医科大学基础医学部,1980,7:58.
