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陈娟娟 黄珠妹 陈昕
中国人民解放军陆军第七十三集团军医院口腔科，厦门 361003
口腔正畸主要是通过各种矫正装置调整患者颌面部、面部骨骼以及肌肉等，维持患者的咀嚼功能的同时平衡患者的口颌系统，作为临床上治疗牙齿畸形的主要治疗手段［1］。近年来，随着社会快速发展，人们的饮食结构发生了巨大的改变，因此牙列不齐以及拥挤等牙齿问题的发生越来越多［2］。而正畸治疗的效果主要取决于支抗的选择，因此选择好的支抗方法能够有利于患者正畸的治疗效果［3］。以往的传统治疗方法所选择的支抗方法不仅不易控制，患者容易感到不适，难以起到稳定的治疗作用，且不美观，因此治疗效果较差［4］。微型种植体技术主要是通过将微型螺钉植入体植入口腔以支撑口腔从而发挥治疗作用，这种支抗方法不仅能够加强患者的咀嚼功能，还能够恢复正常牙列关系，较为美观，目前正广泛应用于临床治疗中［5］。目前已有研究表明，在口腔正畸治疗中使用微型种植体支抗能够取得较为显著的治疗效果，并且可以有效降低患者术后感染的发生，具有较高的临床价值［6］。趋化因子CX3CL1能够促进破骨细胞的形成，导致牙槽骨吸收，从而加重患者的牙周病［7］。趋化因子 CXCL2、CCL4、CCL7 在牙周组织中具有关键作用，而恢复牙周组织的重生功能是正畸治疗效果的评判标准之一［8］。本研究探讨口腔正畸中微型种植体支抗对患者的影响，现报道如下。
1、一般资料
选取2021年1月至2022年5月于陆军第七十三集团军医院口腔科接受口腔正畸治疗的128 例患者进行回顾性分析。本研究通过陆军第七十三集团军医院医学伦理委员会批准。根据选用支抗不同分为观察组和对照组，每组64 例。对照组男 28 例，女 36 例，年龄 19～28（23.14±4.98）岁，开唇露齿 13 例，弓前突 51 例；
观察组男 32 例，女 32 例，年龄18～28（22.97±5.12）岁，开唇露齿 14 例，弓前突 50 例。两组患者的一般资料比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），具有可比性。（1）纳入标准：经X 线检查确诊，符合口腔正畸的诊断标准［9］；
口腔卫生良好；
无正畸治疗史；
无正畸禁忌证。（2）排除标准：同时合并有牙周炎、口腔黏膜炎等疾病；
对口腔植入材料过敏；
合并精神疾病，无法配合研究；
合并有牙外伤史；
妊娠以及哺乳期女性。
2、方法
（1）对照组采用口外弓加强支抗法。患者每天佩戴的时间应≥8 h，每侧牵引力为300 g。支抗的加力值取决于患者的牙齿移动情况，患者第1 个月每周复诊1 次，第2 个月起每月复诊1次，治疗1年［10］。（2）观察组采用微型种植体支抗技术。分开需要植入微型种植体的牙齿采用黄铜丝，采用利多卡因进行局部浸润麻醉，采用0.02%氯已定进行漱口；
对患者的植入部位进行标记，并详细检查患者牙根的形态以及位置，检查患者植入部位相邻的组织结构。微型种植体需要附着牙龈部位，同时切开患者的牙槽覆膜部位黏膜，以防止植入微型种植体时有软组织卷入。手术后患者需要服用抗生素以预防术后感染，并确定支抗与牙根的关系，拍摄牙尖片。微型种植体在治疗1 年后取出，叮嘱患者按时复诊，并且告知患者科学的口腔清洁方式以防止患者佩戴微型种植体期间发生感染［11-12］。
3、观察指标
3.1、比较两组治疗效果［13］由2 名口腔科专业医师对患者治疗后的牙龈健康情况、牙龈疼痛程度、牙龈邻接关系、颜色是否美观以及咬合舒适度等情况进行评估，以满分100 分的评分标准评价治疗效果，最终取2 名医师的均值作为该患者治疗效果的评分，以评分≥70分作为成功的标准。
3.2、比较两组的咀嚼效率［14］治疗后使患者均咀嚼5 g熟皮花生但是不吞咽，随后患者用漱口水漱口后吐出，收集患者吐出的漱口水并将其配置成1 L的蒸馏水液，并将其搅拌混匀后静置5 min，用刻度吸管吸取5 ml 的溶液，监测该溶液的吸光度，其度数即为咀嚼效率。
3.3、龈沟液趋化因子检测［15］采用常规滤纸条法取所有患者的龈沟液，将滤纸条放置于Eppendorf 管中，于电子天平称重，取样后将滤纸条加入原Eppendorf 管中称重，并记录龈沟液量。随后在管中加入200 μl磷酸盐缓冲液并振荡，1 h 后取出滤纸条，于-70 ℃的条件下保存，待测。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测趋化因子CX3CL1（ELISA 试剂盒由上海超验生物科技公司提供）。
