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【摘要】 树突状细胞(dendritic cell,DC)是已知的效能最强的抗原呈递细胞(antigen presenting cells,APC)，可有效的刺激幼稚T细胞活化和诱导特异的抗原免疫反应，从而将先天和获得性免疫有机联系在一起，是免疫反应的始动者。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIK)是由IL-2、IFN-γ和CD3单克隆抗体等诱导而成的对多种肿瘤细胞具有杀伤活性的细胞毒性T淋巴细胞，其溶瘤活性具有非MHC限制性。
【关键词】 树突状细胞；细胞因子诱导的杀伤细胞；肿瘤疫苗；免疫治疗
1973年Steinman和Cohn首次发现DC，因其表面的指状突起称其为树突状细胞。DC已被证明是目前发现的功能最强大的APC。它可有效的诱导静止T细胞增值和应答，促进细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes，CTL)和辅助性T淋巴细胞的生成，是机体免疫反应的启动者和参与者[1]。CIK细胞是人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子与CD3 mAb共同培养后获得的一群异质细胞[2]。CIK 具有T 淋巴细胞的抗肿瘤活性和N K细胞的非MHC 限制性杀瘤活性。将具有高效杀伤活性的CIK细胞和具有强大肿瘤抗原递呈能力的DC联合应用于治疗恶性肿瘤，有助于解除肿瘤患者T细胞免疫无能，起到抗肿瘤作用[3]。
1 DC在抗肿瘤中的作用
骨髓中的DC前体细胞释放至外周血后迁移到外周非淋巴组织，具有很强的抗原摄取能力，能有效的捕获、加工内源性和外源性抗原，在此过程中DC的表面标志及功能发生改变，共刺激分子CD80、CD86等表达水平增高，捕获抗原的能力降低，抗原提呈能力明显增强，成为成熟DC。成熟DC高表达MHCⅠ、MHCⅡ类分子，分别与捕获加工的内源和外源性抗原结合形成抗原肽复合物，在DC表面表达，提呈给T细胞，共刺激分子与其配体结合，为T细胞的活化提供第二信号，并与T细胞受体接受的抗原第一信号共同作用，刺激T细胞活化，从而启动CTL反应和CD4+Th1反应[4]。
肿瘤的发生与DC数量的减少和功能的缺陷关系密切。2005年Yilmaz T等[5]发现，患者体内的DC数量与肿瘤的临床分期及周围浸润呈负相关。主要原因在于：肿瘤细胞直接接触DC抑制其成熟；肿瘤细胞释放多种影响DC成熟和功能的细胞因子，如VEGF、IL-10等；肿瘤细胞的免疫原性减弱，MHC类分子表达异常，DC缺乏共刺激因子的表达，致使T细胞不能被激活，最终导致了免疫耐受和肿瘤免疫逃逸。
2 DC的培养及疫苗类型
当前多用外周血单核细胞在GM-CSF和IL-4等诱导培养成为具有抗肿瘤作用的成熟DC。Dauer M等[6]报道，用常规细胞因子组合培养外周血CD14+细胞，48 h后便可成功获得成熟DC。此法获得的DC与常规方法所得到的DC具有同样的形态学特点，免疫表型分子的表达百分率相似，且缩短了培养时间，减少了培养体系污染几率，并避免反复冻存对细胞的影响，同时减少费用，具有未来研究和治疗应用的使用价值[7]。
目前在临床应用的DC疫苗主要有：①肿瘤全细胞抗原负载的DC疫苗，用肿瘤细胞裂解物、凋亡肿瘤细胞及活细胞等方法，使DC负载多价肿瘤抗原，避免了呈递单一抗原导致的免疫逃逸，但是此法有诱发自身免疫性疾病的危险；②肿瘤抗原肽负载的DC疫苗，能诱导具有肿瘤抗原特异性性的免疫反应；③肿瘤细胞RNA、DNA负载的DC疫苗，可持续的将肿瘤抗原表位表达于DC表面，有效的激活T细胞产生抗肿瘤效应。但目前已知的抗原决定簇不多，使得临床应用受到了限制；④DC与CIK细胞联合应用，2005年张锦英等[8]研究抗原负载的DC联合CIK治疗晚期胃癌的结果显示，患者症状明显减轻，机体免疫功能得到了改善，且无明显的不良反应，进一步证实了DC与CIK联合应用的临床意义。
3 CIK的生物特性
Schmidt-wolf等[9]于1991年首次发现在外周血淋巴细胞(PBL)中加入IFN-γ、IL-2和CD3 mAb，可培养出大量CD3和CD56双阳性T细胞，是非MHC限制性细胞毒性淋巴细胞[10]，兼具有T淋巴细胞的抗肿瘤活性和NK细胞的非限制性杀瘤活性，称其为CIK。
T细胞可分为Thl和Th2类细胞，Thl类细胞因子的主要作用为增强机体的细胞免疫功能，Th2类细胞因子则主要对体液免疫起作用[11]。CIK细胞经培养后可分泌大量的Thl类细胞因子[12]，如IL-2， IFN-γ及IL-12，可调节体内其他细胞因子的分泌以促进肿瘤细胞对CIK杀伤作用的敏感性；CIK可通过上调肿瘤细胞的MHC分子及共刺激分子的表达，激活肿瘤特异性CTL、自然杀伤细胞等，起到间接杀瘤作用。CIK还参与肿瘤细胞的凋亡，Cooper等[13]的研究显示，培养的CIK细胞表面表达的Fas-L(fas配体)与相应肿瘤细胞识别结合后，可激活细胞内源性DNA内切酶，从而起到杀瘤作用。
4 DC与CIK联合应用
DC和CIK是肿瘤免疫治疗的两个重要部分，前者识别抗原、激活获得性免疫系统，后者通过发挥自身细胞毒性和分泌细胞因子杀伤肿瘤细胞，二者联合确保了一个高效和谐的免疫体系。Jomantaite等在活体研究中发现，CIK能使小鼠肝脏中DC增殖3到4倍[14]。很多研究表明，DC和CIK共同培养后具有更强的肿瘤杀伤活性，杀瘤谱更广，并且还能在低效靶比条件下清除肿瘤细胞。2006年孟凡东等[15]的研究显示，DC和CIK共同培养能促使DC成熟，高表达共刺激因子和抗原提呈分子，更有效的向T淋巴细胞提呈抗原，提供T细胞激活所须的第二信号；同时分泌更多的IL-12，增强机体的抗肿瘤免疫应答。DC与CIK共同培养既激活了抗原负载DC介导的MHC限制性细胞毒性作用，又发挥了CIK细胞的非MHC限制性细胞毒作用，增加了对肿瘤细胞的杀伤作用，为肿瘤免疫治疗提供更多的效应细胞，对肿瘤临床治疗有重要意义。
5 问题与展望
DC和CIK在抗肿瘤治疗中具有广泛的应用前景。目前，CIK联合DC治疗恶性肿瘤的临床实例还不多，确切疗效需要进一步评价，CIK细胞的抗肿瘤作用机制有待于深入研究。如何使输注的效应细胞特异性地到达靶部位及如何使其穿越肿瘤细胞周围的重重屏障而保证数量、功效不衰减等问题尚待解决。继续探讨DC、CIK增殖影响因素、体内分布情况及临床适应证等，将有助于该疗法的成熟和完备。
参考文献
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