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[摘要] 目的 结合计划生育技术服务提供宫颈分泌物中沙眼衣原体(CT)、人乳头状瘤病毒(HPV)检测服务,了解农村妇女生殖道CT、HPV感染的情况。方法 采用聚合酶链反应(PCR)检测226例已婚农村妇女宫颈分泌物中CT、HPV DNA。结果226例检测对象中CT阳性检出率为21.2%,HPV阳性检出率为14.2%,CT及HPV均阳性检出率为4.0%。80%以上的CT、HPV感染者阴道、宫颈无临床症状表现。结论对有性生活,特别是生活在农村的妇女提供常规的宫颈涂片检查、CT和HPV检测服务,有助于提高农村妇女的生殖健康水平。
[关键词] 衣原体;人乳头状病毒;聚合酶链反应;生殖健康
[中图分类号] R797.2[文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2009)34-113-02
生殖道感染(reproductive track infection,RTI)在妇科疾病中位居首位。引起女性生殖道感染的常见病原体有淋球菌(neisseria gonorrhoeae,NG)、沙眼衣原体(chlamydia trachomatis,CT)、解脲脲原体(M. urealyticum,UU)、人乳头状瘤病毒(human papillo- mavirus,HPV)和人巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV),其中CT、HPV的感染和女性子宫颈癌的发生有关。有研究[1]显示,96.6%的子宫颈癌患者的标本中检出HPV,CT可与HPV协同诱发宫颈瘤变[2,3]。RTI感染综合防治是目前计划生育技术服务机构开展的一项生殖保健服务项目,利用现有的计划生育技术服务网络,结合计划生育技术服务,指导和开展妇女生殖道感染相关病原体检测服务,对提高妇女的生殖健康水平、维护妇女的健康权益尤为重要。
1材料与方法
1.1研究对象
2007年9月～2007年10月在提供计划生育技术服务的过程中,对年龄相近、文化程度、经济水平相似,居住同一地区的已婚妇女226人的宫颈分泌物进行CT及HPV DNA检测。
1.2研究方法
1.2.1标本处理宫颈分泌物棉拭子于1.5mL生理盐水中洗涤片刻,15000rpm离心10min,弃上清,沉淀中加入40μL裂解液和2μL 10mg/mL蛋白酶K,搅匀后45℃水浴作用1h,稍后离心再100℃沸水浴5min,最后10000rpm离心2min,上清液作为模板DNA待检。
1.2.2CT PCR检测方法在0.5mL无菌离心管中加入PCR反应混合物25μL,反应体系的终浓度为10mmol/L Tris-HCl (pH 8.3),50mmol/L KCl,0.01%明胶,0.1% TritonX-100,1.5mmol/L MgCl2,各200μmol/L的dNTPs,各2μmol/L引物T1、T2,再加入Taq DNA聚合酶1U,模板DNA 5μL,混匀后离心数秒,加无菌液体石蜡30μL,按下列程序扩增:94℃×3min预变性,94℃×60s-50℃×60s-72℃×60s,72℃×2min延伸,共35次循环。反应液中加入1μL溴酚蓝终止反应。
1.2.3CT测定向扩增产物中加入5μL上样液,混匀后取15μL加样于2%琼脂糖凝胶板上,60V恒压电泳30min后,在紫外光下可观察到一条517bp的清晰的DNA片段,即为阳性。
1.2.4HPV PCR检测方法在0.5mL无菌离心管中加入PCR反应混合物20μL,再加入Taq DNA聚合酶1U,模板DNA 4μL,混匀后离心数秒,加无菌液体石蜡40μL,按下列程序扩增:94℃×2min预变性,94℃×30s-55℃×30s-72℃×60s延伸,共35次循环。反应液中加入1μL溴酚蓝终止反应。
1.2.5HPV测定取15μL反应液,加样于2%琼脂糖凝胶板上,5V/cm,恒压电泳30min后,在紫外光下观察结果,如407~412bp处出现橙黄色条带,则HPV为阳性。HPV-6,11,33型阳性产物为407bp;HPV-16,18型阳性产物为412bp。
2结果
2.1研究对象基本情况
226例妇女平均年龄为(44.56±3.13)岁,初潮年龄为(16.70 ±1.83)岁,妊娠数为(1.77±0.80)次,活产数为(1.10±0.33)例,人流数为(0.63±0.76)次。
2.2CT及HPV检出率
受检者中CT阳性检出率为21.2%,HPV阳性检出率为14.2%,CT及HPV均阳性检出率为4.0%。
2.3CT、HPV阳性对象生殖健康状况
CT阳性对象中阴道异常的比例为8.3%,宫颈异常为12.5%;HPV阳性对象中阴道异常的比例为9.4%,宫颈异常的比例为18.8%。CT及HPV均阳性对象中阴道及宫颈异常的比例均为11.1%。见表1。
3讨论
