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[摘要] 目的 观察依达拉奉液对心肺复苏后家兔的脑保护作用。方法 将30只家兔随机分为生理盐水组（N组）、小剂量依达拉奉组（L组）、大剂量依达拉奉组（H组），每组10只。建立心肺脑复苏模型后，从耳缘静脉泵入以 0，1，3mg/（kg・h）依达拉奉液，于30min、2h、4h检测血清SOD、MDA。结果 与生理盐水组比较，H、L两组血清SOD显著升高、MDA值显著下降；与L组相比，H组SOD也显著升高，MDA也显著降低。结论 依达拉奉液对心肺复苏后家兔脑有显著的保护作用，呈剂量依赖性。
[关键词] 依达拉奉； 心肺复苏； 脑保护； MDA； SOD
[中图分类号] R541.78 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2009）13-38-02
The Brain Protective Effect of Different Dose Edaravone by Ear Intravenous Injection in CPR Rabbits
LIU Lin1 CAO Huanjun1 ZHANG Chengming1，2
1.Department of Anesthesiology，Weifang Medical College；2.The Department of Anesthesia，Weifang Medical College Affiliated Hospital，Shandong 261042
[Abstract] ObjectiveTo investigate the effect of edaravone on brain in the rabbits by cardiopulmonary resuscitation. Methods30 rabbits were randomly divided into three groups：NS，low-dose edaravone-treated and high-dose edaravone-treated groups. Each group had 10 animals. The contents of SOD and MDA in serum were assessed 30min，2h，4h after the cardiopulmonary cerebral models were established. ResultsCompared with the NS group，serum SOD in edaravone groups were significantly higher，but serum MDA in edaravone groups were significantly lower；Compared with group S，the serum SOD in group H was significantly higher，serum MDA of group H was significantly lower. ConclusionEdaravone has protective effect on brain in the rabbits after cardiopulmonary resuscitation，especially the high dose.
[Key Words]Edaravone； Cardiopulmonary resuscitation； Brain protection； MDA； SOD
心肺复苏是危重疾病的抢救和治疗过程中经常遇到的问题，复苏成功后由于长时间的缺血缺氧，脑组织可能造成不同程度的损伤。目前认为缺血再灌注后氧自由基增多是导致脑损伤加重的主要原因[1]，而超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）等是反映氧自由基水平的主要观察指标。依达拉奉（3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮）是新一类羟自由基清除剂，临床上主要用于脑梗死的治疗。各项实验研究证实，依达拉奉对缺血性脑损伤有保护作用[2，3]，能改善缺血性脑损伤患者神经功能的预后。本实验拟通过检测家兔血清SOD、MDA水平的变化，旨在评价不同剂量的依达拉奉液对心肺复苏后家兔脑组织的保护作用，为临床提供参考。
1 材料与方法
1.1 试剂与器材
（1）主要试剂：超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）；丙二醛（MDA）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
（2）仪器：微量注射器（宁波市三爱仪器厂）；4°离心机（上海安亭科学仪器厂）；722s分光光度计（上海精科公司）；DW-2000动物呼吸机（上海嘉鹏科技有限公司）；PM- 9000便携式多参数监护仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）。
