【www.zhangdahai.com--实习报告】
碘是人体不可缺少的一种营养素，当摄入不足时，机体会出现一系列的障碍，导致碘缺乏病，碘缺乏病(IDD)作为危害人类健康的疾病已引起人们的普遍关注，准确评价人群碘缺乏程度，及时监测补碘后人群的碘营养状况显得尤为重要。尿碘水平是监测及评价人群或个体碘营养状况的重要指标之一，为了解人体内碘营养水平，最敏感的指标就是测定尿碘。尿碘检测目前实验室所采用的方法是砷铈催化分光光度法（WS/T107-2006）。砷铈催化分光光度法测定尿碘是我国标准化了的尿碘测定方法。采用过硫酸铵溶液在100℃条件下消化尿样，利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用，反应中黄色的Ce4+被还原成无色的Ce3+，碘含量越高,反应速度越快，所剩余的Ce4+则越少，在一定的反应温度和时间下测定体系中剩余Ce4+的吸光度值，求出碘含量。该方法测尿碘灵敏度高、结果准确，但由于尿碘含量微量且测定受多种因素干扰影响，操作不当或任何一个环节发生了问题极易造成实验失败或结果不准确，因此对实验要求非常严格。笔者积累了多年的经验，总结出尿碘测定中应该注意的几个问题。
1 实验人员的问题
实验室检验结果的准确性与实验人员素质有着最直接的关系，为确保尿碘检测结果的准确可靠，尿碘检测工作必须由经过尿碘检测培训合格的人员担任，必须严格熟悉检验标准，掌握相关仪器的性能指标、正确操作方法和注意事项，并按照实验室内部质量控制体系进行实验。
2 设备的问题
2.1 设备控制实验设备是实验室开展检验工作，并取得准确可靠的检测数据的重要因素之一。因此实验室仪器设备必须根据检验工作任务和发展要求进行合理化配置。同时为了延长仪器设备的使用寿命，提高使用效率保证检验数据的准确可靠，应对每台仪器进行维护，严格按照计量认证和本单位质量管理体系的要求进行管理。本实验主要是要保证控温消解仪、超级恒温水浴箱的温度控制，723分光光度计稳定性的管理控制，加样枪等的检定。
2.2 玻璃器皿的要求 本实验所有采用的玻璃器皿：（1）移液管、容量瓶、刻度吸管均需要进行强制检定；（2）浸泡前清洗至不挂水珠，宜用品牌洗衣粉（雕牌、白猫等）洗刷有较好效果，不宜用洗洁精；（3）采用10%左右的盐酸浸泡过夜，必须保证浸泡盐酸浓度足够，这一步往往容易忽略，因为反应体系中存在ClO-、ClO3-、Cl-离子对砷铈反应速度有影响，只有采用较高浓度的Cl离子才可以避免上述离子的影响，同时也可以屏蔽二价汞离子的影响。否则实验有可能因为反应过快全部褪色而失败。（4）浸泡后必须用自来水冲洗数次，再用纯水冲洗数次；（5）加样洗头建议采用一次性吸头，因为吸头不易清洗，重复使用会导致交叉污染，导致实验失败。（6）不宜采用稀硫代硫酸钠溶液浸泡。
3 实验环境的问题
实验室环境条件是保证检验工作正常开展的保障，也是确保检验结果正确可靠的必要条件。本实验的环境条件要求：（1）建议采用专用实验室，条件实在不够的情况，必须与碘盐实验室分开且室内不能存放含碘的其他试剂和样品；（2）操作台面用1%的硫代硫酸钠搽洗。
4 药品试剂的要求
优质合格的试剂是保证实验成败和检验结果准确可靠的关键因素之一，本实验的试剂要求严格，必须严格按照标准要求选用和配制。
4.1 过硫酸铵溶液
4.1.1 正常的过硫酸铵固体试剂的颗粒应为透明状晶体，如果变成白色粉末状（非晶体）或者白色结晶快状或水湿带液状都不适合使用，否则会导致消化效果大受影响，致使标准曲线和空白管的吸光度值偏小，标准曲线斜率小，而趋于平坦，样品的测定结果误差大。
