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[摘要] 目的探讨羊水细胞培养及染色体分析中的若干问题，以及穿刺诊断的意义。方法 对于成功培养的1241例羊水标本的染色体结果进行分析，分析检出异常核型的类型、不同穿刺指征的异常检出率以及异常核型分布特点。结果1241例标本，检出异常核型41例，检出率为3.3％，其中常染色体三体17例，性染色体三体1例，性染色单体3例，平衡易位4例，倒位9例，部分三体l例，嵌合体4例，其他染色体结构异常2例。结论羊水细胞及染色体核型分析应用于染色体异常高危孕妇人群有重大的意义，可降低染色体异常胎儿的出生，提高我国人口素质。
[关键词] 产前诊断；羊水细胞培养；染色体核型
[中图分类号]R714.5[文献标识码]A[文章编号] 1672--4208(2010)17-0008-02
自1966年，Steele和Breg成功培养出羊水中的胎儿细胞并进行染色体分析至今，羊水细胞培养及染色体分析技术已不断改进、发展，并被广泛应用。虽然近年来分子学方法发展迅速，但是羊水细胞培养及核型分析技术仍然是产前诊断中应用最广泛、可行、经济的经典方法。笔者对2005年1月～2009年10月成功培养的1241例羊水细胞培养及染色体分析进行回顾性总结，现将结果总结报道如下。
1 资料与方法
1.1 临床资料标本来自2005年1月～2009年10月泰安市中心医院生殖与遗传科产前诊断门诊病例，符合产前诊断医学指征且无羊水穿刺禁忌症的孕妇，成功穿刺收集羊水细胞1251例。受检孕妇年龄22-45岁，孕周16-26周。
1.2方法(1)采样：在B超监护下，无菌抽取羊水约20mI。(2)接种：羊水标本离心后弃上清液，留大约1ml，接种于培养液中，5％C02、37℃培养。(3)收获：7d后观察细胞贴壁生长情况并换液，继续培养2d，见大量中期细胞即可收获。(4)制片：采用细胞刮刀法，收集细胞，然后低渗处理、固定、滴片。对制好的细胞滴片经过老化、烤片，胰酶消化，G显带。(5)分析：每例羊水染色体选择形态较好、带纹清楚的中期核型，分析至少3个核型，计数至少20个核型。如遇到异常核型需要增加分析、计数数量。
2 结果
1251例羊水标本中，成功培养1241例，培养失败10例，成功率为99.2％。在成功培养的1241例标本中，染色体异常4l例，异常率为3.30％。异常的41例中包括21－三体14例、18－三体2例、13＝－三体1例。见表l、表2。
3 讨论
干预出生缺陷染色体异常患儿，尤其是唐氏综合症的患儿，对提高我国人口素质有重要的意义。笔者选取泰安市中心医院产前诊断中的各种高危因素的孕妇，进行羊水穿刺和羊水细胞染色体核型分析，对羊水异常病例进行流行病学的调查，从而探讨胎儿染色体异常的影响因素，为指导今后的产前诊断工作提供实验室依据。
3.1 孕妇中期血清学筛查高风险 中期筛查高风险在羊水穿刺的所占比例最高，是羊水染色体分析应用最广的人群，结果显示中期筛查高风险者羊水染色体异常15例，异常率为2.06％；其中2l一三体8例，47，xxY，1例，可以看出孕妇中期血清学筛查的阳性结果不仅可以提示21―3体的高风险的可能，而且对其他三体同样有提示作用。此外研究还发现，筛查的阳性结果不仅可以提示染色体数目上的异常，还可以提示染色体结构上的异常，甚至染色体的微小缺失。比如筛查阳性的羊水细胞核型中出现了平衡易位、染色体倒位和嵌合体的核型。染色体核型分析和其他快速诊断相比，不仅可以得到染色体数目上的异常，而且能对染色体结构异常做出明确诊断，但对于复杂的基因结构异常需要进一步用分子遗传的方法诊断。
3.2 年龄风险高龄孕妇是羊水穿刺的第2指征。孕妇年龄超过35周岁，生育年龄的增加和染色体异常有紧密的关系。
3.3 超声提示高风险早期B超对胎儿颈后透明带(NT)的测定与胎儿染色体异常有着紧密的关系。单纯NT增厚为穿刺指征的有5例染色体异常。
3.4 平衡易位携带者两条染色体平衡易位携带者在生殖细胞减数分裂时可以出现18种配子，其中1种配子正常，1种配子为平衡易位，其他16种配子为部分单体或三体，因此这类人群中进行羊水染色体产前诊断最有意义。
3.5 先天愚型儿生育史 曾生育先天愚型儿的25周岁以下的孕妇，再次生先天愚型儿的风险增加50倍。
对于染色体病的产前诊断，除了明确穿刺指征外，还需配合专业的遗传咨询，完整的家系调查才能够给孕妇一个更为合理的临床建议，同时也保证了染色体资料的完整性。随访工作不仅可以了解到妊娠结局，也有利于分析特殊病例的临床意义。