1.2 实验动物及分组
5月龄健康家兔30只，雌雄不拘，体重（2.50±0.30）kg，由潍坊医学院实验动物中心提供。实验动物用随机数字表法分为3组：生理盐水组（N组）、小剂量依达拉奉组（L组）、大剂量依达拉奉组（H组），每组10只。
1.3 方法
1.3.1 动物模型制作 心肺脑复苏动物模型的制作参照文献[4，5]进行。实验前禁食12h，耳缘静脉推注氯胺酮10mg/kg诱导，氯胺酮100mg加入250mL林格氏液内静脉输注维持麻醉，保持家兔肢体无体动，呼吸、心率平稳。环甲膜做T形切口，插入气管导管，接上动物呼吸机行机械通气。分离胸前皮肤，打开胸腔，暴露心脏。直流电约20mA，正极在右心房，负极在左心室，行电刺激诱发室颤，直至有创血压低于30mmHg，维持5min。手法心肺复苏，直至有创血压高于60mmHg，且能稳定维持为复苏成功。另从右侧耳缘静脉泵入相应干预药物。
1.3.2 给药剂量 本实验采用2种给药剂量，即耳缘静脉持续泵入依达拉奉液（由江苏先声药业有限公司提供）1mg/（kg・h）， 3mg/（kg・h），对照组给予适量生理盐水。
1.3.3 血清SOD、MDA含量测定 复苏后30min、2h、4h分别抽取左侧颈静脉血液3mL，6h内离心（3000r/min）15min后弃去下层，取上层血清测定SOD、MDA含量。血清SOD含量测定采用黄嘌呤氧化酶法。血清MDA含量测定采用硫代巴比妥酸法。以上严格按照试剂盒说明书操作。
1.4 统计学处理
所测数据以均数±标准差（χ±s）表示，采用SPSS13.0分析系统对定量数据进行组间t检验，以P＜0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 血清SOD含量比较
与N组比较，H组血清SOD含量明显升高，差异有显著性（P＜0.05）；L组SOD含量开始升高不明显，但随着时间的延长也显著升高。与L组比较，H组血清SOD含量明显升高（表1）。
2.2 血清MDA含量比较
与N组比较，L组与H组血清MDA含量开始虽然降低，但差异无显著（P＞0.05）。随着时间的增加，H组血清MDA含量明显降低，差异有显著性（P＜0.05），L组MDA含量也显著降低（P＜0.05）。与L组比较，H组血清MDA含量明显降低（表2）。
3 讨论
心肺复苏后引起的一系列病理生理变化均可导致复苏后全身性炎症反应综合征，继而发生多脏器功能障碍综合征，直接影响着复苏的预后。脑组织较其他脏器更易遭受缺血缺氧性损害，复苏后存在脑损伤、脑缺血缺氧等病理情况以及体内酶系统保护作用减弱，氧自由基生成过多。脑内产生的大量氧自由基通过脂质过氧化作用及与膜蛋白的反应造成脑细胞、血脑屏障的过氧损伤，导致细胞毒性、血管源性脑水肿，加剧脑的继发性损害。
监测血清SOD、MDA水平对研究心肺脑复苏后缺血缺氧情况有重要意义。SOD作为内源性氧自由基清除剂的代表，其活力在一定程度上反映了内源性氧自由基的清除活力，大量SOD对缺氧缺血性脑损伤有明显保护作用[6]。MDA是自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的代谢产物，代表氧自由基的含量，测定MDA含量可以反映出组织含有氧自由基的多少[7]。本实验结果显示：H组血清SOD含量明显升高，L组血清SOD含量升高不如H组明显，说明大剂量依达拉奉治疗产生的大量SOD对心肺复苏后的脑保护作用显著。依达拉奉治疗后血清MDA含量明显降低，说明氧自由基含量明显减少，从而减轻脑损伤。
依达拉奉是亲脂性基团，对血脑屏障的通透率为60%。作为一种新型自由基清除剂，它通过提供一个电子给自由基，从而清除体内活性氧分子，抑制脂质过氧化[8]，同时也保护血管内皮细胞，抑制迟发性神经细胞死亡，从而减轻神经细胞损伤[9]。
目前依达拉奉已广泛用于临床治疗缺血性脑血管病，通过清除自由基，抑制黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤氧化酶的活性，降低羟自由基的浓度，减轻脑损伤，对缺血的脑组织发挥神经保护作用。结果证实，心肺复苏后静脉注射依达拉奉液对心肺复苏后家兔有一定脑保护作用，且呈剂量依赖关系，为其在心肺复苏后对患者临床治疗中的应用提供了理论依据。
[参考文献]
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[9] Zhang N，Komine-Kobayashi M，Tanaka R，et al. Edaravone reduces early accumulation of oxidative products and sequential inflammatory responses after transient focal ischemia in mice brain[J]. Stroke，2005，36：2220- 2225.
（收稿日期：2009-01-14）
