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【摘要】 目的探讨血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅳ型胶原水平变化对糖尿病肾病的临床意义。 方法TGF-β1和ST4C：ELISA法；尿白蛋白排泄率（UAER）：散射比浊法。 结果2型糖尿病合并糖尿病肾病组（DN组）TGF-β1和ST4C水平明显高于2型糖尿病合并糖尿病肾病组（DN组）和NG组，差异有非常显著性（ P 1、ST4C与UAER存在较高的正相关性（ r =0．488 2、0．7414， P 1与ST4C有高度正相关性（ r =0．656 0， P 1与ST4C相关性无显著意义（ r =0．341 9， P >0．01）。 结论血清TGF-β1、ST4C与2型糖尿病合并糖尿病肾病组（DN组）肾损害高度相关，TGF-β1是DN的重要发病机制。
【关键词】糖尿病肾病；Ⅳ型胶原；转化生长因子β1；白蛋白排泄率
Role of TGF-β1 and Ⅳ collagens in patients with diabetic nephropathy
PENG Wei-cheng,ZHENG Dong-wen,LI Yi.Mayong Hospital of Dongguang city Guang Dong 523000,China.
【Abstract】 ObjectiveTo investigate clinical significance of serumTGF-β1 and Ⅳ collagens concentration change in diabetic nephropathy. MethodsThe concentrations of TGF-βand ST4C were detected with ELISA,urine albumin excretion rate was detected with Scattering turbidimetry. ResultsThe concentrations of the serum TGF-β1 and ST4C in diabetic nephropathy were higher than those in DM and NG（ P 1、ST4C and UAER were positively correlated in DN,TGF-β1 and ST4C were positively correlated in DN,TGF-β1 and ST4C were not correlated in DM. ConclusionTGF-β1 and ST4C may play the important role in pathogenesis of diabetic nephropathy.the diabetic patients are significantly higher than tlaosc in controls（ P 1; urine albumin excretion rate
糖尿病肾病（DN）主要是由于肾小球和肾小管功能损害引起，相关研究表明，转化生长因子β1（TGF-β1）与DN发病有关；而血清Ⅳ型胶原（ST4C）水平反映了DN 的损害程度。为此，笔者检测并比较2型糖尿病（T2DM）未合并DN（简称DM组）、T2DM合并DN（简称DN组）、正常人（简称NG组）ST4C、TGF-β1水平，就各组之间两者血清水平差异、DN组两者水平与尿白蛋白排泄率（UAER）做相关性分析。
1 资料与方法
1．1 一般资料 NG组：30例，为麻涌医院体检正常者，其中男14例、女16例，年龄21~26岁，平均(36．53±8．10)岁。DM组：30例，男17例，女13例，年龄33~76岁，平均(55．63±13．99)岁。DN组：30例，男14例，女16例，年龄34~80岁，平均(61．27±11．30)岁。为同期住院患者。
1．2 诊断标准 T2DM诊断标准为1999年WHO标准[1]；DN入选标准：6个月内查UAER连续2次以上，平均值达到20~200 μg/min，或平均值>200 μg/min，和排除其他非2型糖尿病原因引起的肾病。所有患者须排除急慢性活动性结核、急慢性肝炎、高脂血症、肿瘤、糖尿病急性并发症、妊娠和其他急慢性炎症。
1．3 材料 血清：清晨空腹静脉血，聚丙烯管留置，室温静置1~2 h，4℃、4 000 r/min离心10 min，EP管留置血清-40℃保存待检。尿液：留血前一日留取8：00~8：00的24 h尿液，低温保存，混匀后精确记量，留适量-40℃保存待检，不加防腐剂。
1．4 试剂与仪器 TGF-β1 ELISA试剂：奥地利维也纳MedSystems Diagnostics GmbH公司生产的鼠抗人(单抗)TGF-β1 ELISA试剂盒（单抗、实验室研究用试剂）。ST4C ELISA试剂：复星实业中美合资上海华泰生物制品有限公司（临床诊断用试剂）。仪器：550 Bio Rad酶标仪；Beckman Array 360特定蛋白仪。
1．5 方法 TGF-β1、ST4C： ELISA法，550 Bio Rad酶标仪450 nm读数，复孔检测，自动分析软件分析结果，取各标本平均值进行统计。UAER：散射比浊法。
1．6 统计学方法 实验结果用（ x ±s ）表示。TGF-β1 ELISA试剂盒批内差异≤4．9%，批间差异≤7．2%；ST4C ELISA试剂批内差异≤5．6%，批间差异≤7．9%。所有统计处理由SAS 6．12分析软件分析。
2 结果
检验结果：DM组与NG组比较差异有统计学意义，（ P 1、ST4C水平明显高于DM组和NG组，与后两者差异有统计学意义（ P 1、ST4C与UAER相关系数分别是+0．7414、+0．488 2，相关性有高度统计学意义（P分别1与ST4C的相关系数是+0．656 0，有显著相关性（ P 1、ST4C与NG组水平差异有统计学意义（ P 1与ST4C存在一定相关性（ r =+0．341 9），但无统计学意义（ P >0．05）。
3 讨论
DN是各型糖尿病严重并发症，其基本病理形态改变表现为肾脏肥大、肾小球硬化、肾小管间质、血管损害[2]。而这一切改变都与肾小球系膜细胞外基质堆积有关。ST4C是细胞外基质的主要组成成分，在肾小球则由三股相同的α链组成，以三维网络存在，对维持肾小球正常形态和滤过功能具有重要作用。
DM时多种因素可以影响肾小球细胞外基质中ST4C水平：高糖可以导致ST4C基因转录增强，表达增加；而糖基化终末产物（AGES）一方面可以促进TGF-β1 mRNA转录和表达[3]，另一方面可以诱导其他细胞因子如白介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）等的产生，促进细胞外基质的堆积[4]；血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）通过诱导TGF-β1 mRNA和纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）的表达而促进细胞外基质的合成并抑制其分解[5]；非酶化糖基化血清蛋白可引起在系膜细胞数目不增加的情况下促进ST4C的增加[5]，而且后者注射后可以引起非糖尿病小鼠形成亚临床DN，予以阻止可以延缓实验性糖尿病鼠的DN发生[6]。
所有上述因素可能都是通过促进TGF-β1 mRNA的转录和翻译介导实现的：TGF-β1 mRNA的转录与翻译活性增加，一方面导致ST4C合成增加，同时抑制相关蛋白水解酶合成，使其分解减少，导致细胞外基质堆积、肾小球形态结构的改变，影响肾小球滤过屏障-分子和电荷屏障。笔者的研究表明，DN组TGF-β1、ST4C明显高于DM组和NG组，并且两者具有高度的正相关性；同时DN组TGF-β1、ST4C与UAER成高度正相关关系，与国外有关实验结果一致[7-8]。说明DN肾损害与TGF-β1、ST4C有关，并且血中TGF-β1、ST4C水平反映了肾脏损害的程度。同时笔者的实验和相关实验结果[9]还表明，单纯糖尿病时血中TGF-β1、ST4C水平即增高，说明DN时两者水平增高不是DN肾损害的结果，而是DN肾损害发生的重要机制，TGF-β1、ST4C在DN的肾损害中发挥了重要作用。
由于UAER的水平影响因素较多[10]，而血清和尿中ST4C水平相对恒定，因此其在血和尿中水平可能是DN更好的监控指标[11]。我们的实验也提示，可以通过更多的途径来阻断TGF-β1的转录和翻译以达到预防和控制DN的发生和发展[12]。
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