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[摘要] 目的 比较注射用伏立康唑及其辅料对小鼠静脉注射的急性毒性，初步确认主要毒性成分和毒性靶器官。方法 注射用伏立康唑采用半数致死量（LD50）试验，70只ICR小鼠随机分为7组，分别静脉给予274、247、222、200、180和162mg/kg伏立康唑及等体积葡萄糖溶液；空白辅料采用最大给药量（MLD）试验，40只ICR小鼠随机分为两组，分别静脉给予5000mg/kg空白辅料和等体积葡萄糖溶液。观察小鼠中毒症状和死亡情况，并取脏器做病理检验。结果 注射用伏立康唑小鼠静脉注射给药LD50为223.07mg/kg，95%可信区间为（208.18～239.03）mg/kg，空白辅料的小鼠静脉注射最大耐受量＞5000mg/kg。结论 注射用伏立康唑对小鼠的中枢神经系统具有一定的急性毒性，其辅料毒性小，对制剂的毒性无累加作用。
[关键词] 伏立康唑；急性毒性；空白辅料
[中图分类号] S859 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2011）32-04-02
Acute Toxicity Study of Voriconazole and Blank Supplement for Intravenous Infusion in Mice
GUO Min ZHU Liping LIU Jing QIAO Hongqun
Nanjing University of Technology，Jiangsu Provincial Institute of Material Medica， Jiangsu Center for Safety Evaluation of Drugs，Nanjing 210009，China
[Abstract] Objective To compare the acute toxicity of Voriconazole and blank supplement with intravenous administration in mice，and explore the toxic ingredients and toxic organs. Methods LD50 test on Voriconazole：70 ICR mice were randomized into 7 groups，respectivly received an intravenous of Voriconazole at the dose of 274，247，222，200，180，162mg/kg and equivalent volume 0.5% glucose injection as control. MLD test on blank supplement：40 ICR mice were randomized into 2 groups，respectivly received an intravenous of Voriconazole at the dose of 5000mg/kg and equivalent volume 0.5% glucose injection as control. Results LD50 of Voriconazole for injection was 223.07mg/kg，95% confidence limit was （208.18-239.03）mg/kg. Maximum tolerance dose of blank supplement more than 5000mg/kg . Conclusion The central nervous system influence was observed in mice that received intravenous injection of Voriconazole.Blank supplement is low toxicity， and has no accumulation effect to preparation toxicity.
[Key words] Voriconazole；Acute toxicity；Blank supplement
