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关键词：马钱子；制剂；士的宁含量测定 中图分类号： R927.2 文献标识码： A 文章编号： 1008-2409(2008)03-0600-03
马钱子为马钱科植物马钱(Strychnos nux-uomica L.)的干燥成熟种子［1］。为常 用的剧毒 中药,具有通络止痛、散结消肿功效。所含的主要有效成分和有毒成分为士的宁,为确保该成 品安全有效，必须采用可靠简便的含量测定方法严格控制士的宁的含量。笔者对不同剂型中 药制剂中士的宁含量测定方法进行了综述。
1 分光光度法
1.1 紫外分光光度法
利用士的宁在255nm处有最大吸收而测定其含量。黄驰等［2］采用薄 层色谱法在硅胶GF254板上分离得到的士的宁，再用紫外分光光度法测定，计算其中的含量 。
1.2 双波长法
特点是用一个吸收池和两束不同波长的光进行测定。通常干扰组分吸收 光谱在这两个波长处具等同吸收，可消除共存组分的干扰。晕复静片经适当溶媒提取后，分 别测定在λ262nm,λ300nm处的吸光度，计算士的宁含量［3］。还有报道用此法测定 风湿马钱片中士的宁的含量和金钱白花蛇药酒中士的宁的含量。
1.3 三波长法
根据选定干扰组分吸收光谱上为一条直线的3个不同波长，利用比例 关系消除干扰组分对测定的影响。李明辉等［4］配置适当浓度的士的宁及马钱子碱 的标准溶 液及不含马钱子的空白壮筋骨胶囊样品提取液，并将上述3种溶液于210～320nm波长扫描， 计算马钱子碱及阴性样品在3个波长处吸光度成一条直线，224nm，264nm，267nm为测定壮 筋骨胶囊中士的宁含量的精选测定波长测定士的宁的含量。
1.4 正交函数分光光度法
以士的宁及马钱子碱在240～290nm波长区间内呈二次吸收 曲线，故采用二次正交多项式为特征多项式,以264nm,269nm,284nm和298nm的几个测试点， 按P=5A1 -A2-4A3-4A4-A5+5A6计算各式中间波长P值，通过P值转换曲线, 选择276.5nm为测 定士的宁的中间波长测定壮筋骨胶囊，回收率99.3%［5］。
2 薄层扫描法
2.1 单波长反射法锯齿扫描
罗晋萍等［6］以甲苯―丙酮―乙醇―浓氨液（30∶20∶3∶1） 为展开剂；测定波长为254nm；对金龙祛痹丸中士的宁的含量进行测定。点样量在0.54～3.2 1μg范围内线性关系良好。报道［7］用硅胶GF254薄层板，环已烷―氯仿―甲醇（7. 5∶4∶1 ）为展开剂，在256nm波长测定骨剌胶囊中士的宁含量，结果点样量在1.10～5.50μg范围内 与积分值呈线性关系，平均回收率为100.16%。
2.2 双波长薄层扫描法
王琳等［8］用双波长反射法锯齿形扫描测定晕复静片中士的宁含量。用硅胶GF2 54，展 开剂为甲苯-丙酮-乙醇-浓氨(8∶6∶0.5∶0.5)；λＳ=245nm,λＲ=300 nm,Sx=30； 点样量 在0.536～3.216μg范围内呈良好的线性关系。陈晓斌等［9］用双波长薄层扫描 法测定 风湿痹痛丸士的宁、马钱子碱、乌头碱的含量。测定波长503nm，参比波长550 nm，结果面 积积分平均值为47519.17,标准差为762.37,平均回收率士的宁99.9%。陈勇等在十一方药酒 的质量控制研究中测定马钱子碱和士的宁的含量［10］，结果:在λＳ=500nm,λ R=650mm, SX= 3,士的宁含量在1.063～5.315μg之间,点样量与峰面积呈良好线性关系。姬生国等［11 ］以甲 苯∶丙酮∶乙醇∶浓氨溶液（16∶12∶1∶4）的上层溶液为展开剂，在λS=254 nm，λ R=325 nm ，测定三鼎丹胶囊中士的宁的含量，结果在1．026～5．130μg之间，线性关系良好,样品平 均回收率为99.5%。