3.4、实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测CXCL2、CCL4、CCL7 mRNA 水平［16-17］采用 RT-qPCR 检测趋化因子 CXCL2、CCL4、CCL7 的mRNA 水平。引物见表1。扩增体系为PCR反应包含2 μl cDNA、0.4 μl正向引物、0.4 μl反向引物、7.2 μl H2O2和10 μl SYBR；
扩增条件：95 ℃预变性15 min，95 ℃循环变性15 s，58 ℃退火15 s，72 ℃延伸30 s。采用2-ΔΔCt法计算表达mRNA 的水平，主要方法为先计算出每个样品内参基因的表达量ΔCt，再计算对照组中ΔCt的均值，用观察组每个样品的ΔCt 减去对照组的ΔCt 均值，得到ΔΔCt，采用2-ΔΔCt公式计算出观察组的表达量。
表1 进行实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）的引物及长度
3.5、比较两组的口腔菌群［18］治疗后，采用 PCR 分析患者龈下菌斑中的牙龈卟啉单胞菌（Pg）、具核梭杆菌（Fn）、福塞斯坦氏菌（Tf）、中间型普里沃菌（Pi）。首先从牙周袋最底部采用无菌刮治器刮取龈下菌斑，将其溶解于磷酸缓冲盐溶液中充分混匀，以4 ℃12 000×g的条件离心15 min，弃去上清液，在-80 ℃保存备用。采用酚氯仿提取菌斑总DNA，于-20 ℃条件下冻存。由上海生工生物工程有限公司合成Pg、Fn、Tf以及Pi的特异性扩增引物。PCR反应体系的反应条件为：95 ℃预变性3 min，95 ℃变性45 s，55 ℃退火60 s，72 ℃延伸 90 s，共 35 个循环，72 ℃延伸 10 min。PCR扩增在PCR 扩增仪（型号：eppendorf5331，生产厂家：上海奥陆生物科技有限公司）上完成。
4、统计学方法
计数资料以例（%）表示，组间比较采用χ2检验，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（）表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
1、两组患者的治疗效果和咀嚼效率比较
观察组患者的治疗成功率、咀嚼效率均高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），具体见表2。
表2 两组口腔正畸治疗患者治疗后治疗效果和咀嚼效率比较
2、两组患者治疗前、治疗后1、4 周的龈沟液趋化因子比较
表3 结果显示，观察组治疗前的CX3CL1、CXCL2、CCL4、CCL7 mRNA 水平与对照组比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）；
而观察组治疗后 1 周、4 周的 CX3CL1、CXCL2、CCL4、CCL7 mRNA 水平与对照组比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），且治疗4 周后的 CX3CL1、CXCL2、CCL4、CCL7 mRNA 水平与治疗1 周后的水平比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。
表3 两组口腔正畸治疗患者治疗前后龈沟液趋化因子水平比较（pg/nl，）
表3 两组口腔正畸治疗患者治疗前后龈沟液趋化因子水平比较（pg/nl，）
注：观察组采用微型种植体支抗技术，对照组采用口外弓加强支抗正畸法；
与同组治疗前比较，aP＜0.05；
与同组治疗后1 周比较，bP＜0.05