泌尿生殖道CT感染是世界范围内最常见的性传播疾病之一,近年来CT感染率不断上升,在许多国家CT引发的STDs位居STD的首位,已超过了淋病和梅毒。在女性生殖道,CT感染多首发于宫颈,进而沿柱状上皮上行导致子宫内膜炎、输卵管炎、盆腔炎[4],反复持续感染造成盆腔粘连、输卵管积水、梗阻导致不孕。Bell报道[5],经阴道分娩及剖宫产,新生儿感染CT的阳性率为52.8%和25%,出现胎膜早破后,即使剖宫分娩,新生儿也有感染CT的风险。孕妇感染后,可导致绒毛膜羊膜炎、流产、早产、死胎和胎膜早破等不良妊娠结局[6,7]。CT生殖道感染潜伏期长,泌尿生殖系感染后l～3周才出现临床症状,而且约有50%的被感染男性和约70%的被感染女性不出现任何的临床表现。国内外报道一般女性生殖道CT的感染率在3.7%～23.19%,以16～20岁组最高,无症状者占6.06%～50.60%。孔栋玲[8]的研究表明受检者的CT感染率为18.65%,无症状占68.85%。
在自然人群中,HPV感染率从低于1%到高达50%,在性活跃人群中20%～80%以上的人有HPV感染史。HPV感染可发生于各种年龄,从初生的婴儿到80岁以上年龄者均有HPV感染的报道[9]。郭广洲等[10]对深圳某银行系统1276名女性员工共检出HPV阳性者94例,阳性率为7.37%,在被测的23个HPV亚型中,18个与宫颈癌密切相关的高危亚型HPV阳性率为6.35%,5个低危型HPV阳性率为1.02%。赵超等[11]对北京市795名20～54岁有性生活妇女进行筛查,高危型HPV感染阳性112例,占14.1%;阴性683例,占85.9%。子宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,也是发展中国家最常见的癌症。最近的全球资料显示,在全世界妇女中,每年的新发病例数近50万,其中80%病例发生在发展中国家。我国每年新发病例13.15万,约占世界宫颈癌新发病例的30%左右,近年来,宫颈癌的发病正呈现一种年轻化趋势。以往关于宫颈癌的研究提示发病与多种因素有关,如人乳头瘤病毒(HPV)感染、多产、初产年龄、性行为、经济状况、吸烟、长期使用口服避孕药等。另外的研究也证实CT能协同HPV诱发宫颈癌的发生[1]。
本资料是在提供计划生育技术服务的过程中,结合生殖道感染防治服务,对部分农村女性的宫颈分泌物进行CT及HPV的检测,研究对象中CT及高危HPV的检出率与其他报道相似,分别为21.2%及14.2%,说明江苏农村妇女生殖道CT与HPV的感染与其他地区的妇女感染相似。研究中也发现CT及HPV感染者中阴道及宫颈异常的比例较低,感染无症状者在阴道发现为异常的大于90%,宫颈未见异常的大于81%。由于CT、HPV感染危害性的存在,需要加强对CT、HPV阳性人群的实验室监测与随访,及早预防和减少因CT、HPV感染而致的疾病发生。因此,在计划生育日常随访服务中,卫生技术人员应该对有性生活妇女提供常规的实验室检查和临床观察,提高妇女的生殖健康水平,维护妇女的健康权益。
[参考文献]
[1] Munoz N,Bosch FX,De Sanjose S,et a1.Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer[J]. New Eng J Med,2003,348:518-527.
[2] Madeleine MM,Anttila T,Schwartz SM,et al.Risk of cervical cancer associated with Chlamydia trachomatis antibodies by histology.HPV type and HPV cofactors[J].Int J Cancer,2007,120(3):650-655.
[3] Bosch FX,de Sanjosé S. The epidemiology of human papillomavirus infection and cervical cancer[J]. Dis Markers,2007,23(4):213-217.
[4] 隗伏冰,濮德敏,卢运萍.生殖道沙眼衣原体感染与发生输卵管妊娠的关系[J]. 中华妇产科杂志,2000,35(2):113-114.
[5] Bell TA,Stature WE,Kuo CC,et al. Risk of perinatal transmission of chlamyida trachomatis by mode of delivery[J]. Jinfeet, 1994,29(5):165-169.
[6] Pint P,Islam MQ. Sexually transmitted diseases in the 1990s global epidemiology and challenges for control[J]. Sex Transm Dis,1994,2(1):7-13.
[7] 彭慧兰,曹来英,魏敏. 两种方法检测分娩期孕妇解脲支原体、沙眼衣原体宫内感染的分析[J]. 中国优生与遗传杂志,2005,13(3):56-58.
[8] 孔栋玲,任晨春. 天津地区育龄妇女生殖道沙眼衣原体感染状况探讨[J]. 天津医药,2007,35(11):862-863.
[9] 曹喜琴,杜海军,周玲. 人乳头瘤病毒感染的影响因素[J]. 国际病毒学杂志. 2006,13(4):104-107.
[10] 郭广洲,姜萍,张冰凌,等. 深圳白领女性HPV感染调查及其亚型分布[J]. 中国热带医学,2007,7(10):1775-1776.
[11] 赵超,李静,屠铮,等. 北京社区妇女生殖道人乳头瘤病毒感染及子宫颈上皮内瘤变流行病学调查[J]. 中华流行病学杂志,2007,28(10):947-950.
(收稿日期:2009-10-12)
