自身免疫性甲状腺炎治疗_中药甲宁对自身免疫性甲状腺炎治疗作用的实验研究

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  【摘要】 目的 研究中药甲宁对自身免疫性甲状腺炎治疗作用。方法 用0.05%碘化钠和福氏佐剂抗原乳剂进行造模,2周后加强免疫,以后每周加强免疫1次,至第6周结束[1-3]。正常对照组不做任何处理。各药物组即①~④组免疫后第3周开始灌胃给药,1次/d,均按每100 g体质量1 ml容积给药,⑤、⑥组大鼠给与等容生理盐水。第10周结束实验。取血(3 ml),分离血清冻存(-80℃),测定甲状腺球蛋白抗体(TGAb),甲状腺微粒体抗体(TPOAb)。测量的甲状腺的重量指数。甲状腺组织进行病理检查。结果 组织学示雷公藤组及甲宁大、中、小剂量组甲状腺病变程度均较模型组轻,差异有统计学意义(P[1-3]。正常对照组不做任何处理。各药物组即①~④组免疫后第3周开始灌胃给药,1次/d,均按每100 g体质量1 ml容积给药,⑤、⑥组大鼠给予等容生理盐水。第10周结束实验。摘眼球取血(3 ml),分离血清冻存(-80℃),处死动物,取双侧甲状腺组织,称重并计算每100 g大鼠体质量的甲状腺毫克数作为甲状腺的重量指数。之后,留取一侧甲状腺组织用10%中性甲醛固定,常规石蜡包埋切片,HE染色。
  2.3 甲状腺组织病理检查 HE染色的甲状腺组织切片,光学纤维镜下分别观察甲状腺实质及间质,包括滤泡大小、上皮形态、上皮及滤泡间淋巴细胞浸润程度。并参考Charveire的分类法[3],将上皮细胞的淋巴细胞浸润分为以下几个等级:0级,0个炎细胞/张切片,记为0分;0级,0个炎细胞/张切片,记为1分;2级,1个炎细胞/10HPF(高倍视野),记为2分;3级,1个炎细胞/5HPF(高倍视野),记为3分;4级,1个炎细胞/2HPF(高倍视野),记为1分;间质的淋巴细胞浸润程度(-)为0级,记为0分,(+)为1级,记为1分,(+)为2级,记为2分,(++)为3级,记为3分,(+++)为4级,记为4分,甲状腺淋巴细胞浸润程度=滤泡上皮间淋巴细胞浸润程度+滤泡上皮间淋巴细胞浸润程度。
  2.4 甲状腺球蛋白抗体(TGAb),甲状腺微粒体抗体(TPOAb)的测定 大鼠血清 TG、TPO抗体采用放射免疫试剂盒,并按试剂盒检测步骤进行TGAb、TPOAb水平测定。TGAb、TPOAb水平以抗体结合率表示。
  2.5 统计方法 计量资料采用均值±标准差(x±s)表示,各组之间采用单因素方差分析,统计软件为STATA6.0,计数资料的多组间比较采用秩和检验(Kruskal-Wallis法),检验水准α= 0.05。
  
  3 结果
  
  3.1 甲状腺组织形态及病理检查结果 正常大鼠甲状腺肉眼�为淡红色,细条状,质地柔软,不易见到峡部;光学纤维镜下甲状腺滤泡呈圆形或椭圆形,大小均匀一致,上皮细胞呈低柱状,滤泡腔内充满淡红色胶质,分布均匀,未发现有明显的炎细胞浸润。造模组大鼠甲状腺肉眼观颜色浅淡、苍白,质地较硬,有的可见不同程度充血;光学纤维镜下可见甲状腺组织均出现明显的炎细胞浸润和炎性反应,炎细胞(主要为淋巴细胞、单核细胞等)可呈现灶性或弥漫性分布,甲状腺上皮细胞萎缩变扁,滤泡内分泌物较少,炎性反应较重者可出现甲状腺滤泡萎缩、消失或纤维化。各给药组大鼠甲状腺组织肉眼观与正常组大鼠无明显区别,质地较柔软,少数可见轻度充血;光学纤维镜下甲状腺组织未发现有明显的炎细胞浸润。甲状腺病变程度根据淋巴细胞浸润程度评分统计(Kruskal-Wallis法)结果显示,不同组别的甲状腺病变程度间差异有统计学意义(P[4]。有文献报道黄芪、当归有减轻氧自由基的损伤,抑制炎症因子,减少纤维生成的作用[5]。还有研究表明,由黄芪、当归、三棱、莪术等药物组方,能诱导甲状腺细胞的凋亡[6]。以上诸药配伍应用可以有效地调节机体免疫功能,抑制甲状腺组织的增生。
  临床研究表明,中药能有效地提高机体免疫能力和非特异性抗炎能力,软化缩小肿大的甲状腺组织及其结节,减轻甲状腺自身免疫反应,促进甲状腺功能的恢复,减少肾上腺皮质激素的临床用量,从而减轻激素的不良反应。
  
  参考文献
  1 唐伟,贾悦.实验性自身免疫性甲状腺炎动物模型的建立.国外医学免疫学分册,2003,26(4):211-213.
  2 陆风先,戴承凯,王伟,等.甲状腺抗原诱导大鼠实验性自身免疫性甲状腺炎的研究.中华内分泌代谢杂志,1998,14(4):252-256.
  3 顾志蜂,余江毅,秦文浩,等.温肾方对实验性自身免疫性甲状腺炎的影响.南通医学院学报,2004,24(3):273-275.
  4 焦艳,闻杰,于晓红,等.膜荚黄芪茎叶总黄酮对小鼠细胞免疫功能的影响.中国中西医结合杂志,1999,19(6):356.
  5 余凌,李惊子,王海燕.黄芪、当归在肾脏疾病中的应用及其机制研究进展.中国中西医结合杂志,2001,21(5):396.
  6 赵家军,高聆,柳欣琦,等.中药诱导Graves’病甲状腺细胞凋亡的初步研究.中国中西医结合杂志,1999,19(6):335.

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