伏立康唑是美国Pfizer公司于20世纪90年代开发，2002年被美国食品和药物管理局（FDA）批准上市的抗真菌药物。目前剂型有口服和注射剂，其主要用于侵袭性曲霉菌病、尖端足分支霉菌、镰刀菌属所致严重感染或经其他抗真菌药治疗后无效或不能耐受者[1]。临床不良反应主要有短暂视觉异常、皮疹、头痛、发热、脓毒血症、低血压、恶心、呕吐、腹泻、周围性水肿、呼吸道异常和尿路感染等。药物毒性的发生原因除了与患者体质、药物化合物本身相关外，与制剂所用的辅料也有很大关系。本实验就注射用伏立康唑原料药及其空白辅料的静脉单次给药安全性作评价，探讨注射用伏立康唑制剂的主要毒性成分和急性毒性反应，为临床的进一步开发和应用提供参考。
1 材料与方法
1.1 药物
注射用伏立康唑（珠海亿邦制药有限公司提供，批号：20091101）；注射用伏立康唑空白辅料（珠海亿邦制药有限公司提供，批号：20091101）；临用时用5%葡萄糖注射液配制成相应浓度。
1.2 动物
ICR小鼠110只，SPF级，体重18～22g，中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心，动物生产许可证号：SCXK（均）2007-004，动物按性别分笼饲养（5只/笼）于SPF级动物实验室内，室温（23±3）°C，湿度（55±15）%，自由取食全价鼠颗粒饲料和实验动物饮用水。
1.3 方法
1.3.1 注射用伏立康唑急性毒性 预实验伏立康唑对小鼠的最小致死剂量为160mg/kg、绝对致死剂量为291mg/kg。因此选择274、247、222、200、180、162六个剂量组作为小鼠LD50试验的各剂量水平，组间剂量比为0.9。70只小鼠随机分为7组，每组10只，雌雄各半，分别给予上述6个剂量的伏立康唑和等体积的葡萄糖注射液溶媒对照。给药后1h内密切观察动物反应，24h内作多次观察，以后每天观察1次，连续观察14d。
1.3.2 注射用伏立康唑空白辅料急性毒性 预实验剂量5000、2500、2000mg/kg均无小鼠死亡，限于溶解度与给药体积，故可做最大给药量试验。40只小鼠随机分为两组，每组20只，雌雄各半，分别给予5000mg/kg伏立康唑空白辅料和等体积的葡萄糖注射液溶媒对照。观察频率同上。
1.4 统计学处理
采用Bliss法用POMS软件计算小鼠LD50和95%可信限。
2 结果
2.1 注射用伏立康唑急性毒性
小鼠静脉注射后，各个剂量组均立即出现呼吸急促、翻正反射消失、身体僵直、痉挛、震颤、角弓反张等中枢神经系统中毒症状，给药后次日有部分小鼠出现后肢瘫痪症状，随着剂量的减小症状减轻。给药后小鼠死亡时间集中在1～24h，对急性死亡小鼠进行解剖，肉眼观察未见各主要脏器明显异常变化。实验结束时各组存活小鼠经解剖，未见各主要脏器明显异常变化。具体各组动物死亡情况与死亡时间见表1、表2。经Bliss法计算，注射用伏立康唑小鼠静脉注射给药LD50为223.07mg/kg，95%可信区间为（208.18～239.03）mg/kg。
2.2 注射用伏立康唑空白辅料急性毒性
小鼠静脉注射后，未见明显毒性反应，观察14d无小鼠死亡，症状观察未见异常。实验结束解剖各主要脏器未发现明显异常。注射用伏立康唑空白辅料最大耐受量＞5000mg/kg。
3 讨论
注射用伏立康唑小鼠静脉注射给药LD50为223.07mg/kg，95%可信限为（208.18～239.03）mg/kg。给药后出现一系列中枢神经中毒症状，部分症状如痉挛、震颤等与临床报道的不良反应症状一致[2]。给药次日部分小鼠出现后肢瘫痪，推断其对小鼠的中枢神经系统有一定的急性毒性，并可继发引起外周神经肌肉无力，但48h后可恢复。有文献统计[3-5]，伏立康唑不良反应发生率为29.26%，其中致神经系统损害的比例最高，占不良反应发生总例数的28.13%，与本研究发现的主要急性毒性靶器官为中枢神经系统一致。注射用伏立康唑空白辅料最大耐受量＞5000mg/kg，相对安全。故引起注射用伏立康唑毒性的成分是药物化合物本身，辅料对其毒性无累加作用。
[参考文献]
[1] Herbrecht R，Denning D W，Patterson T F，et al. Voriconazole versus amphotericin B for primary therapy of invasive aspergillosis[J]. N Engl J Med，2002，347（6）： 408.
[2] 朱静. 伏立康唑的药理特性及临床应用[J]. 天津药学，2007，19（4）：48-50.
[3] 官东秀，冯祚臻，俸小平，等. 伏立康唑药物不良反应文献分析[J]. 齐鲁药事，2009，28（8）：507-508.
[4] 国家食品药品监督管理局. 药物非临床质量管理规范[S]. 2003.
[5] 徐叔云，卞如濂，陈修. 药理实验方法学[M]. 第3版. 北京：人民卫生出版社，2002：231-234.
（收稿日期：2011-10-09）