P值0.136＜0.001 0.023 0.161＜0.001＜0.001 0.678＜0.001＜0.001 0.456＜0.001＜0.001指标CX3CL1 CXCL2 CCL4 CCL7时间治疗前治疗后1周治疗后4周治疗前治疗后1周治疗后4周治疗前治疗后1周治疗后4周治疗前治疗后1周治疗后4周观察组（64例）21.53±3.41 35.13±9.75a 37.63±10.14ab 1.07±0.17 1.87±0.13a 2.23±0.22ab 1.12±0.12 1.87±0.23a 2.36±0.32ab 1.16±0.13 1.69±0.32a 2.35±0.42ab对照组（64例）22.44±3.45 27.26±6.71a 33.56±9.87ab 1.03±0.15 1.26±0.12a 1.45±0.16ab 1.13±0.15 1.36±0.17a 1.74±0.18ab 1.14±0.17 1.46±0.11a 1.61±0.21ab t值1.501 5.319 2.301 1.412 27.583 22.939 0.417 14.235 13.509 0.748 5.438 12.607
3、两组患者龈下致病菌检出率比较
两组患者的龈下菌斑中均检出 Pg、Fn、Tf、Pi 4 种常见的龈下致病斑，且观察组的Tf 的检出率明显高于对照组（P＜0.05），具体见表4。
表4 两组口腔正畸治疗患者4种龈下致病菌的检出情况比较[例（%）]
随着我国社会经济的发展以及人们物质水平的提升，越来越多人更注重其口腔的美观度，此外，牙颌面畸形还是导致成年人牙齿丧失的主要原因，危害人类的牙齿以及健康［19］。正畸治疗正是临床上有效治疗患者牙齿畸形的方法之一，其治疗主要是通过使用矫正装置对牙齿加压来进行，其中，支抗设计正是口腔畸形治疗的重要环节，稳定的支抗是支撑整个正畸过程的重要基础［20］。其中，微型种植体支抗以其舒适性好、稳定性强以及创伤小的优点，被广泛应用于临床治疗中。有研究显示，微型种植体支抗的矫治效果是其他常规方法所难以实现的，并且可以很好地避免牙齿移动的影响，能够将矫治力的反作用施加颌骨上，使得治疗过程中能够施加较大的正畸力而不会让患者感到不适［21-22］。本研究结果显示观察组的治疗效果以及咀嚼效率均显著高于对照组。
正畸治疗主要是通过调节破骨细胞和成骨细胞的水平，促进自身基质的降解和重建，进而调控牙槽骨的吸收和沉积实现的。而趋化因子CX3CL1 具有黏附以及趋化的双重作用，不仅可以介导细胞间的黏附，还能够诱导白细胞的黏附、迁徙，发挥趋化因子的作用，引起机体的免疫损伤。本研究结果显示采用微型种植体支抗技术治疗患者的CX3CL1 表达水平显著高于对照组，并且治疗后的CX3CL1 的表达水平也较治疗前有所上升，可能原因为CX3CLA 能够在成骨细胞诱导的破骨细胞分化中发挥重要作用，即CX3CLA 能够调控破骨细胞黏附，还能够诱导破骨前体细胞在骨髓中的迁移［23］。CX3CL1 作为 CX3CR1 的特异性受体，CX3CL1-、CX3CR1 能够维持破骨前体细胞的聚集，加快骨吸收作用，且不诱导破骨细胞分化导致的。CXCL2 作为趋化因子能够促进骨重塑反应，且在正畸力的作 用下会出现 高 表达的现象［24］。Guo 等［25］研究表 明 ，CCL4 能够有助于抗痛觉过敏作用，并且能够在牙周愈合的过程中起到血管重建的作用。CCL7 作为一种小细胞因子，在单核细胞和巨噬细胞的迁移过程中有诱导作用，对组织再生具有重要作用［26］。本研究结果显示治疗后两组患者的CXCL1、CCL4、CCL7 mRNA 表达水平均上升，且观察组均明显高于对照组。可见，采用微型种植体支抗技术进行正畸治疗不仅能够促进骨吸收，还能够提高牙周组织再生能力，减轻患者的疼痛。
牙周致病菌是正常菌群的组成成分之一，然而随着细菌附着能力的增强，其分泌的毒素也会增多，导致炎症的发生以及发展［27］。矫治器的佩戴方式对口腔清洁程度具有一定的影响，若不注意佩戴方式，则会导致患者口腔菌群的生态平衡被打破，使得口腔滋生大量细菌引起牙周炎症的发生［28］。其中Pg、Fn、Tf 以及Pi 均是出现频率较高的致病菌，能黏附在牙周组织上，产生毒性因子从而促进炎症的发生，破坏牙周组织［29-30］。本试验结果显示，两组患者的Pg、Fn以及Pi 致病菌的检出率差异均无统计学意义，而观察组Tf 致病菌的检出率明显高于对照组，提示两种治疗方法可能导致龈下致病菌种类的差异。
综上所述，口腔正畸治疗中采用微型种植体支抗技术能够有效地改善牙周指标，提高治疗效果，并且降低患者的炎症因子，并且促进牙周组织的再生，减少龈下致病菌的种类，值得临床进行推广。
利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突
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