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[摘要] 目的：通过骨碱性磷酸酶（BALP）试条检测血BALP含量以及计算血BALP含量与临床的符合率，来评价一种血BALP含量检测方法的应用价值。方法：用全血干化学免疫浓缩法BALP半定量快速检测试剂盒检测4 173份婴幼儿末梢血中BALP的含量。结果：BALP试条测定结果与临床的符合率为98.35%。结论：用BALP试条试剂盒检测血BALP，方法操作简单快速，结果准确可靠，具有临床推广价值。
[关键词] 干化学免疫浓缩法；佝偻病；婴幼儿；微量采血
[中图分类号] R446.1 [文献标识码] C[文章编号] 1674-4721（2011）07（a）-084-02
随着骨碱性磷酸酶（BALP）检测方法的灵敏度，特异性提高，BALP作为骨代谢异常的标志，越来越受到临床重视。临床研究表明，血清BALP活力的定量测定可作为检测骨形成变化的有效参数。本着从实际需要出发，针对不同检测人群，检测方法的经济实用性和便捷性也变得越来越重要。本文通过连续3年多来用BALP试条半定量法对4 173例疑似有佝偻病及有佝偻病症状的婴幼儿末梢血BALP含量检测结果的研究分析发现，BALP试条检测血BALP准确，快捷，方便实用，检测结果稳定，特别适合低龄婴幼儿半定量检测血BALP含量，为佝偻病的早期诊断和治疗提供科学依据。因此，BALP全血干化学免疫浓缩法是婴幼儿筛查，早期诊断的一种快速、准确有效的检测方法，具有临床推广价值。
1 材料与方法
1.1 标本来源
选取2007年7月～2010年11月来本院儿科及儿童保健科门诊，怀疑佝偻病和佝偻病症状的婴幼儿4 173例，其中，男2 361例，女1 812例；0岁2 130例，1岁1 180例，2岁411例，3～4岁321例，5～6岁131例。
1.2 试剂
骨碱性磷酸酶试剂盒，由安徽高山药业有限公司生产。试剂组成：板状反应条，样品稀释液，显色剂A液、B液，一次性30 μl定量取样管，标准比色板（所有试剂均在有效期内使用，严格按说明书操作）。
1.3 方法
全血干化学免疫浓缩法，操作步骤：①打开试剂盒，取出反应板，在反应装置血浆分离器的加样孔内滴加1滴样品稀释液，待渗入静置3 min；②用一次性定量取样管采集左手无名指末梢血30 μl，加入加样孔中，待渗入，滴加2滴样品稀释液，待渗入；③从反应装置上取下血浆分离器，露出反应膜，向反应膜上滴加2滴样品稀释液，待渗入，将废液池滑板抽至到规定位置；④在反应膜加样孔内分别滴加显色剂A液、B液各1滴，立即置37℃恒温水浴箱反应6 min；⑤取出反应板，将废液池滑板推回原位，10 min内对照标准比色板比色，读取测定结果。
1.4判断标准
阴性：BALP≤200 U/L为正常，临界：BALP 201～250 U/L为可疑，阳性：BALP 251～300 U/L为佝偻病诊断界限。佝偻病活动初期BALP为200～250 U/L，活动激期BALP为250～300 U/L。
1.5 统计学处理
应用SPSS 11.0统计软件进行数据分析，率间比较应用χ2检验。以P0.05），3～4岁组与5～6岁组比较差异无统计学意义（χ2=1.856，P>0.05）见表1。
2.3 男女检测结果
本次检测男2 361例，阳性1 672例，阳性率为70.82%，女1 812例，阳性1 264例，阳性率为69.76%，男女差异无统计学意义，χ2=0.553，P>0.05，见表2。
3 讨论
佝偻病是小儿四大常见病之一[1]，其原因为缺钙，95%以上由维生素D缺乏引起，主要影响骨骼的生长发育。本研究发现幼儿年龄愈小，患病率越高，尤其以1岁以内的低龄婴幼儿最为明显。佝偻病不仅使小儿骨发育迟缓，骨质软化，骨骼畸形，同时引起神经、肌肉、造血免疫等组织器官功能异常，易患上呼吸道感染、肝炎、腹泻、贫血等病，严重影响小儿身心健康。BALP主要由成骨细胞合成，当小儿体内维生素D缺乏，骨出现骨钙化不足时，成骨细胞活跃，血BALP活性升高，活性高低与病情程度成正相关，且其改变可表现于影像学[2]，因此BALP检测对佝偻病的早期诊断有明显的临床意义[3-4]。同时作为成骨细胞的一种成分，BALP参与骨过程并且其活性在血清中稳定没有昼夜变化，因此血清BALP酶活力的定量测定可作为观察骨形成变化的敏感指标，为临床提供有效治疗的监测手段。
血清ALP测定是佝偻病诊断常用指标之一，虽然能发现部分早期患者，但缺乏特异性、灵敏度也不高，当出现X线改变或典型症状时多已属疾病后期，血Ca、P检测由于体内代谢作用，一般改变不明显，不利于疾病的早期诊断，因此传统的影像学、血液生化及临床体检诊断佝偻病不易早期发现患者，尤其对低龄婴幼儿，常常因为静脉采血困难、痛苦，X线检查又有一定损害，常被家长及患儿所拒绝，影响疾病的早期诊断和治疗。用BALP试条测定BALP活性诊断佝偻病，具有操作简便快捷，微量用血，不需特殊仪器设备，成本低廉，特异性强，灵敏度高等优点，已被临床证实有较强的早期诊断价值[5]。只需30 μl末梢血，15 min即可完成全部结果分析，省去了婴幼儿采血不便的麻烦，检测结果快速准确，易被患儿和家长接受，为疾病的早期诊断、治疗效果的监测、病情愈后等提供科学依据，具有临床推广价值。所以特别适合各级医疗保健单位，特别是妇幼保健单位及儿童医院的常规检查，尤其对条件有限的佝偻病高发地区更为适用。
[参考文献]
[1]邹时朴,李维君.骨碱性磷酸酶在婴幼儿佝偻病诊断中的评价[J].江西医学报,2003,43(1):74.
[2]黄照国,苏国生,钟润,等.佝偻病与小儿好动的相关性研究[J].中国妇幼保健,2007,22(21):2985.
[3]俞淑敏,沈时霖,仇建樱.对佝偻病诊断标准中部分指标的几点看法[J].中华儿科杂志,2002,40(1):52.
[4]徐燕,张佩斌,池霞,等.婴幼儿佝偻病简易诊断指标的探讨[J].东南大学学报(医学版),2003,22(6):402.
[5]王加义,文庆成.小儿佝偻病诊断用骨碱性磷酸酶试剂盒的研制[J].中华实用儿科杂志,1995,10(1):53-54.
（收稿日期：2011-05-26）
注：“本文中所涉及到的图表、公式、注解等请以PDF格式阅读”