4.1.2 标准中是称取114.1g过硫酸铵溶于500ml去离子水中，而实际操作中往往容易理解成称取114.1g过硫酸铵定容至500ml，而这种配法是错误的。由于过硫酸铵溶解有10%的正体积效应，溶液将变成550ml左右，实际浓度为0.9mol/L，所以需要按照标准规定的操作步骤操作即使用500ml水一次性溶解称量的过硫酸铵。
4.1.3 过硫酸铵溶液容易分解，建议最好现用现配。
4.2 浓硫酸和氯化钠必须用优级纯。笔者在实验中采用过分析纯浓硫酸，结果不是褪色太快就是标准曲线线性不理想，实验结果也与实际结果不符，换用优级纯后实验结果明显好转。
4.3 硫酸铈铵溶液
4.3.1 硫酸铈铵容易受潮而不利于准确称量，如果采用受潮的试剂，则会导致Ce4+浓度偏低，使吸光度值偏小，实验结果误差增大。
4.3.2 硫酸铈铵溶液配制后，其颜色随时间而变化，在新配制的12h内变化最大，此后变化缓慢，因此新配制的硫酸铈铵溶液应放置过夜后使用。
4.3.3 市面上出售的硫酸铈铵大都是四水合的，称取的时候特别注意要称取50.8g而不是48.0g。
4.4 标准溶液的配制
4.4.1 碘酸钾：建议称取5.0g烘烤3h。
4.4.2 标准中间液必须使用10.00ml移液管吸取；
4.4.3 用5.00ml刻度吸管配制标准系列，每个浓度都要从“0”刻度开始吸取，不提倡使用其它系列的刻度吸管分别吸取。
4.4.4 要选用经过检定的刻度吸管，不提倡使用加样枪吸取标准系列。
4.5 试剂配制顺序的问题笔者认为严格按照标准所述的顺序进行试剂配制即先配制前面几种溶液，最后配制标准溶液和标准系列，并且配制标准后洗手，可杜绝标准干扰。
5 分析过程的问题
5.1 消化过程
5.1.1 消化的好与坏直接关系检测结果的准确性，方法要求恒温消解仪孔间温差≤1℃，可采用试管里加入一定量水来测定孔间温差。
5.1.2 可使用控温烤箱消解，但是不可开吹风功能；在通风橱内消解建议不开排风设备。
5.1.3 选择同样规格的硬质玻璃管15mm×20mm。
5.1.4 严格控制消化温度100-105℃，消化时间1h。
5.1.5 消化结束后放空气中自然冷却，不要用水急冷，使其充分放出消化产生的氯气、氧气等。
5.2 测定过程的要求
5.2.1 加入亚砷酸后，放置15min应该准确，不能过长或过短，一方面除使反应体系温度平衡以外，还要使碘酸根与亚砷酸充分反应，全部变成碘离子；另一方面避免碘离子被空气氧化成碘分子挥发损失。
5.2.2 普通的手摇震动存在试剂混匀不够快捷和彻底，所以最好使用混旋器混匀，可提高结果的准确性。
5.2.3 加入硫酸铈铵速度不仅要快，而且由于硫酸铈铵溶液附壁，所以在吸取时要注意防止产生气泡，以免影响加入量。同时最好用干净滤纸擦干吸头外壁，加样时尽量不要靠试管壁。
5.2.4 严格控制反应温度和时间，建议使用超级恒温水浴箱进行控温，同时用温度计检查水浴温度，做到温度波动不超过0.3℃。反应时间控制待第一管的吸光度达到0.15~0.20之间开始比色，所以建议第一管（300μg/L）多做1-2管用于查看吸光度。
6结果评定的要求
6.1 要求标准曲线相关系数的绝对值≥0.999。
6.2 任取标准曲线的2点带入方程，其拟合值和理论值的相对偏差≤5%。
6.3“0”管与“300”管的光密度之差大于0.8。
综上所述，尿碘检测是一项严格规范的检验操作工作，需要广大从事尿碘检测工作的实验室人员引起足够重视。同时只要严格按照标准方法要求和本文提出的这几个值得注意的几个关键问题进行实验操作，就可以提高尿碘检测的成功率，尿碘测定结果的准确性也可以得到很好的控制。
参考文献
[1] 李红梅，尿碘测定的质量控制，基层医学论坛，2009.6.
[2] 张亚平，地方病监测中碘检测的质量控制，中国地方病杂志2008.2.
[3]阎玉芹，尿中碘的过硫酸铵消化-砷铈催化分光光度法，中国地方病学杂志，2004.23（6）582.
