卵巢癌转移途径 [PKC-NF-κB信号传导途径在卵巢癌发生中的作用]

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  摘要目的:探讨PKC-NF-κB信号传导途径调控卵巢癌细胞生长的机制,为通过阻断PKC-NF-κB信号传导通路抑制卵巢癌细胞生长,诱导肿瘤细胞凋亡,治疗卵巢恶性肿瘤提供新思路。实验材料与方法:采用免疫组织化学S-P法,对正常卵巢组织10例,卵巢上皮性良性肿瘤10例及卵巢上皮性癌49例组织中的PKCα,NF-κB进行检测。对检测结果进行统计分析。实验结果1.PKCα在卵巢上皮性良性肿瘤及卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率分别为20.00%和59.18%,两者间的差异具有统计学意义(p   1.2方法
  免疫组化染色:小鼠抗人PKCα单克隆抗体及NF - KF/ P65 单克隆浓缩型抗体均购置美国Santa Cruz 公司(由北京中山生物技术公司进口分装) 。S - P 免疫组化试剂盒购于北京中山生物技术公司, S - P免疫组化染色按试剂盒说明书操作, PKCα工作浓度为1 :200;NF - KB/ P65 工作浓度为1 :150。所有切片均采用微波修复抗原,一抗室温孵育60分钟,DAB显色, 苏木素复染。用已知乳腺癌PKCα、NFKB/ P65 阳性片作对照, PBS 代替-抗作阴性对照。
  1.3结果判断
  判断标准以肿瘤细胞胞质或胞核出现棕黄色颗粒为阳性判定标准:其中PKCa以胞膜或胞浆着色判断为阳性细胞;因为活化的P65蛋白只有进入细胞核才能发挥转录调控作用,故阳性细胞计数以核染成棕黄色为主。按染色强弱及阳性细胞数两个方面来计算评分:随机选择5个高倍视野,计数500个以上肿瘤细胞。计算阳性细胞率。根据阳性细胞数及细胞染色强度进行半定量:无阳性细胞,计0分;阳性细胞数1% ~30% ,计1分,31% ~70% 计2分,71% ~100%计3分。再根据阳性着色强度依次计0,1,2,3分(不着色为0分,浅棕色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分),每张切片的两项分数累计,0分为阴性,1~2分为弱阳性(+),3~4分为阳性(++),5~6分为强阳性(+++),本实验结果中阳性指从弱阳性到强阳性(+~+++)。
  1.4统计学处理
  采用SPSS13.0 for window软件包进行。计数资料采用x2检验, PKCα与NF-κB的相关性用spearman等级相关分析,p   Dejardin E[6]等研究报道:NF-κB 因子的持续活化可作为包括乳腺肿瘤、卵巢肿瘤、结肠肿瘤、胰腺癌、甲状腺肿瘤、胆道肿瘤和前列腺肿瘤以及黑色素瘤等各种实体肿瘤的标志。原发前列腺肿瘤组织和前列腺肿瘤细胞株的研究提示NF-κB 组成性活化对细胞抵抗凋亡是必需的[7]。
  本研究显示:卵巢癌组织中NF-κB表达阳性率明显高于良性卵巢肿瘤(p

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