3 高效液相色谱法
郭淑丽等用高效液相色谱法测定寒痹停片中士的宁含量［12］。用氰基柱，流 动相：甲 醇-水―三乙胺―乙酸（9800∶155∶15∶30）；检测波长254nm，加样回收率的平均值为99 .82%。牛家萍等［13］用HPLC法同时测定风湿马钱片中士的宁和马钱子碱的含量。 使用 氰基柱， 甲醇-水-乙酸-三乙胺作为流动相，检测波长为254 nm时，用外标法同时测定了风湿马钱 片中士的宁和马钱子碱两种成分的含量。结果在2~10μg/ml浓度范围内，士的宁标准曲 线的 相关系数，�r�=0.9998，回收率为99.6%。用HPLC法测定晕复静片中士的宁和马钱子碱 的含量 ［14］, 采用内标法,色谱柱为C18,流动相:甲醇-水-醋酸-三乙胺(65∶200∶2.5∶0 .3),内标物: 盐酸普鲁卡因,检测波长为254 nm。结果:士的宁碱的浓度线性范围为5.98～29.90mg/L,回 收率分别为99.6%。杨安东等［15］在骨痛宁搽剂的质量标准研究中采用高效液相 色谱法 对方中淫羊藿中淫羊藿苷、马钱子中士的宁进行含量测定。结果:士的宁在0.4～4.8μg范 围 内线性关系良好。张凌云等［16］用 RP-HPLC法测定伸筋丹胶囊中士的宁和马钱子 碱的含量 ，采用Hypersil C18色谱柱(4.6mm×200mm,10μm),水-乙腈(80:20)(含三乙胺0.01mol/L ,磷酸调pH值至2.6±0.1)为流动相,检测波长260 nm。结果士的宁在10～90μg/ml的范围 内浓度与峰面积呈良好的相关性。鲁燕侠等［17］报道用反相高效液相色谱法同时测 定祛痹丹 胶囊中士的宁和马钱子碱的含量，色谱柱为C18；流动相为0.01mol/L KH2PO4:甲醇:乙 腈(73∶27∶40)，流速1ml/min；检测波长254nm。结果：士的宁在0.02～0.2mg范围内 呈良好线性关系。还有不同的文献报道有8个不同剂型20多个不同的品种，采用高效液相 色谱法测定其制剂中士的宁的含量。
4 其他方法
4.1 用毛细管区带电泳法测定伸筋丹胶囊中士的宁和马钱子碱的含量［18］。本 法对伸筋丹 胶囊中士的宁和马钱子碱成分进行了分离研究。采用pH=6.0,0.2mol/L磷酸溶液作 为缓冲 液；运行电压20kV；检测波长为260nm，被测成分可得到较好分离。用内标法测定其含量， 在0.02～0.15mg/ml范围内，士的宁和马钱子碱均与内标峰面积之比呈良好线性关 系，平均回收率分别为95.1%和96.4%。
4.2 采用毛细管区带电泳法测定马钱子及其制剂中士的宁和马钱子碱的含量［19 ］。建 立毛细管区带电泳法（CZE）测定马钱子及其制剂治伤消淤丸中士的宁和马钱子碱的含量， 选择含0.2mol/L醋酸铵（pH3.64）溶液为分离用缓冲液，以盐酸多巴胺为内标 ，采用3 .5kPa进样5s，运行电压25kV，紫外检测波长214nm。士的宁和马钱子碱的浓度在5～100μg/ ml内时，具有良好的线性关系和重现性，相关系数�r�分别为0.9996和0.9995，加 样回收率 均在95%～105%，最低检测分别为0.06μg/ml和0.04μg/ml。CZE可有效地分离、测定马钱 子及其制剂治伤消淤丸中的士的宁和马钱子碱的含量，方法简便、快速、准确、可靠。
4.3 采用硅胶柱准离子交换色谱法对马钱子及其炮制品马钱子中士的宁含量测定，并 与《中国药典》收载的计算分光光度法进统计对比［20］。本法简便、准确、重现性 好，不 受其它成分干扰；经配对比较t检验法进行统计，测定结果与分光光度法差异有极 显著性（P
