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【摘要】 目的 观察动物对高原护唇膏的急性及长期毒性反应,为临床用药的安全剂量提供参考。方法 (1)急性毒性试验:采用最大给药量法测定小鼠口服高原护唇膏的最大耐受量。(2)长期毒性试验:将家兔按体重性别随机分为3组,采用2个剂量组(480 mg/kg、160 mg/kg)和赋形剂组连续涂抹家兔皮肤90 d,观察家兔的一般情况。剩余动物停药恢复7 d后重复上述检查。结果 小鼠口服高原护唇膏最大给药量为含药量1.5%,120 ml/kg。家兔连续给药90 d后护唇膏大、小剂量组对家兔的一般情况、血液、血液生化学、脏器系数均无明显影响,未发现长期毒性及中毒靶器官,恢复期亦无延迟性毒性反应。结论 高原护唇膏在规定剂量下使用是安全可靠的。
【关键词】 高原护唇膏;长期毒性;家兔
The study on the long-term toxicity of the lipcare stick
GU Yi,WANG Rong,ZHANG Xiao-li,et al.
Department of Pharmacology;School of Stomatology ,The Fourth Military Medical University, Xi’an 710032,China
【Abstract】 Objective To observe the acute and long-term toxicity of the lipcare stick, providing data for safe dose of clinical medication. Methods (1) Acute toxicity test: most tolerance dose was used to determine the maximum tolerance dose of mice.(2) Long-term toxicity tests: The rabbits were randomly divided into three groups according to the weight, two dose groups (480 mg/kg, 160 mg/kg) and the excipient group were provided for 90 d, to observe the conditions of rabbit.Results Most tolerance dose of mice was 1.5% ,120 ml/kg after 90 d, there are no impact on blood, blood-biochemistry, organ coefficient and histopathology of rabbit and no any toxicity.Conclusion lipcare stick was safe.
【Key words】 Lipcare stick;Long-term toxicity;Rabbit
作者单位:710032第四军医大学口腔医院药剂科(顾宜 王荣 张桃莉
董建山 钟超团 王荣华 王晓娟);陕西省中医研究院(张小丽)
高原护唇膏由第四军医大学口腔医院药剂科借鉴唇炎等口腔黏膜疾病30余年的研究经验,针对高原地区日照时间长,空气透明度高,对紫外线辐射阻挡小以及冰雪的反射率高,紫外线很强烈等特点,运用血清学免疫因子检测的方法探察、分析了高原寒区特发性唇炎的致病因素和病理机制而研制的,是一种具有修复功能的防晒药物唇膏,该防晒药物唇膏对唇炎具有预防功能,能显著降低唇炎的发生率;对已发生唇炎所造成的唇部各种损害具有很好的治疗作用,能显著缩短愈合时间,主要用于治疗高原性唇炎[1]。它主要是通过处方中的不同组分:烟酰胺,氧化锌及二氧化钛而对唇部起到修复,抗辐射的作用。
1 材料
1.1 动物 SPF级ICR小鼠,雌雄各半,♀体质量(20.9±1.4)g, ♂体质量(21.3±1.6)g[西安交通大学医学院实验动物中心,许可证号:SCXK(陕):2007-001]。普通级新西兰兔,雌雄各半,♂体质量1.7～2.0 kg[西安交通大学实验动物中心,动物许可证号:SCXK(陕)第2008-008],♀体质量1.8～2.1 kg[西安迪乐普生物资源开发有限公司,动物许可证号:SCXK(陕)2006-01]。
1.2 试剂与仪器 高原护唇膏(规格:总含药量3%,第四军医大学口腔医院药剂科,批号:090105),高原护唇膏(两种规格:大剂量组总含药量45%,小剂量组总含药量15%。第四军医大学口腔医院药剂科,批号:090405),赋形剂(规格:唇膏基质,第四军医大学口腔医院药剂科,批号:090405)。7170A型全自动生化分析仪(日本HITACH生产),血液学指标用雅培CD-1600仪((深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司),JA2003型电子天平(上海精密科学仪器有限公司),PM一10AD光学显微镜(日本Olympus公司)
2 方法
