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[摘要] 目的 比较4种方法（电泳法、wHPLC、MCV法、一管法）筛查Hb病的检出效能及其准确性，为临床寻求一种较理想的筛查方法，提高实验诊断率。 方法 选择2007-2008年间在我中心进行婚检、孕检、产检及体检标本9203例，同时采用电泳法、wHPLC（弱阳离子交换色谱法）、MCV法(平均红细胞体积测定)、红细胞脆性实验（一管法）进行检测，对1523例疑为Hb病筛查实验结果进行回顾性分析。 结果 4种方法筛查Hb病的检出率分别为16.5%、16.5%、16.8%、8.3%。准确率分别为90%、92%、96%、52%，4种筛查方法检出率及准确率经统计学分析，差异有统计学意义（P 1.2试剂：PH8.6琼脂凝胶试剂由美国Helena公司提供；wHPLC（弱阳离子交换色谱法）由美国堪萨斯primus提供。地中海贫血基因试剂使用深圳益生堂生物公司及亚能公司生产的基因诊断试剂盒。红细胞渗透脆性试验试剂(一管法),由广州米基公司提供。
1.3仪器：美国Helena全自动快速电泳系统（SPIFE）、美国PRIMUS CLC385System- HPLC、贝克曼COULTER全自动血球分析仪，CB171半自动生化仪。
1.4方法：
1.4.1EDTA-K2抗凝血2.0ml，采用贝克曼COULTER全自动血细胞分析仪作血常规分析，同时作质控检测。
1.4.2Hb成份分析：EDTA-K2抗凝血2 ml，AFSA2 HEMO CONTROLCat.No.5330
Lot No：3-07-5330 Exp.Date：10/08采用美国Helena公司全自动快速电泳系统（SPIFE），于pH 8.6琼脂糖凝胶电泳，在碱性条件下琼脂凝胶，可分离出各种Hb区带,进行定性或定量检测各种Hb区带，同时进行Heinz小体试验（主要用于a地贫的鉴别）。
1.4.3弱阳离子交换色谱法-HPLC：2.7 ml全血加入含0.3 ml EDTA-K2试管或柠檬酸盐缓冲液中，HEMOGLOBINA2，F CONTROLS，Level I Low A2，High F，Level II High A2，Low F，Cat.No .01-04-0043，样本直接上机或稀释后上机均可同时进行。使用Primus CLC 385机型及Primus公司地贫试剂盒（可同时检测α和βThal），在该系统检测中有三套程序供选用：Quick Scan ( 5.5 min )、High Resolution (10.5 min ) 或Quick reflex (先作quick scan，若有不正常的则自动reflex作High resolution)。原始数据自动储存并同时打印色谱报告。实验操作完全按照仪器使用说明。
1.4.4红细胞渗透脆性试验（一管法）：严格按照试剂说明书进行操作，正常值为溶血百分率＞60%，如果＜60%可判定为脆性阳性。
1.4.5 Thal基因检测：GAP-PCR检测3种常见的缺失型α- Thal基因（--SEA、-a3.7与-a4.2），试剂由亚能公司提供，采用PCR结合反向点杂交法检测β-珠蛋白基因17个位点的18种突变，试剂由深圳益生堂生物公司提供。
1.4.6 判断标准：根据《血液病诊断及疗效标准》［9］,电泳法结果诊断α-Thal时, HbA2临界值为≤2.5%, 诊断β-Thal时, HbA2临界值为≥3.5%; wHPLC结果诊断α-Thal为≤2.1%，β-Thal为≥3.0%(wHPLC参考值为本室自建中国正常成人参考范围)，以基因结果为金标准。
1.4.7统计学处理：统计学分析结果采用χ2检验。
2. 结果
2.1 2007年12月至2008年6月共对9203例标本进行HB病筛查, 结果异常1523例, 用4种方法筛查(α, β-Thal, Variant Hb)检出结果: 电泳法分别为9.7%、6.2% 、0.66%，wHPLC（弱阳离子交换色谱法）为9.6%、6.2% 、0.63%，MCV法为10.3%、6.2% 、0.26%，红细胞脆性实验（一管法）为4.5%、3.7% 、0。后者与前三者存在差异有统计学意义（P0.05)无显著性差异。
3．讨论
3.1血红蛋白病的理想诊断方法是做蛋白的结构分析，检出氨基酸变异的性质及位置,可此项技术在国内未普遍开展，仅用pH8.6 TEB醋酸纤维薄膜琼脂糖凝胶电泳，部分需用等电聚焦，聚丙烯酰凝胶电泳或HPLC等技术(国外已普遍应用)。异常血红蛋白病是一种遗传性的珠蛋白链分子结构异常，HB电泳是检测异常Hb最常用的方法，但是本法只能对异常Hb位置初略定位，不能将其分到具体的变异名。而wHPLC根据出峰时间能很好定位出变异名（eg：G-Chinese，Q-Tailand，J-Bangkok,等）。尽管MCV法有很好的敏感性，但只对部分变异HBE敏感，所以筛查变异Hb最好的方法还是Hb电泳及wHPLC验证。
3.2地贫基因携带者通常表现为小细胞低色素血症，若MCV
