【www.zhangdahai.com--班子述职报告】
【摘要】目的检测孕妇产前IgG抗A/B抗体效价,探讨孕妇产前不规则抗体筛查在新生儿溶血病预防中的意义。方法对317例夫妻血型不合的孕妇进行产前抗A/BIgG抗体效价测定,并对IgG类抗A/B效价≥1:64的孕妇给予临床干预,观察产后婴儿是否发生溶血,溶血出现的时间及程度;同时随机选择317例夫妻血型不合,产前未做不规则抗体筛查的产妇,调查其婴儿是否发生溶血,溶血出现的时间及程度。结果①试验组,新生儿溶血发生13例(4.10%),其中24h内发生者1例,48h发生者3例,72h发生者3例,>72h发生者6例;对照组,新生儿溶血发生49例(15.46%),其中24h内发生者14例,48h发生者17例,72h发生者15例,>72h发生者3例;两组比较有统计学意义(P220.6μmol/L,早产儿>256.5μmol/L对,2周后仍持续不退者。
1.2仪器与试剂离心机KA2200型(KUBOTA公司);XW80A漩涡混合器(上海精科实业有限公司)。0.2mol/L羟基乙醇(2Me)应用液;广谱抗人球蛋白、标准红细胞、抗A/B抗体(上海血液生物医药有限公司)
1.3血液标本制备
1.3.1采血夫妻/各采自凝血4ml,抗凝血2ml(与抗凝剂充分混匀)。
1.3.2血清制备子凝血37℃孵育45~60min,离心备用。
1.3.3红细胞制备抗凝血生理盐水洗涤3次,配成3~5%的红细胞悬液
1.4酶处理红细胞(木瓜凝乳蛋白酶)①酶溶液2ml、抑制剂2ml、A细胞悬液1ml、B细胞悬液1ml,37℃孵育10min;②A、B细胞悬液分别加入等量的酶液(1ml),37℃酶处理5min,加抑制剂终止反应;③生理盐水洗涤3遍,制备3~5%酶处理红细胞悬液备用。
1.5ABO血型及Rh血型检测[2]
1.5.1ABO血型定型①纸板法正定型:标记的纸板上分别滴1滴抗A、抗B试剂,各滴加1滴受检者红细胞,把红细胞和试剂充分混合,慢慢倾斜2min。结果分析:凝集则为阳性。(对结果有怀疑,应用试管法重新试验);反定型:标记的纸板上分别滴加2滴A、B细胞,各加入1滴受检者血清,观察凝集情况;②试管法取两只试管并做标记,分别滴加1滴抗A、B试剂,各加入1滴受检者红细胞悬液,3400r/min离心1min,观察凝集。
1.5.2Rh血型定型纸板法:标记的纸板上滴加抗D(IgG/IgM)2滴,加入受检者红细胞悬液1滴,检查凝集情况,凝集则为阳性。
1.6不规则抗体检测应用凝聚胺法(Ploybrene)。取3支试管,分别加2滴孕妇血清,1滴筛选分型细胞(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ),然后加入700μml低离子介质,2滴polybrene;3400r/min离心1min,倾去上清,观察都应凝集,分别加入2滴重悬液,轻轻晃动观察结果,若有凝集,则为不规则抗体阳性。如孕妇为Rh阴性血还应用抗人球蛋白检测不规则抗体。
1.7血清中IgG抗A/B效价测定①材料:孕妇血清、2mol/L羟基乙醇应用液、酶处理红细胞、抗人球蛋白;②酶法测定IgG抗A/B效价:50μml孕妇血清+50μml2Me应用液,封口膜封闭,37℃孵育15min;加入700μml生理盐水(1:16稀释);取100μml倍比稀释4管(1:32,64,128,256);加入1滴相应酶处理红细胞A/B,37℃孵育7min;3400r/min离心1min观察结果,以效价≥1:64为阳性。如妻“O”型,夫“AB”型,要做IgG抗A和抗B两个效价测定,夫妻血型相符者不用做IgG抗A/B效价测定。
1.8临床干预措施由各医院相关大夫给予适当的临床干预措施。
1.9新生儿溶血病发生情况由专人调查、记录,包括发病例数、黄疸出现时间、血清总胆红素(BT)浓度。
1.10统计学方法采用SPSS13.0统计软件包处理,采用χ2检验,以P
