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【摘要】 目的 探讨家兔气腹模型中不同气腹持续时间对肺的损伤作用。方法 以家兔为研究对象随机分为对照组(N组,假气腹组)、短时间气腹组(S组,气腹时间小于1 h)、长时间气腹组(L组,气腹时间大于3 h)。取各组血浆测血浆蛋白含量,分别取肺组织称取湿干重计算肺组织含水量、测定髓过氧化物酶(myleopemxidase,MPO)含量,取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)离心后测定上清液蛋白含量和沉渣中白细胞,计算肺通透系数(lung permeability index,LPI)。结果 L组肺组织含水量及BALF中白细胞数大于S和N组(P2 min),输入 0.9%生理盐水注射液(4 ml/kg•h)以补充非显性失水,待家兔四肢及尾部放松、睫毛反射消失后将动物固定于动物手术台上,给于 0.5 L/min 的鼻导管供氧,丙泊酚20~30 mg(kg•h)持续微量泵泵入维持麻醉。切开颈部正中皮肤,钝性分离各层组织,行左颈总动脉穿刺置管,连接压力换能器进行动脉有创血压监测,术中根据家兔肢体动作及血压、心率情况,酌情追加丙泊酚,力求心率、血压等各项指标接近生理值状态。使用OLYMPUS全自动气腹机建立CO2气腹模型,气腹针以20号硬膜外穿刺针替代,除对照组外CO2腹内压力恒定于8 mm Hg。
1.4 观察指标和样品采集 血浆蛋白样本采集:各组均于气腹建立前采集动脉血,用于测定血浆蛋白浓度。
支气管肺泡灌洗液(BALF)采集及处理:解除气腹后20 min加深麻醉,迅速剪开胸骨柄暴露肺组织并切断气管,止血钳夹闭右主支气管后,用注射器连接硬膜外穿刺包中的玻璃负压管插入气管,向左肺注入4℃生理盐水5 ml并反复抽吸3次,根据回收量取等量生理盐水同法操作,共灌洗3次,将所得肺泡灌洗液用2层消毒纱布过滤,置入离心管中离心(4℃ 3000 r/min 15 min),取上清液检测BALF蛋白含量,取下层沉淀液检测白细胞计数。
肺组织湿(W)干(D)重测定:结扎右肺中间叶并切除之,取其核心部位一小块组织,用滤纸吸干肺组织表面血污后放入事先称重过的玻璃试管中,称湿重后置入60℃电热恒温干燥箱中,7 d后测干重。
肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性测定:取肺组织小块于-80 ℃ 深低温冰箱冷冻保存,用化学比色法测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。
肺组织病理切片制作:取右肺组织约 20 g10%甲醛固定、石蜡包埋、切片。
观察指标计算公式: 肺通透指数 LPI=BALF 总蛋白/血浆总蛋白
MPO 活力单位(×10.-3U/mg)=(A3-A1)/1000× 肺重(mg)
(A3-A1为第一分钟和第三分钟吸光度之差)
肺组织含水量%=(肺湿重-肺干重)/肺湿重 ×100%
1.5 统计学方法 应用SPSS 11.5 软件包进行统计学分析。计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,组间各均数的比较采用单因素方差分析。P0.05),两组均小于L组(P0.05),均小于 L组 LPI,差异显著(P0.05),L组明显高于 S组与 N组(P0.05),均明显小于L组(P
