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【摘要】 目的 对斑秃患者外周血T淋巴细胞亚群及B细胞、NK细胞进行分析。方法 应用流式细胞仪检测44例斑秃患者及40例正常对照人群的外周血淋巴细胞亚群。结果 44例斑秃患者外周血中总T、TH细胞及TH /TS比值均明显低于正常对照组(P0.05)。结论 本研究结果提示斑秃患者外周血中T淋巴细胞亚群存在着明显的细胞紊乱和细胞免疫抑制。
【关键词】 斑秃;T淋巴细胞亚群;流式细胞仪
Study of peripheral blood T lymphocyte subpopulation in patients with alopecia areata
PEI Hong-li.
The Seventh People’s Hospital of Shenyang , Shenyang 110003 , China
【Abstract】 Objective Analyse the results Of peripheral blood T lymphocyte subpopulation, B cell and NK cell in patients with alopecia areata. Methods The lymphocyte in peripheral blood of 44 samples patients with alopecia areata and 40 samples with normal control were detected by flow cytometry. Results The results showed that the pan T, TH and radio of TH /TS were significantly lower (P0.05).Conclusion This study showed that the prominently cellrlar immunity change and suppressed in peripheral blood T lymphocyte subpopulation with alopecia areata.
【Key words】 Alopecia areata; T lymphocyte subpopulation; Flow cytometry
斑秃为一种突然发生的局限性斑片状脱发,可发生于身体任何部位。近年来的研究显示,斑秃的发病与免疫机制相关[1]。为了探讨斑秃患者外周血中淋巴细胞的变化,找出其淋巴细胞变化的规律,笔者对2009年1月~12月期间本院皮肤科44例斑秃患者和40例正常人的外周血中淋巴细胞采用流式细胞仪进行检测,并对结果进行统计分析,现将结果报告如下。
1 资料和方法
1.1 临床资料 实验组为皮肤科门诊斑秃患者共44例,包括男21例,女23例,均具备斑秃的典型临床表现,临床确诊为斑秃。患者年龄分布在7～60岁,平均28.2岁。对照组为40例健康体检者,其中男21例,女19例,平均年龄为30.4岁。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 抽取外周静脉血2ml,采用EDTA-K2抗凝。
1.2.2 仪器与试剂 仪器为美国BD(BectonDickinson)公司生产的FACSCalibur型流式细胞仪,采用双色组合标记抗体,对外周血中淋巴细胞亚群进行检测。荧光抗体分别为异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的鼠抗人CD�+�3的单克隆抗体和藻红素(phycoerythrin,PE)标记的鼠抗人CD�+19、CD�+�4、CD�+�8、CD�+16,CD�+56的单克隆抗体。相同荧光标记的同种型免疫球蛋白(IgG1/ IgG2)作为阴性对照。荧光抗体和溶血素均购自美国BD公司。
1.2.3 实验方法 ①分别取100 μl抗凝血标本加入5支试管中,依次加入20 μl双标记鼠抗人单克隆抗体(CD�3FITC/CD�4PE、CD�3FITC/CD19PE、CD�3FITC/CD�8PE、CD�3FITC/CD16,56PE),阴性对照加入荧光标记的同种型免疫球蛋白;②溶血:每管加入经过10倍稀释的1�FACS溶血素2 ml,室温避光放置10 min后1500 r/min离心5 min,弃上清;③每管加入2 ml的PBS缓冲液,1500 r/min 离心5m in,弃上清,然后加入0.5 mlPBS缓冲液混匀;④流式细胞仪检测,每管计数10000个细胞,记数荧光标记阳性的CD�+�3、CD�+19、CD�+�4、CD�+�8、CD�+16,�+56细胞,分别代表总T、B、TH、TS、NK细胞。
1.3 统计学方法 运用t检验及方差分析对检测结果进行统计学处理。
2 结果
44例斑秃患者和40例健康体检者的外周血淋巴细胞分群检测结果见表1。
结果显示44例斑秃患者外周血淋巴细胞中总T、TH细胞及TH//TS比值明显低于健康对照组,通过t检验统计分析后显示差异具有显著性(P0.05)。
3 讨论
现代医学对斑秃的病因和发病机制研究尚未完全明了,可能与遗传、情绪应激、内分泌失调、自身免疫等因素有关。有报道显示,斑秃是一种T细胞介导的自身免疫性疾病[2],因为其常与一种或多种自身免疫性疾病并发,如桥本甲状腺炎、白癜风等。机体正常免疫应答过程有赖于各种免疫细胞特别是T细胞亚群之间的相互协作或相互制约,以形成适度的免疫应答[3]。本文应用流式细胞仪检测了44例斑秃患者外周血淋巴细胞,并与40例健康对照人群相比较,结果显示斑秃患者外周血中总T、TH细胞明显低于对照组,而TS细胞却明显高于对照组,这与陈军生等报道一致[4]。由于TH细胞的减少,TS细胞明显升高,导致TH /TS比值显著低于对照组,说明TS细胞的异常增殖抑制了T细胞的增殖,而使总T细胞也相应减少。
综上所述,淋巴细胞中的TH和TS细胞在斑秃的发病中起着重要作用,斑秃患者外周血中T淋巴细胞亚群存在着紊乱,这提示斑秃的发病与T细胞介导的自身免疫密切相关。在对斑秃患者进行治疗时,若能加用一些能够调节机体细胞免疫功能的药物可能有利于患者细胞免疫功能失调的恢复,从而加速病情的好转,获得满意的疗效,此尚需进一步的探讨。
参 考 文 献
[1] 张学军.皮肤性病学.人民卫生出版社,2008:180-181.
[2] 陈丽芳,史维平,刘金华,等.斑秃患者皮损处T淋巴细胞表型的研究及Fas的表达.山西医药杂志,2005,34(1):9-11.
[3] 李美洲,高顺强,安娜,等.斑秃患者外周血T细胞亚群的测定.临床皮肤科杂志,2002,31(5):297-298.
[4] 陈军生,何洁冰,魏旷荣,等.斑秃患者血T淋巴细胞变化及其凋亡信号控制.中华医学美学美容杂志,2002,8(1):23-26.
