【www.zhangdahai.com--开题报告】
[摘 要] 目的 探讨胆红素对BC-3000血液分析仪测定白细胞影响的原因和解决的方法。 方法 用手工方法和用BC-3000分别测定30例血清总胆红素>200 μmol/L的标本,重度黄疸标本离心洗涤后再次测定。
结果离心洗涤前BC-3000与手工方法对白细胞的测定差异有统计学意义;离心洗涤后两种方法对白细胞的测定结果差异无统计学意义。
结论重度黄疸中的胆红素干扰BC-3000对白细胞的测定,应当用手工方法复检,或者离心洗涤后用仪器重新检测。
[关键词] 胆红素;BC-3000;白细胞计数�
[中图分类号] R442.4[文献标识码] A[文章编号] 1672-4208(2009)15-0027-01
血液分析仪因其高效率、高精度、操作简便等优点而在各医疗单位广泛应用。但因仪器分析原理的局限性,对其测定结果的干扰因素也很多,比如温度、磁场、药物等,在一定条件下并不能完全代替手工法。病理状态下血清中的高浓度胆红素,是干扰血液分析仪测定白细胞的重要因素之一,报道如下。�
1 材料和方法�
1.1 一般资料 30例标本7例来自门诊患者,23例来自住院患者,其生化检查总胆红素均>200 μmo/L,男18例,女12例。�
1.2 仪器和试剂 深圳迈瑞公司产BC-3000三分类血液细胞分析仪及配套试剂,山东威高集团公司产EDTA-K2抗凝真空管,美国雅培c8000全自动生化分析仪,四川迈克公司产胆红素测定试剂。�
1.3方法 所有标本均在清晨空腹采取。胆红素测定用无抗凝真空管,分离血清后立即上机测定。白细胞测定用EDTA-K2抗凝真空管,采血量为2 ml,充分混匀后上机测定。白细胞手工计数和分类按《全国临床检验操作规程》第2版操作[1\]�。所有血常规样本完成上述操作后经1500 r/min离心10 min,吸出上层血浆,补充以同等量的稀释液混匀后再上机测定。上述操作在2 h内完成。�
1.4统计学方法 所有数据以x±s�示,检验后采用0.05)。
洗涤前后图谱分析,见图1,2。�
图1为标本离心洗涤前白细胞直方图,其特点是在35～98 fl范围内白细胞密集,主峰靠近50 fl右侧,且单边下降。200～400 fl白细胞极少,呈现单峰特征,分类显示为淋巴细胞增高。这是因为血液分析仪的分析流程是先用溶血素溶解红细胞,然后依据电阻脉冲原理对白细胞计数分类,细胞数量取决于计数池中颗粒的多少,如果红细胞未被完全溶解,则会因为其体积大小的因素计入淋巴细胞数内[2\]�。图2为离心洗涤后白细胞直方图,干扰因素被剔除,中性粒细胞不再被掩盖,直方图呈现双峰特征。�
3 讨论�
重度黄疸是临床常见症状之一,其血清中的胆红素大幅增高,胆红素对白细胞测定的干扰机制,一般认为是红细胞膜脂质异常,膜表面脂蛋白增多,胆红素对溶血素中某种作用成分相抵抗等因素有关[3-4\]�。这时的红细胞对溶血素有抵抗作用,导致大量红细胞不能溶解而落入淋巴细胞计数范围,机器将其计入淋巴细胞,从而导致白细胞总数和淋巴细胞分类假性增高,而手工法用的是冰醋酸,其溶解细胞的能力很强,同时计数和分类的准则用的是形态学这一客观指标,所以重度黄疸不会对其造成干扰。离心洗涤后,大部分胆红素被去掉,其对仪器的干扰作用也相应消除。曾有报道不同仪器的溶血素配方不同,对红细胞的溶解能力也不同,因此黄疸的标本并非在所有仪器上均受到干扰[5\]�。�
BC-3000血液分析仪为电阻抗型血液分析仪,这类仪器的测定原理也称Coulter原理,它是基于血细胞的相对不良导电性而制成的,其分类是通过对细胞膜表面脂蛋白修饰后再分类的,这种设计只能区分颗粒的大小,而不能区分颗粒的性质[6\]�。由于各类细胞之间体积交错,在某些病理情况下,如严重肝病[7\]�、血红蛋白病、一氧化碳中毒、非寒冷性凝集患者的红细胞,也会因为红细胞对溶血剂的抵抗作用而溶解不良,造成细胞计数和淋巴细胞假性增高。�
因此,对于上述病例在用仪器测定过程中,也应当同时做手工测定,以避免出现误差。�
参考文献:�
\[1\] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程\[M\].2版.南京:东南大学出版社,1997:4-6.�
\[2\]邝泳云.一种异常白细胞直方图的分析及原因初探\[J\] .上海医学检验杂志,2000,15:15.�
\[3\]张健,张智慧.黄疸因素对PLUS血细胞分析仪计数的影响\[J\].医学理论与实践,2004,3:336.�
\[4\]王梅,唐超,陈宏础,等.红细胞膜脂质成分的变化与白细胞计数假性增高的关系\[J\] .重庆医科大学学报,2002,27:284-286.�
\[5\]杨晓辉,刘素兰,霍亚平.黄疸影响白细胞计数探讨\[J\].川北医学院报,2001,4:131-132.�
\[6\]王传礼,王国礼,现代检验医学技术及质量控制\[M\].济南:山东科学技术出版社,2004,4:334.�
\[7\]季柏林,沈水英.10例肝病患者白细胞异常直方图分析\[J\] .现代中西医结合杂志,2001,10:979.�(收稿日期:2009-05-03)
