【www.zhangdahai.com--合同范本】
【摘要】 小儿泻速停颗粒临床用于治疗腹泻、腹痛、纳差，疗效确切，但原标准含量测定方法所用试药皮粉短缺，专属性差，为此，对该制剂中主要成份芍药苷的含量测定方法进行了研究。
【关键词】 小儿泻速停颗粒;芍药苷;含量；测定
小儿泻速停颗粒收载于卫生部药品标准［1］。系由地锦草、儿茶、乌梅、山楂(炒焦)、茯苓、白芍、甘草等药味经加工而成的颗粒剂，临床用于治疗腹泻、腹痛、纳差。疗效确切，使用方便。因原标准含量测定方法所用试药皮粉短缺，专属性差；且本产品为《中国药典》2000年版推荐品种，需修订质量标准。为此，本文对该制剂中主要成份芍药苷的含量测定方法进行了研究。结果表明，该方法与测定鞣质含量相比，分离度好，回收率高，专属性强，方法简便，适于该产品生产的质量控制。
1 仪器与药品
仪器：美国SP8810输液泵，SP8450紫外检测仪，SP4290积分仪。日本岛津UV-250紫外可见分光光度计。试剂及试药：甲醇：北京化工厂，色谱纯，聚酰胺(30-60目)：上海化学试剂站分装，其他试剂均为分析纯，对照品：芍药苷(含量测定用)：中国药品生物制品检定所，批号0736-9710。样品及缺芍药阴性对照样品均由河南省百泉制药厂提供。
2 方法与结果
2.1 色谱条件的选择
色谱柱：Sphereclone ODS c��18;流动相：甲醇-0.03 mol/L磷酸二氢钾(24�∶�76)；流速：1.2 ml/min，检测波长：231nm,柱温：室温［2］。进样量：10 μl。理论板数以芍药苷计算不低于4000；灵敏度：0.05AUFS。响应时间：1 s。在此条件下芍药苷能很好地被分离。对照品、样品、阴性对照品的色谱图分别见图1、2、3。
图1
对照品
图2 样品
图3 阴性对照
2.2 对照品溶液的制备
精密称取80℃干燥至恒重的芍药苷对照品适量,加水制成每1 ml中含芍药苷0.04 mg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取样品5 g，精密称定，置索氏提取器中，加醋酸乙酯-甲醇(1�∶�1)60 ml，浸泡3 h，90℃水浴回流提取3 h，提取液挥干，残渣加水10 ml溶解，转移至已处理好的聚酰胺柱(聚酰胺5 g，30~60目，水浸泡2 h，湿法装柱，柱径约1.1 cm，流速2 ml/min)上，用水洗脱，初洗脱液10 ml弃去，精密收集续洗脱液50 ml，作为供试品溶液。同法制成缺白芍的阴性对照液。
2.4 提取时间的选择
按2.3项下方法对样品的回流提取时间分别进行了2、3、4 h提取的比较，结果2 h含量为2.21 mg/5 g，较低，3 h含量为2.90 mg/5 g， 4 h含量为2.95 mg/5 g，故选择了3 h。
2.5 聚酰胺柱洗脱液的收集
我们采取分段收集的方法进行收集，每次收集5 ml，结果，前15 ml和51 ml以后的洗脱液用高效液相色谱仪检测，均无芍药苷吸收峰。故按2.3项下方法操作芍药苷能收集完全。
2.6 稳定性考察
同一批号供试液制备好后即进行测定，每间隔12 h测定一次，结果表明，芍药苷在24 h内测定结果稳定。
2.7 重复性试验
按上述供试品、对照品制备方法，精密称取同一批号(980502)样品5份进行含量测定，结果RSD=1.71%(n=5)。
2.8 精密度试验
精密吸取对照品溶液，进样10 μl，测定峰面积值，结果平均峰面积1488720，RSD=1.15%(n=6)。
2.9 回收率试验
采取加样回收法，取已知含量的样品(980502)适量，精密称定，加入等量的芍药苷对照品2 ml，进样10 μl，结果均值(％)为98.2，RSD(％)为1.87。
2.10 样品中芍药苷含量
取样品10批，按供试液制备方法制备，进样10 μl，测定，按外标法计算含量，结果分别为(mg/5 g)0.86、2.06、1.51、3.24、1.26。0.92、1.87、2.08、3.00、1.99。
3 讨论
3.1 以氯仿-甲醇(1�∶�1)为提取溶剂，可以减少糖和鞣质的干扰。本法测定样品中芍药苷的含量,方法简便、快速、准确，可作为该样品的含量控制方法。
3.2 采用样品直接提取方法制备供试液，干扰组分较多，故采用聚酰胺柱层析进行预处理，效果较好。
3.3 我们曾选用其他一些流动相：甲醇-水(40�∶�60)；甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾(35�∶�65)；甲醇-水(28�∶�72)。柠檬酸水溶液(0.005 mol/L)-异丙醇-甲醇(73�∶�2�∶�25)；甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾(28�∶�72)，分离效果均不好。本文选择的流动相分离效果好，保留时间短。
3.4 以流动相为溶剂，以空气为空白(与HLPC检测条件一致)，测得芍药苷的最大吸收波长为231nm，故以此作为吸收波长。
参 考 文 献
［1］ 卫生部药品标准.第八册.新药转正标准,1996.
［2］ 赵辉.高效液相色谱法测定任通注射液中芍药苷的含量.中草药,1995,26.
注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