2.1 小鼠急性毒性实验[3,4] 因受药物浓度和体积限制,无法测出半数致死量LD50,做最大给药量试验[2]。取40只小鼠,雌雄各半,按文献方法[3] 禁食不禁水,随机分成实验组和空白组,20只/组,以最大可灌胃浓度灌胃给药,空白组为基质:麻油=1�∶�2,实验组为高原护唇膏:麻油=1�∶�1,40 ml/kg,1d内每间隔4h给药1次,共3次。给药后密切观察14 d内动物的一般情况,存活情况,小鼠中毒症状。14 d后处死动物,对中毒死亡动物及处死动物进行尸检,若有异常变化,进行病理组织学观察。
2.2 大鼠长期毒性实验[5] 根据预实验,最大剂量组的药物含量为45%,取36只家兔,按体重性别随机分成3组,每组12只,雌雄各半,按性别单笼饲养,分为如下三组:①赋形剂组:给予赋形剂,2次/d;②小剂量组:2 mg/cm2即160 mg/kg(总含药量15%),2次/d;③大剂量组:6 mg/cm2即480 mg/kg(总含药量45%),2次/d,按上述剂量涂抹。每周称体重1次,根据体重调整给药量,并观察动物的一般情况。给药28 d后,每组各取4只家兔及给药90 d后,每组各取6只家兔,雌雄各半,心脏采血检查血液学指标及血液生化学指标。实验结束后取重要脏器,称其湿重,计算脏器系数。
2.3 统计学方法 应用SPSS 16.0 软件包处理实验数据,各组实验数据以均数±标准差(x±s)表示,组间进行t检验,P 3.2.2 对家兔脏器系数的影响 给药28 d及90 d后,心、肝、肺、肾、脑、睾丸、子宫脏器系数统计与赋形剂组比较,未见显著性差异,恢复期也无明显影响。
3.2.3 对家兔血液学指标的影响 给药组给药28 d后血液学指标与赋形剂组比较,无明显差异;给药90 d后,小剂量PLT与赋形剂对照组比较,统计学有显著性差异,但根据其正常生理值,并结合大剂量组的值及病理报告显示此变化无生物学意义,是正常的生理波动,恢复期也无明显影响。
3.2.4 对家兔血液生化指标的影响 给药组给药28 d后生化指标与赋形剂组比较,无明显差异,恢复期也无明显影响。
4 讨论
高原护唇膏的急性毒性实验结果显示,用药后豚鼠采食、体重等均未见异常反应,无叫声异常、震颤、惊厥、流涎、流泪、流鼻涕、呼吸困难、腹泻等现象发生,解剖后也未发现心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、胃、十二指肠、前列腺、睾丸、卵巢各脏器异常,灌胃给予ICR小鼠后,测不出LD50,测得最大给药量浓度为1.5%,120 ml/kg。而家兔长期毒性实验结果显示,在本实验条件下:护唇膏大、小剂量组对家兔的一般情况、体重、饮食饮水、血液学、血液生化学、系统解剖和脏器系数均无明显影响,未发现长期毒性及中毒靶器官,恢复期亦无延迟性毒性反应,结果提示护唇膏皮肤给予3个月,家兔无毒反应剂量为6 mg/cm2即480 mg/kg。约为临床人用剂量的165倍。上述结果都足以说明高原护唇膏可安全使用。
高原护唇膏是针对高原地区特殊环境因素研制开发的,高原地区缺氧、干燥、寒冷、紫外线强度高,各种恶劣的环境会引发机体的各种生理机能改变,唇黏膜作为全身唯一的长期暴露在外的无角质层黏膜,抵御外界环境变化的能力较弱,直接受到各种恶劣环境的不良刺激后,所受损害最为明显。久住高原的官兵,唇部症状与季节有明显关系。冬季寒冷、多风、少雨雪,干燥发病率高,症状重,春秋次之。患者因局部疼痛和出血,给饮食及生活带来痛苦,难以保持足够军事活动能力。西藏地区位处号称世界屋脊的青藏高原,气候寒冷、紫外线强度高,唇炎的患病率(76.8%)明显高于低海拔地区[6],其中干燥脱屑型唇炎是主要患病类型(89.1%),临床表现为唇部干燥脱屑、皲裂,肿胀等,病程长,可反复发作。目前国内外尚没有针对唇炎的有效治疗方案。针对高原地区的气候特点,我们结合以往的研究经验和李朝斌等人[7,8]的治疗经验,开发出具有自主知识产权的具有修复、抗光辐射、滋养、保湿作用的防护产品-高原护唇膏。此产品在处方、剂型、临床应用等方面具有优越性,使用方便,能够减轻唇红及口角部黏膜干燥、脱屑、皲裂的症状,能加快唇炎的愈合,缩短唇炎治愈的时间,是高原地区驻军人员健康的有力保障。
参 考 文 献
[1] 韩英军,胡文才,向泽辉,等.西藏阿里官兵口腔疾病发病情况分析.武警医学,2001,12(3):178.
[2] 李咏梅,张志勇,肖佳尚,等. 慢性咽炎合剂长期毒性试验研究. 中国实用医药,2009,4(25):10-11.
[3] 胡琼力,陈宝田,崔桂梅,等.天麻镇眩颗粒毒理学实验研究. 浙江中医药大学学报,2008,32(1):96-99.
[4] 陈奇.中药药理研究方法学.人民卫生出版社,2006:107-108.
[5] 李新宇,高纪伟,徐兰芳,等.酞丁安乳膏在大鼠局部皮肤上的毒理实验.华西药学杂志,2009,24(2):168-170.
[6] 陈奇.中药药理研究方法学.人民卫生出版社,2006:110-114.
[7] 刘勇,王勤涛,李刚,等.西藏地区男性干燥脱屑性唇炎流行病学调查.临床口腔医学杂志,2007,5(23):308-310.
[8] 李朝斌,张西洲.多种维生素胶丸油液和高原护肤霜预防急性高原性唇炎的效果观察.高原医学杂志,1998,8(3):44-47.
