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【摘要】目的:研究柯孜木克颗粒的体内外抗菌作用。方法:采用试管连续稀释法和K-B法,通过测定最小抑菌浓度(MIC),最小杀菌浓度(MBC)和抑菌圈直径来观察其体外抑菌效果,建立尿路感染动物模型,观察其体内抗菌效果。结果:柯孜木克颗粒对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,变形杆菌,福氏痢疾杆菌在体外有较强的抑菌作用,对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,变形杆菌,福氏痢疾杆菌在体外有杀菌作用,对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,变形杆菌有抑菌圈,但对绿脓杆菌无效。对尿路感染有明显的抑制作用,与对照组比较,有显著性差异。结论:柯孜木克颗粒在体内外都有较强的抑菌和杀菌作用。
【关键词】柯孜木克颗粒;最小抑菌浓度;尿路感染
【中图分类号】R29【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2010)18-126-2
尿路感染是多种微生物在机体内尿中生长繁殖,并侵犯尿路粘膜或组织所引起的感染。根据国内统计,尿路感染占泌尿系统疾病首位,约42.9%[1]。在致病菌的作用下,尿路内大量微生物繁殖而引起的尿路炎症,病情反复,缠绵难愈,且大量抗生素的应用往往效果不佳,其副作用亦给患者带来了极大痛苦。
柯孜木克颗粒是新疆哈萨克民族传统医药研究的验方,组方为黑果越菊、沙生蜡菊、木贼等药材。据哈萨克医学文献记载及哈医临床研究结果证实:柯孜木克颗粒可用于尿道感染、膀胱炎、肾盂肾炎和肾病综合症、前列腺肥大、小便不畅等,也可用作全身强壮剂。我们的前期研究证明本方具有较好的抗炎、提高机体的免疫力、增加尿量等作用。在此基础上我们进一步研究了其体内外抗菌作用,研究报道如下。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1实验动物Wistar大鼠60只,雌雄各半,体重170～
190g,由新疆医科大学实验动物科提供,许可证号:SCXK(新)2003-OOO1。
1.1.2菌种金黄色葡萄球菌、(ATCC 25923),大肠杆菌、(ATCC 25922),变形杆菌、(ATCC 25921),绿脓杆菌、(ATCC 27853),福氏痢疾杆菌、(ATCC 51573),购自中国北京药品生物制品检验所。
1.1.3药品与试剂柯孜木克颗粒(新药制字Z20050112)由新疆阿勒泰地区哈医医院提供。三金片(国药准字Z45021645)是桂林三金药业股份有限公司产品。
1.1.4仪器菌种培养基:本院微生物教研室提供。
1.2方法
1.2.1按试管连续稀释法进行[2],每排第1管用无菌肉汤将柯孜木克颗粒作1:4稀释,然后再对倍稀释,每管1ml,每排最后1管加肉汤培养基作为阴性对照,三金片作为阳性对照,然后在每排试管里各加经1:1000稀释6h培养菌液0.05ml,37℃孵箱内培养24h后测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。
1.2.2采用K-B法,经1:1000稀释6h培养菌液涂布于培养基的表面,柯孜木克颗粒用无菌蒸馏水作1:4稀释(250mg/ml)后,用无菌滴管滴到管碟内,阴性对照组用生理盐水阳性对照组为三金片,37℃孵箱内培养74h,然后观察对固体培养基抑菌圈直径。
1.2.3感染动物模型的建立[3]取体重170～190g的60只wistar大鼠,雌雄各半,大鼠禁水观察12h备用,用1%的戊巴比妥纳麻醉,下腹部剪去毛,用碘酊和乙醇分别消毒后,用棉线活扣结扎尿道口,在下腹部正中切开1.5cm切口,用4、5号小针头抽取大肠菌液(将复苏后菌种再次转种于营养肉汤培养基中,37℃孵育18h后再用麦氏比浊法调整浓度为3×106cfu/ml菌液)0.75ml缓慢注入膀胱,缝合切口,6h后松解尿道口棉线,恢复正常饮食、饮水。假手术组手术中不注入大肠杆菌,注入生理盐水,手术过程同上,活扣结扎尿道口6h后松解,恢复正常饮食供水。
1.2.4分组及给药将造模大鼠随机分为6组,每组10只,即假手术组(辅料)、模型组(辅料)、三金片治疗组(3.675g/kg),柯孜木克颗粒高剂量组(1.6g/kg)、中剂量组(0.8g/kg)、低剂量组(0.4g/kg),造模10d后,用药组开始给药,用药组连续灌胃给药15d,每日1次。给药25d后,给予相应处理做尿分析,尿培养,大鼠肾脏带菌剖面百分率测定等指标地检查。即给药25d后,切开大鼠腹腔用无菌的真空采血管取尿液,分别作尿液分析和尿培养。尿液分析结果记录:白细胞>+或有脓球者均记为阳性,少许或无白细胞记为阴性。尿培养结果记录:细菌计数>10万记为阳性,细菌计数+或有脓球者均记为阳性,少许或无白细胞记为阴性)
2.4对尿路感染大鼠尿培养的影响
表5结果表明,柯孜木克颗粒高剂量组、中剂量组对泌尿道感染细菌有明显的对抗作用。
(尿培养结果记录:细菌计数>10万记为阳性,细菌计数
